202884. lajstromszámú szabadalom • Eljárás tripeptid-származékok, és hatóanyagként e vegyületeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
1 HU 202 884 B 2 vés fázist 10%-os sósavoldattal, telített, vizes nátriumhidrogén-karbonát-oldattal, majd telített nátrium-klorid-oldattal mossuk, vízmentes nátrium-szulfát felett szárítjuk és csökkentett nyomáson szárazra pároljuk. A maradékot izopropanolból átkristályosítva 2,8 g N-(2-furoil-oxi)-szukcinimidet kapunk, olvadáspontja 126-127 ”C. 1,79 g fenti szukcinimid és 2,0 g N6-(benzil-oxikarbonil)-L-lizin tetrahidrofurán-víz eleggyel készült oldatához 2,9 g trietil-amint adunk, és az elegyet egy éjszakán keresztül szobahőmérsékleten keverjük. A tetrahidrofuránt csökkentett nyomáson elpárologtatjuk és a maradék oldat pH-ját 10%-os sósavoldattal 2-3-ra állítjuk, majd etil-acetáttal extraháljuk. Az extraktumot vízmentes nátrium-szulfát felett szárítjuk, és csökkentett nyomáson szárazra pároljuk. A maradékot CHP20P töltetű oszlopon kromatografálva tisztítjuk, az eluálást 30%—>60% gradiensű acetonitril-víz eleggyel végezzük. 2,3 g N2-(2-furoil)-N6-(benzil-oxi-karbonil)-L-lizint kapunk, [a]i? - -4,6” (metanol). 1.35 g fent kapott terméket és 1,0 g diészter A-t metilén-kloridban oldunk, és hozzáadunk 0,66 g vízoldható karbodiimid-hidrogén-kloridot. Az elegyet egy éjszakán keresztül szobahőmérsékleten keverjük. A reakcióelegyet 10%-os sósavoldattal, telített, vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, majd vízzel mossuk, vízmentes nátrium-szulfát felett szárítjuk, és csökkentett nyomáson szárazra pároljuk. A maradékot dietiléter és etanol elegyéből kicsapjuk. 1,8 g etil-l-[N2-(2- furoil)-N6-(benzil-oxi-karbonil)-L-lizil-0'-etil-y-D-glutamil)-indolin-2(S)-karboxilátot kapunk, olvadáspontja 120-123 °C. 1,65 g fent kapott etil-észter dioxánnal készült oldatához 6,85 ml 1 n nátrium-hidroxid-oldatot adunk, és az elegyet szobahőmérsékleten 1 órán keresztül keverjük. Az elegyet 10%-os sósavoldattal megsavanyítjuk és etil-acetáttal extraháljuk. A szerves fázist telített, vizes nátrium-klorid-oldattal mossuk, vízmentes nátrium-szulfát felett szántjuk és csökkentett nyomáson koncentráljuk. A maradékot petroléter és etil-acetát elegyéből kristályosítjuk és a kristályokat szűréssel összegyűjtjük. 1,50 g l-[N2(2-furoil)-N6-(benzil-oxikarbonil)-L-lizil-y-D-glutamil]-indolin-2(S)-karbonsavat kapunk. 1.35 g fenti termék metanollal készült oldatához 0,35 g ammónium-formiátot és 0,4 g 10% fémet tartalmazó szénhordozós palládiumkatalizátort adunk, és az elegyet szobahőmérsékleten 7 órán keresztül keverjük. A katalizátort eltávolítjuk és a metanolt csökkentett nyomáson elpárologtatjuk. A maradékhoz etil-acetátot adunk és az elegyet 10%-os hidrogén-klorid-oldattal extraháljuk. Az extraktumot CHP20P tölető oszlopon kromatografáljuk, az eluálást 0%->60% gradiensű acetonitril-víz eleggyel végezzük. Közel 70% kívánt terméket tartalmazó frakciókat kapunk, amelyet ODS-Q3 töltetű (Wako Pure Chemical Co., Ltd.) oszlopon kromatografálva tisztítunk (az oszlop átmérője 4 cm és hossza 30 cm), az eluálást acetonitril és 1%-os trifluor-acetsav 1:9 térfogatarányú elegyével végezzük. 