203321. lajstromszámú szabadalom • Eljárás difenil-szulfid-származékok és hatóanyagként e vegyületeket tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
HU 203321 B 15 16 SS* 3 , M / csontvelősejtet 10% vizsgálandó mintával inkubá- A fenti sejtek proliferációját a HTdR beépülés lünk 96 lyukú tenyésztőlemezen, 3 napon keresztül. meghatározásával állapítjuk meg. V. táblázat: CSF proliferációs vizsgálat eredményei Vegyület %-os növekedés normális szérumhoz képest 1. 2. 3. 4. 5. Átlag Értékelés N’-{4-[(4-fluor-fenil)-szulfonilj-fenilj-acetamid 35,1 N.V. 50,0 22,0 42,5 37,5 + N\N’”-[szulfonil-bisz(p-fenilén)]-bisz[N,N-dietü-acetamidin] 23,1 104,0 0,0 4,8 11,5 28,6 N’,N’"-[szulfonü-bisz(p-fenüén]-bisz-[N,N-dimetU-butiramidin] 14,4 122,0 211,0 22,4 112,5 96,0 +++ N’,N’”-[szulfonü-bisz(p-fenilén]-bisz[N,N-dimetü-propionamidin] 0,0 164,0 150,0 66,0 75,0 91,0 +++ bisz{4-[(l-metil-2-pirrolidinil)-imino]-fenü}-szulfon 25,6 210,0 116,0 96,0 71,0 103,0 +++ N’-{4-[(4-fluor-fenil)-szulfonil]--fenil}-N-N-dimetil-propionamidin 33,3 142,0 N.V. 42,0 N.V. 72,0 ++ N’-{4-[(4-fluor-fenil)-szulfonil]-fenil}-N-N-dimetil-propionamidin--mono(hidrogén-klorid) 108,0 130,0 N.V. 29,0 N.V. 89,0 ++ N.V.: nem vizsgált *: 4 532 349. sz. USA-beli szabadalmi leírásból ismert vegyület negatív ±: normálist 30%-kal meghaladó növekedés +: normálist 30-50%-kal meghaladó növekedés ++: normálist 50-90%-kal meghaladó növekedés +++: normálist 90%-kal meghaladó növekedés VI. Endogén CFU-S meghatározása radioprotektfv hatás vizsgálatára Balb/c egereknek orálisan, egyszeri 25,100 vagy 200 mg/kg dózisban adjuk az immunmodulátor hatású vegyületet, az első napon azután, hogy az egész testet 600 rád gamma-sugárzásnak tettük ki. A besugárzás után 2 héttel az egereket leöljük, és a lépeket eltávolítjuk, majd a telepszámlálás előtt Bouinféle fixálóval fixáljuk. A táblázatban megadott értékek a lépenkénti telepek számát jelentik. VI. táblázat: Radioaktív besugárzás elleni védőhatás vizsgálata endogén CFU-S meghatározásával Telcpszám/lép 600 rád kontroll 35 600 rad+N’,N’”-[szulfonil--bisz(p-fenilén)]-bisz[N,N-dietil-propionamidin] 400 mg/kg 35 200 mg/kg 73 100 mg/kg 46 25 mg/kg 52 VII. CPU-C meghatározása mieloid sejtek regenerálódását fokozó hatás mérésére, 5-Fu terápiát követően C3H/Hej egereket intraperitoneálisan 150 mg/kg dózisban 5-fluor-uracillal (5-FU) kezelünk. Négy nap múlva az állatoknak orálisan, egyszeri 25,100, vagy 200 mg/kg dózisban adjuk az immunmodulátor hatású vegyületet. Három nappal később az egereket leöljük, és a csontvelőt 23-as méretű tűvel leszívjuk és 5 ml RPMI-1640 tápközeget tartalmazó csövekbe szétmérünk. Az alikvotokat 0,2% ecetsavat és 0,2% kristályibolyát tartalmazó PBS-sel hígítjuk. A combcsontonkénti magvas sejtek számát vérsejtszámlálóval, közvetlen számolással határozzuk meg. A sejteket exogén CSF forrással (50 p.g GMCSF/lemez) kiegészített közeget tartalmazó agarózlemezre szélesztjük. Hét nap múlva meghatározzuk az 50, vagy annál több sejtből álló telepek számát és az értékeket CFU-C/100000 sejt-ben fejezzük ki. Az eredményeket az 1-4. ábrákkal szemléltetjük. Az egyes ábrákon látható jelölések jelentése: l.ábra: Gl-normális G2= 5-fluor-uracil G3= 5-fluor-uracil + kontroll (N-{4-[(4-fluor-fenil)-szulfonil]-fenil}-acetamid, 4 532 349. sz. ame-9
