202871. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új rifamicin-származékok és ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására

1

HU 202 871 B

2

*H-NMR (300 MHz, CDCI3):

7,23 (1H, dd, J—11,3, 16,2 Hz, H-18);

6,88 (2H, s, aromás protonok);

6.55 (1H, d, J—11,4 Hz, H-17);

6,11 (1H, dd, J-6,6, 16,8 Hz, H-19);

5.25 (1H, br.s., H-28);

5,13 (1H, br.d., J-7,2 Hz, H-25);

4.08 (1H, br.s, -OH);

3,59-3,79 (6H, m, piperazin-CH2- és.N-CHo-Ar);

3,35 (1H, br.s., H-27);

3.05 (1H, m, H-23);

3,02 (3H, s, -OCH3);

2,68 (4H, br.s, piperazin-CH2-);

2,41 [6H, s, ArQfe (orto)];

2.26 [3H, s, ArOÍ3 (para)];

2,19 (3H, s, H-14);

2.08 (3H, s, H-36);

1,95 (3H, s, H-30);

1,78 (3H, s, H-13);

1.56 (9H, s, pivaloil-CH3);

1,46 (9H, s, pivaloil-CH3);

1.06 (3H, d, J=6,6 Hz, ansagyűrű-CH3);

0,96 (3H, d, J-6,6 Hz, ansagyűrű-CH3);

0,73-0,93 (3H, m, ansagyűrű-CH3);

0,71 (3H, d, J-6,6 Hz, ansagyűrű-CH3).

15N-NMR (CDCI3, folyékony ammónia, nitro-metán-standard):

238,50, 60,50 és 47,40.

A kiindulási anyagot a következőképpen állíthatjuk elő:

a) 50 g rifamicin-S 500 ml dioxánnal készült oldatához 30 g N-(2,4,6-trimetil-benzil)-piperazint adunk, és az elegyet 18 órán át szobahőmérsékleten hagyjuk állni. Ezután 10%-os vizes citromsav-oldattal megsavanyítjuk, a reakcióterméket metilén-kloridban felvesszük. A metilén-kloridos extraktumot szárítjuk, bepároljuk, a sötétszínű maradékot etanolban oldjuk és cseppenként vizes aszkorbinsavat adunk hozzá. A 3- [4-(2,4,6-trimetil-benzil)-piperazin-l-il]-rifamicin-SV sárgaszínű, 178-181 °C-on, részleges bomlás közben olvadó kristályos anyag formájában válik ki.

Hasonló eredményt kapunk, amikor 20 g 3-brómrifamicin-S-t 20 g N-(2,4,6-trimetil-benzil)-piperazinnal 200 ml tetrahidrofuránban 30 percig szobahőmérsékleten reagáltatunk, majd a reakcióelegyet a fenti módon feldolgozzuk.

b) Az a) szerint kapott SV-termék 10 g-ját 200 ml metilén-kloridban oldjuk, majd 5 percig 10 g finoman porított Mn02-vel élénken keverjük. A szilárd anyagot kiszűrjük és a szűrletet szárazra pároljuk, amikor is kékes-fekete amorf anyagként kapjuk a 3-[4-(2,4,6-trimetil-benzil)-piperazin-l-il]-rifamicin-S-et, amely az acilezési reakcióhoz való felhasználáshoz elég tiszta.

c) 25 g 3-[4-(2,4,6-trimetil-benzil)-piperazin-l-il]rifamicin-S 250 ml piridinnel készült oldatához 35,5 ml (10,5 ekvivalens) pivaloil-kloridot csepegtetünk és az elegyet szobahőmérsékleten nyolc órán át keverjük, amikor a vékonyréteg-kromatogramon kiindulási anyag már nem mutatható ki. Az oldathoz ezután 150 ml metanolt adunk, és az elegyet szobahőmérsékleten még egy órán át keverjük a pivaloil-klorid feleslegének elbontására, majd szárazra pároljuk. A maradékot 300 ml metilén-kloriddal vesszük fel, az oldatot szűrjük és a szűrletet 300 ml vízzel extraháljuk. A vizes fázist 1 n sósavval 2-es pH-ra savanyítjuk, majd három alkalommal metilén-kloriddal extrahálunk. Az egyesített metilén-kloridos extraktumokat három alkalommal 100-100 ml vízzel mossuk, majd szárítjuk és szárazra pároljuk. A 29 g maradékot 1 kg kovasavgélből készült oszlopra visszük és etil-acetát és ciklohexán 1:4 térfogatarányú elegyével eluáljuk. Az első frakciók 8-0,21-O-dipivaloil-3-[4-(2,4,6-trimetil-benzil)-piperazinil]-rifamicin-S-et tartalmaznak, amelyet kovasavgélen végzett újabb kromatografálás és éterből való kristályosítás után lilásbama színű kristályok formájában különítünk el. A tennék 135— 145 °C-on bomlás közben olvad. A következő frakciók tartalmazzák a főterméket, azaz a 8-0,N-dipivaloil-3- [4-(2,4,6-trimetil-benzil)-piperazin-1-il]-rifamicin-S-et amely dietil-éterből 157-163 “C-on olvadó, vörösesibolya színű kristályos anyag formájában válik ki.

2. példa

100 mg (92 pmól) 8-0,N-dipivaloil-3-[4-(2,4,6- trimetil-benzil)-piperazin-l-il]-rifamicin-S 3 ml izopropanollal készült oldatát száraz nitrogéngáz alatt 5 órán át forraljuk. A reakciót (kovasavgélen, 3% metanolt tartalmazó kloroformban) vékonyréteg-kromatográfiásan követjük, a maximum elérése után az elegyet lehűtjük, majd az oldószert csökkentett nyomáson eltávolíjuk. A nyers reakcióterméket aztán kovasavgélen, 3% metanolt tartalmazó kloroformmal eluálva gyorskromatográfiás módszerrel tisztítjuk (Rf—0,15), így a reakcióterméket sötétvörös színű, szilárd anyag formájában különítjük el (60 mg 60%).

Petrolétérből való átkristályosítás után az 1. példa termékével azonos anyagot kapunk sötétvörös amorf kristályok formájában (op. 113-115 °C), a két termék egyéb jellemző adatai is azonosak. Egy további, 0,433 Rf-értékű vegyületet is izoláltunk, amely szintén sötétvörös szilárd anyag; ez monopivaloilezett származék. (10 mg, 10%).

3. példa

54,5 mg (0,0505 mmól) 8-0,N-dipivaloil-3-[4- (2,4,6-trimetil-benzil)-piperazin-l-il]-rifamicin-S 200 pl acetonitrillel készült oldatát 20 percig mikrohullámú sugárzás (teljes teljesítmény, 600 W) hatásának tettük ki. A vékonyréteg-kromatogram (kloroform/metanol 97%) jelentős, az 1. példa szerinti termékké való átalakulást mutat. A tisztítást kova- savgélen kromatográfiásan (28 • 1 ml kloroform/metanol 97%) végezzük.A kapott termék vékonyréteg-kromatográfiásan vizsgálva homogén és az 1. példa szerint kapott termékével azonosak a jellemző adatai (48,6 mg, 89%).

4-10. példa

Az 1. példában leírt módon további vegyületeket állítunk elő, amelyek (I) általános képletében az R és Rí csoportok jelentését a következő táblázat tartalmazza.

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

6