202884. lajstromszámú szabadalom • Eljárás tripeptid-származékok, és hatóanyagként e vegyületeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
1 HU 202 884 B 2 0,55 g fenti port 20 ml trifluor-acetsavval jeges hűtés közben 30 percen át állni hagyunk, majd a trifluor-ecetsavat csökkentett nyomáson szobahőmérsékleten elpárologtatjuk. A maradékot CHP20P töltetű oszlopon kromatografáljuk, az eluálást 0%—»30% gradiensű acetonitril-víz eleggyel végezzük, és a kapott tisztított frakciókat koncentráljuk. A maradékot liofilizálva 0,33 g cím szerinti vegyületet kapunk. [a$- -43,1° (In NaOH); Elemanalízis eredmények a C26H32N6O7.3H2O összegképlet alapján: számított: C- 52,52%, H- 6,44%, N= 14,13%; talált: C- 52,38%, H- 6,50%, N- 14,14%. 11. példa (2S,3aS,7aS)-[N2-(Benzil-oxi-karbonil)-L-lizil-y-D-glutamil]-oktahidro-lH-indol-2-karbonsav előállítása 15,8 g vízoldható karbodiimid-hidrogén-kloridot adunk, 24,5 g N-(benzil-oxi-karbonil)-0*-etil-D-glutaminsav, 17,5 g etil- (2S,3aS,7aS)-oktahidro-lH-indol- 2-karboxilát-hidrogén-klorid és 7,58 g trietil-amin metilén-kloridos oldatához, és a reakcióelegyet egy éjszakán keresztül szobahőmérsékleten keverjük. Az elegyet telített, vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, vízzel, 10%-os sósavoldattal, majd ismét vízzel mossuk, vízmentes nátrium-szulfát felett szárítjuk és csökkentett nyomáson szárazra pároljuk. A kapott 34,1 g olajos anyagot 400 ml etanolban oldjuk, és 3 g 10% fémet tartalmazó szénhordozós palládiumkatalizátort adunk hozzá. Az elegyet szobahőmérsékleten keverjük, és közben 12 g ammónium-formiátot adunk hozzá, három részletben. Egy óra múlva a katalizátort szűréssel eltávolítjuk, és a szűrletet sósavoldattal megsavanyítjuk, majd csökkentett nyomáson szárazra pároljuk. A maradékot vízben oldjuk és etil-acetáttal mossuk. A vizes fázist nátrium-hidrogén-karbonáttal meglúgosítjuk és metilén-kloriddal extraháljuk. A szerves fázist vízmentes nátrium-szulfát felett szárítjuk és csökkentett nyomáson szárazra pároljuk. 23,5 g etil(2S,3aS,7aS)-l-(0‘-etily-D-glutamil)-oktahidro-lH-in dol-2-karboxilátot kapunk (amelyet a továbbiakban diészter B-nek nevezzük) olajos anyag formájában. 23 g diészter B-t 150 ml etanolban oldunk, és hozzáadunk 210 ml 1 n nátrium-hidroxid-oldatot. Az elegyet szobahőmérsékleten 5,5 órán keresztül keverjük, sósavoldattal megsavanyítjuk, majd csökkentett nyomáson koncentráljuk. A maradékként kapott oldatot CHP20P töltetű oszlopon kromatografálva tisztítjuk, az eluálást 0%-»30% gradiensű acetonitril-víz elegygyel végezzük. A tisztított frakciókat csökkentett nyomáson szárazra párolva 6,31 g terméket kapunk. A nem eléggé tiszta frakciókat csökkentett nyomáson szárazra pároljuk. A maradékot vízben oldjuk, nátrium-hidrogén-karbonáttal semlegesítjük és ismét CHP20P töltetű oszlopon kromatografálva tisztítjuk, az eluálást 0% -» 30% gradiensű acetonitril-víz eleggyel végezzük. 