203078. lajstromszámú szabadalom • Eljárás biciklusos szulfonamid-származékok és ezeket hatóanyagként tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
109 HU 203 078 B 110 szárítjuk és csökkentet nyomáson besűrítjük. A maradékot pillanatkromatográfiásan tisztítjuk szilikagélen, hexán és etil-acetát 5:1 arányú elegyével, így 6,7 g nyers mezilátot kapunk. A mezilátot nátrium-aziddal kezeljük a (25) képiéül vegyület előállítására leírttal azonos módon [V-2. példasorozat, 2. példa (2) lépés], így 2,05 g (313%) cím szerinti terméket kapunk. NMR-spektrum (CDC13) Sppm: 0,86 (3H, s), 131 (3H, s), 1,28 (1H, d, J = 10 Hz), 1,40-2,50 (14H), 332-4,00 (5H), 4,57 (lH,m). Az [Ih(2R-t)] képletű vegyületeket /[Ih-aa(2R-t)] képletű vegyület - R, jelentése metilcsoport, [Ih-ab(2R-t)] képletű vegyület - R! jelentése nátríumatom/ a IV-2. példasorozat 2. példája szerinti állítjuk elő az alábbi köztitermékeken keresztül: (-)-(lS,2R3R3R)-2-/2-(tetrahidropiran-2-il-oxi)-etü/-3-benzolszulfonamido-6,6-dimetil-biciklo[3.1.1 ] - heptán, kitermelés: 85,6%, olvadáspont: 119-121 'C, [a] d = -26,3 (C = 0,883, metanol), NMR-spektrum (CDClj) 8 ppm: 0,80 (3H, s), 1,13 (3H, s), 130 (1H, d, J= 10 Hz), 135-2,30 (14H), 2,90-4,10 (5H), 4,40-4,60 (1H, 5,03 és 531 (mindkettő 1/2 H, d, J = 6 Hz), 735-7,68 (3H), 7,86-7,97 (2H), IR-spektrum (KBr), vm: 3270,1322,1168 cm1. (-)-(lS3R3R3R)-2-(2-hidroxi-etil)-3-benzolszulfonamido-6,6-dimetil-biciklo[34.1.1]hcptán, kitermelés: 90,6%, [a] d = -31,6 (c = 1,094, metanol), NMR- spektrum (CDC13) 8 p pm: 0,80 (3H, s), 1,14 (3H, s), 131 (lH,d,J= 10 Hz), 135-2,18 (8H), 2,30 (1H, széles s), 3,20 (1H, q, J = 9 Hz), 3,57 (2H, t, J = 6 Hz), 5,65 (1H, d, J = 7 Hz), 7,36-7,63 (3H), 7,88-7,99 (2H), IR-spektrum (CHC13), vM: 3025, 3530, 3385, 3275, 1327,1310,1160,1090 cm1. (-)-(lS,2R3R,5R)-2-(formil-metil)-3-benzolszulfonamido-6,6-dimetil-biciklo[3.1.1]heptán, kitermelés: 95,9%, [a] d = -19,3 (c=2,754, metanol), NMR-spektrum (CDClj) 8ppm: 0,82 (3H, s), 1,13 (3H, s), 132 (1H, d, J = 10 Hz), 1,49-2,78 (8H), 334 (1H, m), 5,51 (1H, J = 9 Hz), 738-7,73 (3H), 7,88-7,99 (2H), 9,65 (1H, d, J=2Hz), IR-spektrum (CHC13),v^: 3390,3280,1723, 1330,1161 cm1. (-)-5(Z)-7-/(lS3R3R,5R)-3-benzolszulfonamido-6,6-dimetil-biciklo[3.1.1]hept-2-il/-5-hepténsav [Ih(2R-t)] képletű vegyület/, kitermelés: 95,1%, [a] □ = = -2,4 [a] 3« =+17,6 (c = 2,154 metanol). NMR-spektrum (CDCl3)8ppm: 0,76 (3H, s), 1,13 (3H, s), 1,22 (1H, d, J = 10 Hz), 1,35-230 (14H), 330 (1H, m), 5,30 (2H, m), 5,42 (1H, d, J = 9 Hz), 7,35-7,63 (3H, 7,63 (1H, széles s), 7,86-7,97 (2H),IR-spektrum (filmben), vm: 3280,1710,1325,1310,1160,1093 cm1. (-)-5(Z)-7-/(lS3R3R,5R)-3-benzolszulfonamido-6,6-dimetil-biciklo[3.1.1 ]hept-2-il/-5-hepténsav-metilészter, [a] £ = -1,6, [a] & 23 = 24,8 (c = 2,498 metanol), CD (metanol), Xnm (Ae): 268,5 (+0,085), 261 (+0,112), 258 váll. (+0,155), 225 (+2,52), NMR-spektrum (CDCI3) Sppm: 0,76 (3H, s), 1,13 (3H, s), 133 (1H, d, J = 10 Hz), 