203221. lajstromszámú szabadalom • Eljárás diamidok szelektív amidinálására
1 HU 203 221 B 2 zék vagy a peptid-származék szabad sav, észter, amid vagy hidroxámsav formában szerepelhet. A (c) lépés a peptid-kötés hagyományos létesítését jelenti. Végrehajtható a karboxil-csoport aktiválásával, többféle módon. A fő nehézsége - amelyet el kell kerülni - az aminosavak racemizálódása a reakció folyamán, amely számos olyan termékhez vezet, amelyet gyakran igen nehéz szétválasztani. A karboxil-csoportok alkalmas aktiváló formái a következők; karbonsavkloridok (amelyekben azonban olykor racemizálódás fordulhat elő), nitro-szubsztituált, 6-12 szénatomszámú arü-észterek, különösen p-nitro-fenil-észterek, ciano-metil-észterek és tioészterek. Ezek az aktivált származékok mindegyik esetben simán reagálnak a prolin, prolin-származékok, prolin-analógok vagy származékaik amino vagy imino-csoportjaival. Ezen kívül más módszerek is állnak rendelkezésre, amelyekkel elkerülhető a karboxil-aktivált köztitermékek szintézise. A célszerű módszerek karbodiimideket, így dicikloalkil-karbodiimideket, ahol az alkil 3-7 szénatomszámú, különösen diciklohexü-karbodiimidet (DCCI) alkalmaznak dehidráló szerként. Általában a kondenzációs reakció körülményei megfelelnek az általánosan ismert módszereknél használatosakkal, amelyek hőérzékeny és racemizálódásra hajlamos vegyületekre vonatkoznak. Az (e) lépés az R5-CO- vagy -CO-R10 szerkezeti részletet tartalmazó, kis szénatomszámú alkoxi- vagy benzü-észterek egyikének vagy mindkettőjüknek a hidrolízisét jelenti. Bármüyen szokásos hidrolízis-körülmények alkalmazhatók, amelyek nem károsítják a - CO-N(R8)-peptid-kötést vagy nem okozzák a dipeptid racemizálódását, ha a kívánt végtermék diasztereomer. Az (e) lépésben levő hidrolízist savas vagy házikns körülmények között végezzük, disav termékké, amelyet a biológiaüag aktív alaknak tekintünk. A hidrolízis reakcióhőmérséklete 0 és 70 °C között legyen. A reakciót vizes közegben vagy vizet tartalmazó iners oldószerben hajtjuk végre. Az alkalmazott sav általában 0,1 és 2 n között legyen. Ha a reakciót bázikus körülmények között vezetjük, disav előállítása céljából, a reakcióelegyet utóbb savval, így sósavval, ecetsavval vagy kénsavval meg kell savanyítani. A savanyítást -20 és +40 °C között végezzük, mivel a peptid-kötés hőérzékeny, különösen akkor, ha a dipeptid enantiomer formában van jelen. Előnyösen -20 és +30 °C közötti hőmérsékeleten alkalmazunk. Az (e) lépés savas hidrolíziséhez szervetlen és szerves savak egyaránt megfelelőek. A következő szervetlen savak használhatók: sósav, hidrogén-bromid, kénsav, salétromsav, foszforsav és hasonlók. A savas hidrolízishez az alábbi szerves savakat alkalmazhatjuk: triflour-ecetsav, triklór-ecetsav, citromsav, oxálsav és hasonlók. A lúgos hidrolízishez a következő szervetlen bázisokat használhatjuk: nátrium-hidroxid, kálium-hidroxid, kalcium-hidroxid és hasonlók. Szerves bázisokként alkalmazhatók: trimetil-amin, trietü-amin, diciklohexil-amin és hasonlók. A (B) képletű amidok ugyanolyan ismert módszerrel hidrolizálhatók, mint a (B) képletű dipeptidek, vízben vagy vizet tartalmazó iners oldószerekben, katalizátorként bázisokat vagy savakat alkalmazva. A reakciót -20 és +100 °C között hajtjuk végre. Az (i) észterezései lépést a hagyományos észterezési eljárás szerint végezzük. A reakció során kis szénatomszámú alkanolok vagy benzil-alkohol reagál a (B) képletű dipeptiddel, erős szervetlen vagy szerves savak jelenlétében, vízelvonás közben. A következő szervetlen savak használhatók: sósav, hidrogén-bromid, kénsav, és hasonlók. Az alábbi szerves savak alkalmazhatók: trifluor-ecetsav, szulfonsavak, így perfluor-szulfonsav, tuloul-szulfonsav és hasonlók. A (B) képletű észterek azonban diazo-alkánokkal, különösen diazometánnal is előállíthatok, ilyenkor metü-észter képződik. A reakciót rendszerint iners oldószerben hajtjuk végre. Másik alkalmazható módszer szerint a (B) képletű vegyület fémsóját reagáltatjuk kis szénatomszámú alkil- vagy benzil-haloiddal, a megfelelő, kis szénatomszámú alkil- vagy benzü-észter kialakítása céljából. A dipeptid nátrium- vagy cézium-sója vagy egyéb fémsója jó kitermeléssel használható az észter előállítására. Ezen kívül tercier-aminokkal, így 1,8-diazabiciklo-(5.4.0)-undecén-7-tel vagy kis szénatomszámú trialkil-aminokkal, különösen trietü-aminnal alkotott sók is használhatók, mivel oldékonyságuk jobb. Az (i) lépés másik módosítása szerint az észterezést úgy hajtjuk végre, hogy a (B) képletű vegyület adlvagy diacü-haloid ját legalább 2 mól kis sszénatomszámú alkanollal vagy benzil-alkohollal reagáltatjuk, így a reakció simán lejátszódik, és a megfelelő diészter alakul ki. Egy előnyös megvalósítás a reakció megkönnyítése tionil-klorid és a kis szénatomszámú alkanol vagy a benzil-alkohol közötti adduktképzéssel 0 °C alatti hőmérsékleten; így az észter gyorsan kialakul. Az eljárás másik módosítása szerint a (B) képletű dipeptid vegyes savanhidridjét reagáltatjuk az alkanollal vagy a benzü-alkohollal. A reakciót szerves tercier bázisok, így piridin katalizálja. Ismeretes, hogy a (B) képletű szabad peptidek ikerion formában is létezhetnek, egyes karboxil-csoportok disszociálódhatnak ( COO~), ugyanakkor az iminocsoportok (s) vagy az =N-R2 csoport asszociálódhat protonnal. A (B) képletű peptidek vagy előanyagaik az ismert szilárdfázisú eljárással is előállíthatok, különösen szilárdfázisú poliamid gyanták alkalmazásával, amelyek poláris oldószerekkel, így vízzel is duzzaszthatók. A szintézis teljes lejátszódása után a peptidet a poliam Írtról hidrolízissel, hidrogenolízissel vagy átészterezéssel távolítjuk el. Az (a) - (e) lépések kiindulási anyagai vagy ismeretesek az irodalomból, és ismert kiindulási anyagokból ismert módszerekkel (pl. a 12401,65301, vagy 79022számú európai szabadalmi bejelentés szerint) előállíthatok, vagy a leírás kiindulási anyagok előállítására vonatkozó részében közöltek alapján készíthetők. A (B) képletű vegyületek ACE inhibitorok, így blokkolják az angiotenzin I dekapeptid átalakulását angiotenzin Il-vé, amely nagy hatásosságé vémyomáaiövelő faktor. Az ACE inhibitorok tehát csökkentik a vémyo-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 6
