202884. lajstromszámú szabadalom • Eljárás tripeptid-származékok, és hatóanyagként e vegyületeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására

1

HU 202 884 B

2

csökkentett nyomáson szárazra pároljuk. 1,2 g anyagot kapunk, viszkózus olaj formájában.

A kapott olajos anyagot etanolban oldjuk, és hozzáadunk 3 ml 1 n nátrium-hidroxid-oldatot. Az elegyet jeges hűtés közben 30 percen keresztül keverjük. Az oldatot 3 ml 1 n sósavoldattal elegyítjük és csökkentett nyomáson koncentráljuk. A maradékot CHP20P töltetű oszlopon kromatografálva tisztítjuk, az eluálást 0%—»60% gradiensű acetonitril-víz eleggyel végezzük. A tisztított frakciókat csökkentett nyomáson szárazra pároljuk. A maradékot liofilizálva 0,60 g cím szerinti vegyületet kapunk, fehér por formájában.

[u]ß- -46,0° (etanol);

Elemanalízis eredmények a C29H42N4O8.1,5H20 összegképlet alapján:

számított: C- 57,89%, H- 7,54%, N- 9,31%;

talált: C- 57,74%, H- 7,33%, N- 9,29%.

14. példa

(2S,3aS,7aS)-l-[N2-(Benzil-oxi-karbonil)-L-ornitil-y-D-glutamil]-oktahidro-1 H-indol-2-karbonsav előállítása

0,5 g 13. példa szerint előállított terméket etanolban oldunk, és hozzáadunk 5 ml 1 n nátrium-hidroxid-oldatot. Az elegyet szobahőmérsékleten 3 órán keresztül keverjük, és 5 ml 1 n sósavoldatot adunk hozzá. Az elegyet ezután csökkentett nyomáson koncentráljuk és a maradékot CHP20P töltetű oszlopon kromatografáljuk, az eluálást 0%—»60% gradiensű acetonitril-víz eleggyel végezzük. A tisztított frakciókat csökkentett nyomáson szárazra pároljuk. A maradékot liofilizálva 0,30 g cím szerinti vegyületet kapunk, fehér por formájában.

[a]$- -39,4' (In NaOH);

Elemanalízis eredmények a C27H38N4 do8-2H20 összegképlet alapján:

szánmított: C- 55,66%, H- 7,27%, N- 9,62%;

talált: C- 55,39%, H- 7,08%, N- 9,49%.

15. példa

(2S,3aS,7aS)-l-(N2-Nikotinoil-L-lizil-y-D-glutamil)-oktahidro-lH-indol-2-karbonsav előállítása

a) Eljárás

20 ml tetrahidrofurán és 3 ml víz elegyéhez 4,42 g N6-(benzil-oxi-karbonil)-NJ-(terc-butoxi-karbonil)-L-lizin-N-hidroxi-szukcinimid-észtert, 2,89 g (2S,3aS, 7aS)-1 -(y-D-glutamil)-oktahidro-1 H-indol-2-karbonsa vat (lásd ll. példa) és 2,6 ml trietil-amint adunk, és az elegyet szobahőmérsékleten 5 órán keresztül keverjük. A reakcióelegyet csökkentett nyomáson koncentráljuk. A maradékot vizes, telített nátrium-klorid-oldattal elegyítjük és etil-acetáttal mossuk. A vizes fázist 10%-os citromsavval megsavanyítjuk, és etil-acetáttal extraháljuk. A szerves fázist telített, vizes nátrium-klorid-oldattal mossuk, vízmentes nátrium-szulfát felett szárítjuk és csökkentett nyomáson szárazra pároljuk. 5,19 g maradékot kapunk, amelyet CHP20P töltetű oszlopon kromatografálva tiszítunk, az eluálást 0%-»60% gradiensű ecetonitril-víz eleggyel végezzük. a kapott frakciókat csökkentett nyomáson szárazra pároljuk. A maradékot dioxán és víz elegyében oldjuk és liofilizájuk. 4,7 g (2S,3aS,7aS)-l-[N6-(benziloxi-karbonil)-N2-(terc-butoxi-karbonil)-L-lizil-y-D-glutamil]-oktahidro-lH-indol-2- karbonsavat kapunk.