1,40-2,43 (14H), 333 (1H, m), 3,69 (3H, s), 5,30 (2H, m), 5,62 (1H, d, J = 9 Hz), 7,36-7,70 (3H), 7,92-8,03 (2H), IR-spektrum (filmben), v^: 3290, 1740,1329,1161,1096 cm-1. Az [lh(2R-t)] képletű vegyület nátriumsója, IR-spektrum (KBr), vm: 1560,1323,1308,1160,1093 cm1. A találmány szerinti vegyületek eredményesen antagonizálják a tromboxán-A2-t a receptornál, és erősen gátolják a tromboxánAj által kiváltott vérlemezke agglutinációt. Ez azt jelenti, hogy a találmány szerinti vegyületek várhatóan hasznos trombózisellenes és vazokonstrikciót gátló hatóanyagok. A találmány szerinti vegyületek gátolják a vérlemezke agglutinációt, amint azt az alábbi in vitro vizsgálatban bemutatjuk: Hím nyúl karotid artériájából (NIBS-JW törzs, 2,2-2,7 kg testtömeg) állatonként 73 ml technikailag levehető teljes vért veszünk 0,8 ml 3,8%-os nátrium-citrát oldatot tartalmazó műanyag fecskendővel, így mindegyik fecskendő tartalma 8 ml lesz. A vért műanyag kémcsőbe helyezzük, enyhe forgatással összekeverjük és 20 *C-on 210 g-n centrifugáljuk 10 percig, hogy vérlemezkében gazdag plazmát (PRP) nyerjünk. A megmaradt vért tovább centrifugáljuk 20 "C-on 3000 fordulat/perc sebességgel (körülbelül 1,900 g) 10 percig, hogy vérlemezkében szegény plazmát (PPP) nyerjünk. A PRP-t PPP-vel hígítjuk olyan minta előállítására, amelynek vérlemezke tartalma 5-50 x 10' pl. A mintát ezután vérlemezke aggluticánciós vizsgálatban használjuk fel. A vérlemezke agglutinációs vizsgálatot Bőm módszerével [Bom, G. V. R., Nature, 194,927-929, (1962)] végezzük és a mérést aggregométerrel (AUTO R AM-61 típus, a Rika Denki Kogyo Co., Ltd. gyártmánya) hajtjuk végre. 400 pl PRP-t, amelynek vérlemezketartalmát 50- 55 x 104 pl-re állítottuk be, mérőküvettába tesszük és az aggregométerbe helyezzük. A PRP-t előmelegítjük és 1 percig keverjük (1200 fordulat/perc sebességgel) 37 ‘C-on. 2 perccel a vizsgálandó vegyület oldatának a küvetlába öntése után (a vegyület sóoldatának 50 pl-e, vagy a vegyület dimetil-szulfoxidos oldatának 2 pl-e + 48 pl sóoldat) vérlemezke agglutináló szerként 50 pl adenozin-5’-difoszfátot (ADP, gyártó: PL-Biochemical Inc), kollagént (Hormon-Chemie, München gyártmánya) vagy arachidonsavat (nátriumsó, gyártó: Sigma) adunk hozzá és mérjük a vérlemezke agglutináció okozta fény transzmittancia változást az idő függvényében. Megállapítva a PRP fény transzmittanicáját 0% vérlemezke agglutinációnál és PPP fény transzmittanciáját 100%-os agglutinációnál, a PRP-mintában a vérlemezke agglutináló szer hozzáadása után mért legnagyobb fény transzmittanciát tekintjük a legnagyobb vérlemezke agglutinációnak. Az agglutinációt gátló hatást (%) a vizsgálandó vegyületet kapott csoport és a kontrollcsoport (hordozóanyaggal kezelt csoport) legnagyobb agglutinációjának hányadosából számítjuk ki. Az eredmények a 7. táblázatban láthatók; standard vegyületként prosztaglandin-Ej-et (PGEj) alkalmaztunk. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 56