8,70 g terméket kapunk. A fenti terméket egyesítjük, így 15,01 g (2S,3aS,7aS)-l-(y-D-glutamil)-oktahidro-lH-indol-2-karbonsavat kapunk, olvadáspontja 191-192 ’C. 2 g fenti termék és 2,68 g trietil-amin vizes oldatához 40 ml tetrahidrofuránt adunk. Keverés közben hozzáadunk 3,06 g N2-(benzil-oxi-karbonil)-N6-(tercbutoxi-karbonil)-L-lizin-N-hidroxi-szukcinimid-észtert. Az elegyet egy éjszakán keresztül szobahőmérsékleten keverjük, majd csökkentett nyomáson koncentráljuk. A maradékként kapott oldatot 10% citromsavval keverjük és etil-acetáttal extraháljuk. A szerves fázist telített nátrium-klorid-oldattal mossuk, vízmentes nátrium-szulfát felett szárítjuk és csökkentett nyomáson koncentráljuk. 3,96 g port kapunk. 3,46 g fent kapott port 35 ml trifluor-acetsavban jeges hűtés közben 20 percen keresztül álni hagyunk, majd csökkentett nyomáson szárazra pároljuk. A maradékot vízben oldjuk, pH-ját nátrium-hidrogén-karbonáttal 4-re állítjuk, és CHP20P töltetű oszlopon kromatografálva tisztítjuk, az eluálást 0%—»60% gradiensű acetonitril-víz eleggyel végezzük. A kívánt terméket tartalmazó frakciókat csökkentett nyomáson szárazra párolva 1,6 g cím szerinti terméket kapunk, fehér por formájában. [a]í6- -40,0° (IN NaOH); Elemanalízis eredmények a C28H4oN4Og.l,75H20 összegképlet alapján: számított: C- 56,79%, H- 7,40%, N- 9,46%; talált C- 56,88%, H- 7,47%, N- 9,33%. 12. példa A 11. példában leírtak szerint eljárva N-fN^benzil-oxi-karbonil)-L-lizily-D-glutamil]-N-(4-metoxi-fenil)-alanint állítunk elő: [a]2P- -12,0° (In NaOH); Elemanalízis eredmények a C29H38N4O9.IH2O összegképlet alapján: számított: C- 57,61%, H- 6,67%, N- 9,27%; talált: C- 57,33%, H- 6,74%, N- 9,24%. 13. példa Etil-(2S,3aS,7aS)-l-[N2-(benzil-oxi-karbonil)-L-ornitil-y-D-glutamil]-oktahidro-lH-indol-2- -karboxilát előállítása 1,81 g N2-(benzil-oxi-karbonil)-N5-(terc-butoxi-karbonil)-L-omitint és 1,75 g diészter B-t 20 ml metilén-kloridban oldunk, és hozzáadunk 1,04 g vízoldható karbodiimid-hidrogén-kloridot. Az elegyet egy éjszakán keresztül szobahőmérsékleten keverjük. A reakcióelegyet 10%-os citromsavoldattal, vízzel, telített, vizes nátrium-hidrogén-karbonát oldattal, majd ismét vízzel mossuk, vízmentes nátrium-szulfát felett szárítjuk és csökkentett nyomáson szárazra pároljuk. 3,2 g viszkózus olajat kapunk. 3,0 g fenti olajat 20 ml trifluor-ecetsavban oldunk, jeges hűtés közben, és 15 percen keresztül állni hagyjuk az oldatot. A trifluor-ecetsavat csökkentett nyomáson elpárologtatjuk. A maradékot vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal elegyítjük és etil-acetáttal extraháljuk. A szerves fázist 10%-os sósavoldattal extraháljuk. A vies fázist nátrium-hidrogén-karbonáttal meglugosítjuk és etil-acetáttal extraháljuk. A szerves fázist vízmentes nátrium-szulfát felett szárítjuk és 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 12
