202921. lajstromszámú szabadalom • Eljárás humán tumor nekrózis faktort kódoló DNS, továbbá annak alkalmazásával a fenti faktornak megfelelő polipeptid, és hatóanyagként egy fenti polipeptidet tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
1 HU 202 921 B 2 250 260 270 CTAGTCAACCCTGTGGCCCÁGATGGTCACC LeuValAsnProValAlaGlnMetValThr 280 290 300 CTCAGATCÁGCTTCTCGGGCCCTGAGTGAC LeuArgSerAlaSerArgAlaLeuSerAsp 310 3?0 330 AAGCCTCTAGCCCACGTAGTAGCAAACCCG LysProLeuAlaHisValValAlaAsnPro 340 350 360 CAAGTGGAGGGCCAGCTCCÄGTGGCTGAGC GlnValGluGlyGlnLeuGlnTrpLeuSer 370 380 390 CAGCGTGCGAACGCCCTGCTGGCCAACGGC GlyArgAlaAsnAlaLeuLeuAlaAsnGly 400 410 420 ATGAAGCTCACGGACAACCAGCTGGTGGTG MetLysLeuThrAspAsnGlnLeuValVal 430 440 450 CCGGCCGACGGGCTGTACCTCATCTACTCC ProAlaAspGlyLeuTyrLeuIleTyrSer 460 470 480 CAGGTTCTCTTCAGCGGTCAAGGCTGCCGC GlnValLeuPheSerGlyGlnGlyCysArg 490 500 510 TCCTACGTGCTCCTCACTCÄCACTGTCAGC SerTyrValLeuLeuThrHisThrValSer 520 530 540 CGCTTCGCCGTCTCCTACCCGAACAAGGTC ArgPheAlaValSerTyrProAsnLysVal 550 560 570 AACCTCCTCTCTGCCATCAÁGAGCCCCTGC AsnLeuLeuSerAlalleLysSerProCys 580 590 600 CACCGGGAGACCCCCGAGGAGGCTGAGCCC HisArgGluThrProGluGluAlaGluPro 610 620 630 ATGGCCTGGTACGAGCCCATCTACCTGGGC Met A laTrpTypGluProIleTyrLeuGly 640 650 660 GGCGTCTTCCAGTTGGAGAAGGGTGACCGG GlyValPheGlnLeuGluLysGlyAspArg 670 680 690 CTCAGCACCGAGGTCAACCAGCCTGAGTAC LeuSerThrGluValAsnGInProGluTyr 730 740 750 TTTGGGATCATTGCCCTGTGAGGGGACTGA PheGlyllelleAlaLeu 760 770 780 CCACCACTCCTCCCCCTCTCCCACCCCAGC 790 89O CCCCTCACTCTGGGCGCCCTCAG 2. referenciapélda Nyúl plazma TNF izolálása és tisztítása 2,5-3,0 kg-os nyulakba intravénásán 50 mg elölt, száraz Propioninbacterium acnes sejtet injektálunk. Nyolc nap múlva a nyulaknak intravénásán 100 mikrogramm endotoxint (E. coliból származó lipopoliszacharidot) injektálunk. Két óra múlva minden nyúltól vért veszünk, szív-punkcióval. A vérhez 100 egység/100 ml koncentrációban nátrium-heparint keverünk, majd 5000 fordulat/perc sebességgel, hűtés közben 30 percen át centrifugálva eltávolítjuk a vérsejteket és az oldhatatlan anyagokat. 400 nyúlból 24 1 plazmát nyerünk. 55 60 29