203363. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 2',3'-didezoxi-2',2'-difluor-nukleozidok és ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
HU 203363B távolításához. Ezeket a hidrolíziseket előnyösen hidroxicsoportot tartalmazó oldószerekben, különösen vizes alkanolokban hajtjuk végre. A reakció végezhető azonban bármilyen megfelelő oldószerben, pl. poliolokban — ideértve az etilénglikolt —, éterekben, pl. tetrahidrofuránban és hasonló vegyi' letekben; ketonokban — pl. acetonban és etil-metilketonban és más poláris oldószerekben, pl. dimetüszulfoxidban. Az acil védőcsoportok lehasítása végezhető más bázisokkal, pl. a következőkkel is: nátrium-metilát, kálium-terc-butilát, hidrazin, hidroxilamin, ammónia, alkálifém-amidok és szekunder a minők, pl. dietil-amin stb. A sav-védőcsoportok eltávolítására savas katalizátorokat is alkalmazhatunk, amilyen pl. a metánszulfonsav, sósav, hidrogénbromid, kénsav, vagy végezhet jük ezt a műveletet savas ioncserélő gyantákkal is. Az ilyen hidrolízist aránylag magas hőmérsékleten végezzük, pl. az elegy visszafolyatási hőmérsékletén, d különösen erős savak alkalmazása esetén alacsony hőmérsékleteket (pl. a szobahőmérséklet körülieket) is választhatunk. Az éter jellegű védőcsoportok eltávolítását is mert módon végezzük, pl. etán-tiollal és alumíniumkloriddal való reagáltatással. Egyik reakciólépésben sincs szükség szokatlan reagens-feleslegek alkalmazására. Mint ez a szerves szintézisek esetében szokásos, ajánlatos — és gazdaságos — módon pl. az olcsóbb reagensből mérsékelt (az 1,05-2-sz.eres tartományba eső) felesleget veszünk és ily módon biztosítjuk, hogy a drágább reagensek teljesen felhasználódjanak. Mint az előbbiekben megjegyeztük, előnyben részesítjük a találmány szerinti beta-nukleozidok előállítását. Egy különlegesen előnyös enzimes eljárást találtunk olyan béta-nukleozidok előállítására, amelyekben Rz jelentése 2-amino-6-oxo-9H-purin. Az eljárást úgy hajtjuk végre, hogy az alfa- és bétanukleozidok racém keverékét — ahol Rz jelentése 2-amino-6-oxo-9H-purin. Az eljárást úgy hajtjuk végre, hogy az alfa- és béta-nukleozidok racém keverékét — ahol R2 jelentése 2,6-diamino-9H-purin — adenozin-dezaminázzal, előnyösen I. típusú adenozin-dezaminázza! reagáltatjuk, .Az enzim előnyösen a béta-nukleozid 6-helyzetéből távolítja el az aminocsoportot. Az előbbi kinyerési eljárásban a megfelelő kiindulási anyagot egy oldószerben oldjuk és ehhez az oldathoz kb. ekvimoláris mennyiségben vagy feleslegben (mimellett az alsó koncentráció a katalitikus mennyiség) adunk adenozin-dezaminázt. Számos oldószer alkalmazható, de a kitüntetett oldószerek közé tartozik a poláris típusú, amilyenek pl. az alkoholok, vagy a víz, amelyet különösen előnyben részesítünk. A reakciót a kb. 0 °C — kb. 100 °C tartományba eső hőmérsékleten folytatjuk le; ekkor a folyamat kb. 10 perc — kb. 12 óra alatt lényegében lezajlik. A reakciót előnyösen kb. 1-4 órán át végezzük a kb. 20 °C — kb. 25 °C tartományba eső hőmér sékleten. Ha az előbbi reakciót a feltüntetett közelítő maximális időn túl engedjük végbemenni, megfelelően nőni fog a képződött alfa-izomer mennyisége. Ezért annak érdekében, hogy