203363. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 2',3'-didezoxi-2',2'-difluor-nukleozidok és ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
HU 203363B (2,8 mmól) lítium-azidot 5 ml dimetil-formamidban oldunk és az oldatot 12 órán át (-30 °C)-on kevertetjük. A reakcióclegyet bepároljuk és a kapott maradékot toluollal kétszer lepároljuk. A maradékot etilacetátban oldjuk és vízzel mossuk, szárítjuk és csökkentett nyomáson bepároljuk. 0,06 g béta-1 - (5-metil-2,4-dioxo-lH,3H-pirimidin-l-il)-5-aceti l-3-azido-2,3-didezoxi-2,2-difluor-ribózt kapunk. Tömegspektrum: m/e= 345= P. 0,06 g (0,17 mmól) előbbi közti terméket 20 ml metanolos telített vízmentes ammónia-oldatban oldunk és az oldatot 2 órán át (-8 °C)-on kevertetjük. Az oldatot szárazra pároljuk, vákuumban, 40 ’C-on. A maradékot szilikagélen kromatografáljuk; az eluálást 7% metanolt tartalmazó metilénkloriddal végezzük, amely 1 térfVtérf.% cc. ammóniumhidroxidot tartalmaz. A föfrakciót összegyűjtjük, egyesítjük és szárazra pároljuk. Az anyagot preparatív HPLC-vel tisztítjuk tovább, Cl8 fordított fázisú oszlopot alkalmazva; az eluálást 1/1 térf7térf. víz/metanol eieggyel végezzük. Az oszlopról másodikként leváló vegyületet a keresett termékként azonosítjuk. Tömege 12,1 mg. 1H NMR (CD3OD, 3000 MHz); delta: 1,75 (s, 3H, 5-CH3); 3,7 (m, IH, 5A); 3,9 (m, 2H, 3’ & 5B); 4,5 (m, 1H, 4’); 6,2 (láthatóan t, 1H, 1 ’); 7,7 (s, 1H.H-6). Nagyfelbontású tömegspektrométerrel megfigyelt: 304,08575 (M+l); számított: C10H12N5O4F2:304,08575. TR: 2120 cm*1. 5. példa Béta- l-(5-metil-2,4-dioxo- iH,3H-piridin-1 -il) -2,3 -d idezoxi-2,2-difl uor-ribóz 0,2 g (0,63 mmól) béta-l-(5-metil-2,4-dioxolH,3H-pirimidin-l-ü)-5-acetii-2-dezoxi-2,2-difl uor-ribózt, és 0,02 g dimetilamino-piridint 5 ml száraz piridmben oldunk és az oldathoz nitrogén atmoszférában hozzáadunk 0,13 g (0,10 ml, 0,75 mmól) fenil-klór-tionokarbonátot. A reakcióelegyet szobahőmérsékleten egy éjjelen át kevertetjük. 19:1 térfJtcrf. metilénklorid:metanol eieggyel vékonyrétegkromatográfia arra mutat, hogy kiindulási anyag nincs jelen. A reakcióelegyet háromszor bepároljuk toluollal. A mardékot etilacetát és víz elegyében oldjuk és egyszer mossuk 1,0 N sósavval, egyszer 10 térf.%-os nátrium-hidrogén-karbonát oldattal, egyszer vízzel és egyszer telített nátriumklorid oldattal. A szerves fázist vízmentes nátriumszulfát fölött szárítjuk és vákuumban betöményítjük. 0,47 g béta-l-(5-metil-2,4-dioxo-lH,3H-pirimidin-1-il)-5-acetil-3-(0-fenil-karbono-tioxi)-2- dezoxí-2,2-difluor-ribózt kapunk, amelyet további tisztítás nélkül használunk fel. 0,47 g (0,63 mmól) előbbi közti terméket és 0,02g 2,2’-azo-bisz(2-metil-propionitrüt) 9 ml száraz toluolban oldunk és az oldathoz nitrogén atmoszférában hozzáadunkO,34 ml (i ,3 mmól) tribuíil-ón-hidridet. A reakcióelegyet 3,5 órán át 85 °C-on tartjuk és további 0,17 ml tríbutü-ón-Uidridet adunk a reakcióelegyhez, A reakcióelegyet 1 órán át 85 ’C-on kevertetjük és vákuumban kb. 50 ’C-on betöménvítj ük. A maradékot kétszer eldörzsöl jük 15 ml hexánnal. A hexánt dekantáljuk és a maradékot vákuumban betöményítjük. A maradékot szüíciumdio-15 xidon kromatografáljuk; eluálószerként 1,5/1 térfótérf. etilacetát/hexán elegyet alkalmazunk. A fő komponenst tartalmazó frakciókat egyesítjük és az oldószert ledesztilláljuk. 