203196. lajstromszámú szabadalom • Eljárás szív-aritmia elleni készítmény előállítására
1 HU 203 196 B 2 A találmány tárgya eljárás szívritmuszavar kezelésére alkalmas, ismert görcsoldó amino-benzamidot tartalmazó gyógyszerkészítmény előállítására. A szív-vérkeringési rendszer betegségei évente ezrek halálát okozzák. Az aritmia olyan szívműködésben 5 zavar, ami szabálytalan szívverésben nyilvánul meg. Tipikus aritmia a kamrai fibrilláció, kamrai tachikardia, fülesei lebegés és fülesei fibrilláció. Számos hatóanyagról ismert, hogy különböző mértékű aritmiaellenes hatása van. A legszélesebb körben 10 alkalmazott antiaritmiás hatóanyagok a gumidé, prokain-amide, lidokain és a digitálisz. Jelenleg olyan javított antiaritmiás hatóanyagok kifejlesztése történik, mint a flecainide, bretylium, bizonyos difenü-butanol-aminok és bizonyos 9,9-diszubsztituált fluorének, 15 lásd például a 4,197,313 számú amerikai szabadalmi leírást. Noha általánosságban nem állítható, egy antiepileptikus hatóanyagnak - a phenytoinnak - szintén van antiaritmiás hatása. 20 A phenytoin hatásos dózisa és a már nem kívánt mellékhatást - például szemtekerezgés, ataxia, letargia - okozó dózis közötti terápiás index azonban igen kicsi. Ezért van szükség hatásosabb, kevésbé toxikus, gyógyászati szempontból kedvezőbb hatóanyagok ku- 25 tatására. A találmány tárgya eljárás szívritmuszavar kezelésére alkalmas gyógyszerkészítmény előállítására, melynek során hatóanyagként az (I) képletű 4-amino- N-(2,6-dimetil-fenil)-benzamidot vagy gyógyászati 30 szempontból alkalmazható sóját alkalmazzuk. Az (I) képletű 4-amino-N-(2,6-dimetü-fenü)-benzamid LY201116 jelöléssel szerepel az irodalomban, mint görcsoldó hatóanyag. A szakirodalomban leírt, lásd például a 4,684,748, 4,638,014 számú amerikai 35 szabadalmi leírást, illetve általánosságban leírt, a 4,004,029 számú amerikai szabadalmi leírásban és a J. Med. Chem., 30,1742 (1987) cikkben. Ugyancsak szerepelnek az említett leírásokban a vegyület gyógyászati szempontból alkalmazható savaddíciós sói is. Elő- 40 nyösek a szervetlen savak, különösen a sósav sói. Az EPO 211,568 számú közzétételi irat antikonvulzáns p-amino-benzamid-származékokat (többek között az (I) képletű vegyületet) ismertet, a DE 2415691 számú nyilvánosságrahozatali irat ugyancsak görcsol- 45 dó hatású szubsztituált amino- és nitro-benzamidokat ismertet. A 4,638,014 számú amerikai szabadalmi leírás amino-benzanüideket is leír. A találmány szerinti készítményeket szájon keresztül vagy párénterálisan juttatjuk be az emlősszervezetekbe. A vegyületek hatékonyságát biológiai vizsgálatokkal határozzuk meg. Az egyik üyen vizsgálati eljárás, hogy kutyáknál kísérleti úton szívritmuszavart váltunk ki, bejuttatjuk az ismeretlen biológiai aktivitású vegyületet és figyeljük, a vegyületnek van-e olyan hatása, hogy visszaállítja az aritmiát a normális szinuszritmusra; ha igen, megvizsgáljuk, müyen hosszú ideig tart a szabályzóhatás. Az anabainnal kiváltott ventrikuláris aritmiát az LY201116 hatóanyag visszaállítja a normális szinuszritmusra. 8,3-12,8 kg tömegű hin vizslákat nátriumpentobarbitállal (35 mg/kg, intravénásán) elaltatunk és egy mandzsettával ellátott endotracheális csövön keresztül lélegeztetünk egy pozitív nyomású lélegeztetőkészülék alkalmazásával (18 lélegeztetés percenként, egy lélegeztetésre küogrammonként 20 ml térfogatot számolva). Vízfűtéses párnán a testhőmérsékletet 37-38°C hőmérsékleten tartjuk. A II elvezetésű elektrokardiogram felvételt bőralatti tűelektróddal és szalaggrafikonos kiírókészülékkel végezzük. Mindegyik agyi vénába helyezünk egy infúziós kanült; az egyiket az anabain, illetve a vizsgált vegyület bevitelére, a másikat a petobarbital dózis fenntartására (0,05-0. 1 mg/kg/perc). Az alábbi adagolás szerint az anabain intravénás bejuttatásával aritmiát váltunk ki; a kezdeti 50pg/kg dózist követően a 15. percben lOpg/kg dózist adunk, és ha szükséges, ezt 15 percenként 5pg/kg dózissal folytatjuk egészen addig, amíg a ventrikuláris aritmia meg nem jelenik. Ha kevesebb, mint 50%-os ventrikuláris verést tapasztalunk, vagy ha az aritmia nem tart 30 percen át, további 2,5pg/kg anabain dózist injektálunk. 30 perces folyamatos aritmia után folyamatos intravénás infúzióval adjuk a vizsgálati vegyületeket, amíg a 100%-os szinuszritmus helyre nem áll. Ennek a dózisnak a kétszeresét infuzáljuk még folyamatosan, és mérjük az EKG-t két órán át, hogy lássuk, vajon az antiaritmiás hatás megmarad-e. Ezután hagyjuk az állatokat magukhoz térni és lábra állni. Az 1. táblázatban megadjuk az LY201116 [4-amino-N(2,6-dimetü-fenil)-benzamid] és a phenytoin vizsgálatok eredményeit. I. táblázat Az anabain hatását megszüntető dózisok altatott vizsláknál Vegyület Infúziós sebesség (pg/kg/perc Anabain dózis (p-g/kg) Hatástalanító dózis (mg/kg) n Átlagos időtart. (perc) LY201 116 100 6,3 ± 1,6 3,7 ± 1,0 4 >120 LY201 116 200 66,9 ±2,6 4,4 ± 1,4 4 >90 phenytoin 500 63,8 ± 1,6 12,4+3,9 4 >120 2
