203363. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 2',3'-didezoxi-2',2'-difluor-nukleozidok és ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására

HU 203363B

val telítjük. Az oldatot ezután szobahőmérsékletre melegítjük fel és egy éjjelen át kevertetjük. Az oldószert ledesztilláljuk és a maradékot szilikagélen kromatografáljuk. Az eluálást 5% metanolt tartalmazó metilénklorid—• 10% metanolt tartalmazó metilénklorid tartományban grádiens elucióval végezzük. A termék-frakciókat egyesítjük és bepároljuk. 6,3 mg béta-l-(2,6-diamino-9H-purin-9-il)-2,3-didezoxi-2,2-difluor-ribózt kapunk.

1H NMR (CD3OD, 300 MHz); delta: 2,55 (m, 1H, 3’A); 2,85 (m, 1H, 3’B); 3,7 (m, 1H, 5’A); 3,9 (m, 1H, 5’B); 4,38 (m, 1H, 3’B); 3,7 (m, 1H, 5’A); 3,9 (m, 1H. 5’B); 4,38 (m, 1H, 4’); 6,1 (m, 1H, 1’); 8,05 (s, 1H, H-8).

Tömegspektrum: m/e= 286= P

3. példa

Béta-l-(2-amino-6-oxo-9H-purin-9-il)-2,3-di

dezoxi-2,2-dinuor-ribóz

12 mg (0,042 mmól) 2. példa szerintivegyületct 2 ml vízben oldunk és az oldathoz szobahőmérsékleten adenczin-dezaminázt (Sigma) adunk. A reakciót folyadékkromatográfiáva! (C18, 15% metanolt tartalmazó víz, 1 ml/perc) követ jük és időnként enzimet adagolunk, amíg úgy látszik, hogy a reakció befejeződött. A reakcióelegyet ekkor az enzim inaktiválására visszafolyatásig melegítjük, majd szilárd anyaggá pároljuk be. A szilárd anyagot D2O ból átkristályosítjuk; 6,3 mg keresett terméket ka punk.

1H NMR (D20,300 MHz); delta: 2,67 (m, 2H, 3’); 3,75 (m, 1H), 5’A); 3,9 (m, 1H), 5’B); 4,5 (m, 1H, 4’); 6,1 (m, 1H, 1 ’); 8,0 (s, 1H, H-8),

Tömegspektrum: m/e= P.

4. példa

Béta-l-(5-metü-2,4-dioxo-lH,3H-pirimidin-lil)-3-azido-2,3-didezoxi-2,2-difluor-ribóz

4,0 g (14 mmól) béta-í-(5-metil-2,4-dioxolH,3H-pirimidin-l-il)-2-dezoxi-2,2-difluor-ribózt és 4,8 g (17 mmól) trifenil-metil-kloridot 40 ml száraz piridinben szuszpendálunk és a szuszpenziót visszafolyató hűtő alatt 3 órán át forraljuk, majd egy éjjelen át szobahőmérsékleten kevertetjük. A reakcióelegyet ezután jeges vízbe öntjük és éterrel háromszor extraháljuk. A szerves réteget 1,0 N sósavval, majd vízzel és telített vizes nátrium-klorid oldattal mossuk, nátriumszulfát fölött szárítjuk és csökkentett nyomáson bepároljuk. 7,34 g béta-1 -(5- metil-2,4-dioxo-lH,3H-pirimidin-l-ü)-5-trifenil -metil-2-dezoxi-2,2-difluor-ribózt kapunk.

Tömegspektrum: m/e= 520= P.

7,12g (14 mmól) fenti köztiterméket 248 ml metilénklorid és 4,5 ml piridin elegyében oldunk és az oldathoz 0 °C-on hozzáadunk 5,2 g (19 mmól) „trifiic”-anhidridet. A reakcióelegyet 3 órán át 0 "C-on kevertetjük, majd csökkentett nyomáson bepároljuk. A kapott maradékot etilacetáttal keverjük el és hideg vízzel, telített nátrium-hidrogén-karbonáttal és telített nátrium-klorid oldattal mossuk, majd szárazra pároljuk. A maradékot toluollal keverjük össze és bepárlással eltávolítjuk az oldószert. 9,13 g béta-1 -(5-metil-2,4-dioxo-1 H,3H-pirimidin-1 -il)

5-trifenil-metil-szulfonil-2-dezoxi-2,2-difluor-ri bózt kapunk.