2,27 g fent kapott vegyületet 50 ml trifluor-ecetsavban oldunk, és jeges hűtés közben 15 percen keresztül állni hagyjuk, majd csökkentett nyomáson szárazra pároljuk. A maradékot vízben oldjuk, pH-ját 4-re állítjuk és CHP20P töltetű oszlopon kromatografáljuk, az eluálást 0%—»50% gradiensű acetonitril-víz eleggyel végezzük. A kívánt terméket tartalmazó frakciókat csökkentett nyomáson koncentráljuk. 1,15 g (2S,3aS,7aS)-1 -[N6-(benzil-oxi-karbonil)-L-lizil-y-D-glutamil]-oktahidro-lH-indol-2-karbonsavat kapunk, üvegszerű anyag formájában.

1,0 g fent kapott vegyületet NJí-dimetil-formamid és tetrahidrofurán elegyében oldunk, és 0,5 ml trietilamint és 0,39 g N-(nikotinoil-oxi)-szukcinimidet adunk, hozzá majd a reakcióelegyet szobahőmérsékleten egy éjszakán keresztül keverjük. Az elegyhez híg sósavoldatot adunk, és etil-acetáttal extraháljuk. Az extraktumot vízmentes nátrium-szulfát felett szárítjuk csökkentett nyomáson szárazra pároljuk. A kapott üveges anyagot 25 ml etanolban oldjuk, és hozzáadunk 0,6 g ammónium-formiátot és 0,3 g 10% fémet tartalmazó szénhordozós palládiumkatalizátort. Az elegyet szobahőmérsékleten 3 órán keresztül keverjük. A katalizátort szűréssel eltávolítjuk és az anyalúgot csökkentett nyomáson szárazra pároljuk. A maradékot CHP20P töltetű oszlopon kromatografáljuk, az eluálást 0%—>60% gradiensű acetonitril-víz eleggyel végezzük. A kívánt terméket tartalmazó frakciókat csökken-: tett nyomáson szárazra pároljuk. A maradékot liofilizálva 0,5 g cím szerinti vegyületet kapunk.

[aW- -27,2' (H2O).

Elemanalízis eredmények a C2éH37N5C>7.2,25H20 öszegképlet alapján:

számított: C- 54,58%, H- 7,31%, N- 12,24%;

talált: C- 54,62%, H- 7,25%, N- 12,20%.

b) Eljárás

18 g D-glutaminsavat és 31,75 g nátrium-karbonátot 200 ml vízben oldunk, majd jeges hűtés közben hozzáadunk 37,5 g N-karboetoxi-ftálimidot. A reakcióelegyet szobahőmérsékleten 4 órán keresztül keverjük. Az oldhatatlan anyagot szűrréssel eltávolítjuk. A szűrletet 6 n sósavoldattal megsavanyítjuk és egy éjszakán át 4 'C-on állni hagyjuk. A kivált kristályokat szűréssel összegyűjtjük, hideg vízzel mossuk és szárítjuk.

33,2 g N-ftaloil-D-glutaminsavat kapunk, olvadáspontja 162-164 'C.

30 g fenti vegyületet 90 ml ecetasavanhidridhez adunk, és az elegyet az anyag oldódásáig 55 'C-on keverjük. Az anyag feloldódása után az oldatot azonnal lehűtjük és 150 ml 2:1 térfogatarányú vízmentes dietíléter-n-hexán elegyet adunk hozzá. Akivált kristályokat szűréssel összegyűjtjük. 18,2 N-ftaloil-D-glutaminsavanhidridet kapunk, olvadáspontja 203-206 °C.~..

6,13 g (2S,3aS,7aS)-oktahidro-lH-indol-2-karbonsavat 40 ml piridinben oldunk, és hozzáadunk 9,39 g

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

13