maximálisra növeljük az előállított béta-izomer mennyiségét, előnyben része9 sítjük azt a megoldást, hogy a reakció előrehaladását nagyteljesítményű folyadék-kromatográfiával vagy fékonyrétegkromatográfiával követjük. A bármelyik eljárással előállított keresett bétadifluor-nukleozidot a szokásos technikákkal könynyen kinyerhetjük; ilyen pl. a keresett vegyület extrakciója szerves oldószerrel vagy előnyösen a kicsapódott szilárd anyag vákuumszűréssel való összegyűjtése. A keresett vegyület kívánt esetben tovább tisztítható a szokásos oldószerekből végzett kristályosítással vagy szilárd hordozón — így szilikagé - len vagy alumíniumoxidon — végzett oszlopkromatográfiával vagy különösen C18 nagyteljesítményű folyadékkromatográfiával. Ilyen további tisztításra azonban rendszerint nincs szükség. A találmány szerinti, gyógyászati szempontból elfogadható savaddíciós sókat rendszerint úgy állítjuk elő, hogy a találmány szerinti 2\3’-didezoxi- 2’,2’-difluor-nukleozidot ekvimoláris mennyiségű vagy feleslegben vett savval reagáltatjuk. A reagenseket általában olyan közegben hozzuk össze, amely közös oldószerük — ilyen pl. a dietü-éter vagy a benzol —, és a só rendszerint 1 órától lOnapigterjcdő idő alatt kicsapódik az oldatból, majd szűréssel különíthető el. A találmány szerinti vegyületek előállításához alkalmazott kiindulási anyagok jól ismertek és könnyen előállíthatok a szakember által általánosan alkalmazott szokásos eljárásokkal. Az 1-helyettesi tett 2-dezoxi-2,2-difluor-ribóz- és -xüóz-származékokat a 4 526 988 és 4 692 434 sz. amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás ismerteti és e hivatkozásokat a jelen leírás részévé tesszük. A következő példák a találmány szerinti konkrét vegyületeket mutatják be. A példákat nem azzal a szándékkal adjuk közre, hogy bármilyen vonatkozásban korlátozzuk a találmány oltalmi körét és azok nem is értelmezhetők ekként. 1. példa Béta-1 -(4-amino-2-oxo- lH-pirimidin-1 -ü)-2,3 -didezoxi-2,2-difluor-ribóz A. Béta-l-[4-(2,2-dimetil-l-oxo-propilamino)- 2-oxo-lH-pirimidin-l-ilj-5-(2,2-dimetil-l-oxopropiloxi)-2-dezoxi-2,2-difluor-ribóz 0,9 g (0,003 mól) béta-1 -(4-amino-2-oxo-1 H-pirimidin-l-il)-2-dezoxi-2,2-difluor-ribóz és 0,726 g (0,742 ml, 0,006 mól) pivaloilklorid keverékét 10 ml száraz piridinben kevertetés közben kb. 3,5 órán át visszafolyató hűtő alatt forraljuk. A piridint vákuumban 45 °C-on eltávolítjuk. A kapott szuszpenziót toluolban oldjuk és vákuumban ismét betöményítjük. A maradékot etilacetátban oldjuk és a kapott oldatot egyszer vízzel, egyszer 2N sósavval, egyszer telített nátrium-hidrogén-karbonát oldattal, egyszer vízzel és végül egyszer telített nátrium-klorid oldattal mossuk. A szerves fázist vízmentes magnéziumszulfát fölött szárítjuk és’/ákuumban betöményítjük; fehér maradékot kapunk. Ezt a maradékot 150 ml forró etilacetátban oldjuk, majd az oldatot betöményítjük, a kristályosodás megindulásáig. A kristályokat szűrjük és vákuumban 50 °C-on szárítjuk. 0.656 g béta-l-[4-(2,2-dimetil-l-oxo-propilamino)-2-oxo-lH-pirimidin-l-il]-5-(2,2-dimetil-l -oxo-propiloxi)-2-dezoxi-2,2-difluor-ribózt kalő 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 6