13

‘fl NMR (CDCI3, 300 MHz); delta: 2,05 (s. 3H, 5-CH3); 3,45 (m, 1H, 5’A); 3,7 (m, 1H, 5’B); 4,28 (m, 1H, 4’); 5,5 (m, 1H, 3’); 6,3 (m, 1H, 1’); 7,35 (m, 16H, Ph3 Sí H-6).

Tömegspektrum: m/e= 652= P.

9,13 g (14 mmól) előbbi köztiterméket és 9,8 ml

1,0 N nátriumhidroxid oldatot 100 ml etanolban oldunk és az oldatot 12 órán át szobahőmérsékleten kevertetjük. A reakcióelegyet 1,0 N nátriumhidroxid oldatot 100 ml etanolban oldunk és az oldatot 12 órán át szobahőmérsékleten kevertetjük. A reakcióelegyet 1,0 N sósavval semlegesítjük, majd az etanolt ledesztilláljuk. Csapadékot kapunk, amelyet összegyűjtünk és szárítunk. 2,97 g béta-l-(5-metil-2,4-dioxo-1 H,3H-pirimidin-1 -il)-5-trifenil-metü -3-(2-anhidro)-2-dezoxi-2,2-difluor-ribóz keletkezik.

!H NMR (CDCI3, 300 MHz); delta: 1,95 (s, 3H, 5-CH 3); 3,4 (m, 2H, 5’A&B); 4,5 (m, 1H, 4’); 4,85 (m, 1H, 3’); 5,3 (m, 1H, 1’); 6,9 (s, 1H, H-6); 7,3 (m, 15H,

PI13).

Tömegspektrum: m/e= 502= P.

2,7 g (5,4 mmól) előbbi köztiterméket 80%-os ecetsavban szuszpendálunk és a szuszpenziót 2,5 órán át visszafolyató hűtő alatt forraljuk. Az oldatot hagyjuk lehűlni és a képződött csapadékot összegyűjtjük. Az azonosítás azt az eredményt szolgáltatja, hogy ez trifenil-metanol. A szűrletet szárazra pároljuk, majd vizet adunk a maradékhoz és a keveréket hexánnal extraháljuk. A vizes réteget szárazra pároljuk; így 1,65 g béta-l-(5-metil-2,4-dioxolH,3H-pirimidin-l-il)-2-dezoxi-2,2-difluor-xilózt kapunk.

!H NMR (CD3OD, 300 MHz); delta: 1,95 (s, 3H, 5-CH3); 4,3 (egy sorozat M, 4H, 3’,4’ & 5’ A& B); 6,15 (dd, 1H, l’);7,6(s, 1H.H-6);

Tömegspektrum: m/e= 278=P.

0.25 g (0,9 mmól) előbbi köztiterméket, 5 ml jégecetet és 0,06 ml (3,3 mmól) vizet 8 órán át visszafolyató hűtő alatt forralunk. A reakcióelegyet hagyjuk lehűlni, majd csökkentett nyomáson szárazra pároljuk. A kapott maradékot szilikagél oszlopon kromatografáljuk; az eluálást 5% metanolt tartalmazó metilénkloriddal végezzük. A termék-frakciókat összegyűjtjük, egyesítjük és szárazra pároljuk. 0,2 g béta-l-(3-metil-2,4-dioxo-lH,3H-pirimidin- 1 -il)-5-acetil-2-dezoxi-2,2-difluor-xilózt kapunk.

0,1 g (0,3 mmól) előbbi köztiterméket 0,066 ml (0,82 mmól) piridin és 8 ml metilénklorid elegyében oldunk és az oldathoz 0 “C-on hozzáadunk 0,115 g (0,41 mmól) „triflic”-anhidridet. A reakcióelegyet 1,5 órán át 0 °C-on kevertetjük; ezután jég és telített nátrium-hidrogén-karbonát oldat keverékére öntjük. A szerves réteget elkülönítjük, telített nátriumklorid oldattal mossuk, nátriumszulfát fölött szárítjuk és szárazra pároljuk. 0,14 g béta-1 -(5-metil-2,4-dioxo-lH,3H-pirimidin-l-il)-5-acetil-3-tri fluor-metil-szulfonil-2-dezoxi-2,2-difluor-xilózt kapunk.

lH NMR (ODCI3, 300 MHz); delta: 1,95 (s, 3H,

5- CH3); 2,05 (s, 3H, COCH3); 4,45 (m, 3H, 4’ 4 5’ A&B); 5,3 (m, 1H, 3’); 6,35 (m, !H, 1’); 7,05 (s, 1H,

6- H).

Tömegspektrum: m/e= 452= P.

0,13 g (0,28 mmól) előbbi köztiterméket és 0,14 g

14

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

50

65