0,09 g béta-l-(5-metil-2,4-dioxo-lH-3H-pirimidin-l-il)-5-acetil-2,3-did ezoxi-2,2-difluor-ribózt kapunk. 0. 09 g (0,30 mmól) előbbi köztiterméket 10 ml metanolos telített vízmentes ammónia-oldatban oldunk és az oldatot 2 órán át 0-5 °C-on kevertetjük. Az oldatot vákuumban szárazra pároljuk. A fehér maradékot minimális mennyiségű metanolban oldjuk és az oldathoz 20 ml metilénkloridot adunk. Ezt az oldatot bepárlással 3 ml térfogatra töményítjük be és kristályok megjelenéséig metilénkloridot adagolunk. A kristályokat összegyűjtjük; 51 mg keresett terméket kapunk. *HNMR (CD3OD, 300 MHz); delta: 1,85 (s, 3H, 5- CH3); 2,5 (m, 2H, 2’); 3,65 (m, 1H, 5’A); 3,9 (m, 1H, 5’B); 4,3 (m, 1H),4’); 6,1 (m, 1H, l’);7,8(s, 1H, 6- H). Tömegspektrum: m/e= 262= P. 1. készítmény Béta-1 -(2,6-diamino-9H-purin-9-il)-5-benzoil -2-dezoxi-2,2é-difluor-ribóz 11,16 g (22 mmól) alfa,béta-l -(2,6-diamino-9H- purin-9-il)-3,5-dibenzoil-2-dezoxi-2,2-difluor-ri bóz oldatába és 0,7 g (22 mmól) hidrazint adunk. Az oldatot 3 órán át 65 °C-on tartjuk. Ismét hidrazint adagolunk (0,35 g, 11 mmól) és a melegítést 4 órán át folytatjuk. Újabb hidrazin-adagolás után (0,35 g, 11 mmól) az oldatot további 4 órán át melegítjük. A reakcióelegyet hagyjuk lehűlni és az oldószert csökkentett nyomáson eltávolítjuk. A kapott maradékot szilikagél oszlopra visszük fel és grádiens elucióval (2,5% metanolt tartalmazó metilénldorid — 5% metannolt tartalmazó metilénldorid) nyerjük ki. A kiindulási anyag fennmaradó hányada hagyja el először az oszlopot; ezt követi az alfa-anomer (4,96 g), maid a béta-anomer (1,75 g). rH NMR (DMSO-d6, 300 MHz); delta: 4,25 (m, 1H, 3’), 4,7 (m, 3H, 5’A&B, 4’), 5,95 (széles váll, 2H, NH2),6,15(m, 1H), l’),6,5(d, 1H,OH),6,85(széles váll, 2H, NH2), 7,7 (m, 5H, benzoil), 7,82 (s, 1H, C- 8). tömegspektrum: m/e= 407=P+1. 6. példa Alfa,béta-1 -(6-amino-9H-purin-9-il)-2,3-dide zoxi-2,2-difluor-ribóz 22,1 g (58 mmól) 3,5-bisz(benzoil)-2-dezoxi-2,2- difluor-ribózt és 8,0 g (116 mmól) imidazolt 410 ml dimetilformamidban oldunk és az oldathoz hozzáadunk 8,8 g (58 mmól) terc-butil-dimetil-szilil-kloridot. Ezt a reakcióelegyet 12 órán át szobahőmérsékleten kevertetjük. Az elegyet csökkentett nyomáson szárazra pároljuk. A maradékot etilacetáttal keverjük össze és 1,0 N sósavval, telített nátriumhidrogén-karbonát oldattal, vízzel, telített nátrium - kiorid oldattal mossuk, nátrium-szulfát fölött szántjuk és szárazra pároljuk, csökkentett nyomáson. 24,5 g l-(terc-butil-dimetil-szililoxi)-3,5-bisz(benzoil)-2-dezoxi-2,2-difluor-ribózt kapunk. 19,12 g (39 mmól) előbbi köztiterméket 560 ml metanolban oldunk, az oldatot (-20 °C)-ra hűtjük és 16 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 9