0,65 g port kapunk, amelyet CHP20P töltetű oszlopon tovább kromatografálunk, 0%—>60% gradiensű acetonitril-víz eleggyel eluálunk, és csökkentett nyomáson szárazra párolunk. A maradékot vízben oldjuk és liofilizáljuk. 0,3 g cím szerinti vegyületet kapunk. [a]tf - -67,1” (In NaOH); Elemanalízis eredmények a C2jH3oN4082,25H20 összegképlet alapján: számított: C- 54,10%, H- 6,27%, N- 10,09%; talált: C- 54,16%, H- 6,17%, N- 9,98%. 9. példa A 8. példában leírtak szerint eljárva l-(L-propil-L-lizil-y-D-glutamil)-indolin-2(S)-karbonsavat állítunk elő. [affl- -99,1” (In NaOH); Elemanalízis eredmények a C2jH3sN507.3,5H20 összegképlet alapján: számított: C- 51,71%, H- 7,29%, N- 12,06%; talált: C- 51,48%, H- 7,31%, N- 12,02%. 10. példa l-{N2-[3-(4-Imidazolil)-propenoil]-L-lizil-"l-D-glutamil}-indolin-2(S)-karbonsav előállítása 2,1 g etil-l-[N2-(benzil-oxi-karbonil)-N6(terc-butoxi-karbonil)-L-lizil-0'-etil-y-D-glutamil]-indolin-2(S)-karboxilát (lásd 1. példa) etanolos oldatához 0,56 g ammónium- formiátot és 0,4 g 10% fémet tartalmazó szénhordozós palládiumkatalizátort adunk, és az elegyet szobahőmérsékleten 1 órán keresztül keverjük. A katalizátort szűréssel eltávolítjuk, és az anyalúgot csökkentett nyomáson koncentráljuk. A maradékhoz etil-acetátot adunk, és az elegyet telített, vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldattal, majd telített, vizes nátrium-klorid- oldattal mossuk, és vízmentes nátrium szulfát felett szárítjuk. 1,7 g etil-[N6-(terc-butoxi-karbonil)-L-lizil-01-etil-y-D-glutamil]-indolin-2(S)-karboxilátot kapunk, olvadáspontja 114-117 ”C. 1,4 g fenti termék és 0,4 g 3-(lH-imidazol-4-il)-2- propénsav dimetil-formamid és metilén-klorid elegyével készült oldatához 1,17 g vízoldható karbodiimidhidrogén-kloridot adunk, és az elegyet szobahőmérsékleten egy éjszakán át keverjük. Az oldószert csökkentett nyomáson elpárologtatjuk. A maradékot telített, vizes nátrium-hidrogén-karbonát-oldatból kristályosítjuk és a kristályokat leszűrjük, vízzel mossuk és dietil-éter és etanol elegyéből újra kicsapjuk. A kapott 1,4 g port szilikagélen oszlopkromatográfiásan tisztítjuk, az eluálást metanol és kloroform 1:9 térfogatarányú elegyével végezzük. 1,0 g por alakú terméket kapunk. 0,9 g fenti port 20 ml dioxánban oldunk, és 3,8 ml 1 n nátrium- hidroxid-oldatot adunk hozzá. Az elegyet szobahőmérsékleten 3 órán keresztül keverjük, vizes kálium-hidrogén-szulfát-oldattal semlegesítjük és csökkentett nyomáson koncentráljuk. A maradékot vízben oldjuk. Az oldat pH-ját vizes kálium-hidrogénszulfát- oldattal 5-re állítjuk, és CHP20P töltetű oszlopon kromatografáljuk, az eluálást 0%—>60% gradiensű acetonitril-víz eleggyel végezzük. 0,65 g port kapunk. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 11
