202591. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a BU-3420T antibiotikum, valamint ilyen antibiotikumot tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
15 HU 201 591 B 16 11. táblázat folytatása Vegyület Dózis*1 MST*2 (mg/kg/nap) (nap) T/C (%) Testtömeg változás a 5. napon (g) 0,25 18,5 137*3 +0,8 0,13 16,5 122 +0,8 0,063 19,0 14 P +0,8 0,031 16,5 122 +1,0 Mitomicin C 2,0 30,0 222"3 +0,5 1,0 20,5 152*3 +1,0 0,5 18,0 133*3 0,0 0,25 15,0 111 +0,8 Vivőanyag-13,5 — +1,0 *1 QD x 9, i.p. a BU-3420T esetében; Q4D x 3, i.p. a mitomicin C esetében *2 átlagos túlélési idő *3 szignifikáns daganatgátló hatás (T/C >125%). Látható, hogy a BU-3420T antibiotikum erős antibakteríális hatással rendelkezik, tehát emlősök és más állatok ezen organizmusok által előidézett betegségének kezelésére alkalmasak. Ezen túlmenően e hatóanyag az antimikrobiális hatóanyagok más, szokásos alkalmazási területein is felhasználható, például orvosi és fogorvosi eszközök fertőtlenítésére. A daganatgátló hatás in vitro és in vivo vizsgálati eredményei arra utalnak, hogy a BU-3420T antibiotikum terápiásán alkalmazható emlős gazdaegyedek rosszindulatú daganatainak gátlására. A találmány révén tehát lehetővé válik baktériumos vagy gombás fertőzésben szenvedő gazdaállat terápiás kezelése, ami abban áll, hogy e gazdaállatnak a BU- 3420T antibiotikum, illetőleg az ezt a vegyületet tartalmazó gyógyászati készítmény antibakteriális vagy gombaellenes hatás szempontjából hatásos mennyiségét adagoljuk. A találmány révén lehetővé válik továbbá emlősök rosszindulatú daganatai növekedésének a gátlása, ami abban áll, hogy az emlős gazdaegyednek a BU-3420T antibiotikum, illetőleg az ezt a vegyületet tartalmazó gyógyászati készítmény daganatgátlás szempontjából hatásos mennyiségét adagoljuk. A találmány révén lehetővé válik továbbá olyan gyógyászati készítmény előállítása, amely a BU-3420T antibiotikum antibakteriális vagy gombaellenes hatású mennyiségét közömbös, gyógyászati szempontból elfogadható vivő- vagy hígítószerrel együttesen tartalmazza. Végül a találmány révén lehetővé válik olyan gyógyászati készítmény előállítása, amely a BU-3420T antibiotikum daganatgátló hatású mennyiségét közömbös, gyógyászati szempontból elfogadható vivő- vagy hígítószerrel együttesen tartalmazza. A gyógyászati készítmények más antimikrobiális vagy daganatgátló hatású anyagokat is tartalmazhatnak, és bármely gyógyszerformában előállíthatók, amely a kívánt adagolási mód szempontjából megfelel. Ilyen készítmények például az orális adagolásra alkalmas szilárd készítmények, így a tabletták, kapszulák, pilulák, porok és szemcsék; az orális adagolásra alkalmas folyékony készítmények, így az oldatok, szuszpenziók, szirupok és elixírek; valamint a párénterális adagolásra alkalmas készítmények, így a steril oldatok, szuszpenziók és emulziók. A készítmények előállíthatók továbbá steril, szilárd formában is, amelyek közvetlenül felhasználás előtt steril vízben, fiziológiás konyhasóoldatban vagy más alkalmas steril, befecskendezhető közegben oldhatók. Antimikrobiális célra a BU-3420T antibiotikumot, illetőleg az e hatóanyagot tartalmazó gyógyászati készítményt úgy adagoljuk, hogy a hatóanyag koncentrációja az adott, kezelést igénylő organizmusra vonatkozó legkisebb gátló koncentrációnál nagyobb legyen. Daganatgátló hatás esetében a BU-3420T antibiotikum optimális adagját és adagolási rendjét egy adott emlős gazdaegyed esetére a tapasztalt szakember könnyen meghatározhatja. Nyilvánvaló, hogy az alkalmazott hatóanyag adagja a kiszerelt készítménytől, az alkalmazás módjától és helyétől, valamint a kezelésre szoruló gazdaegyedtől és betegségtől függ. Ennek megítéléséhez számos olyan tényezőt kell figyelembe venni, amelyek a hatóanyag hatását módosítják, ilyenek: a kor, testsúly, nem, étrend, az adagolás ideje, az adagolás módja, a kiválasztás sebessége, a beteg állapota, gyógyszetkombinációk, esetleges érzékenységi reakciók és a betegség súlyossági foka. Atalálmányt az alábbi, nem korlátozó jellegű példákban részletesen ismertetjük. 1. példa BU-3420T előállítása fermentációval Ferdeagar tenyészetben jól szaporodó M956-1 Micromonospora törzset alkalmazunk 5 darab 500 ml térfogatú Erlenmeyer-lombik oltására, amelyekbe 1% laktózt, 3% oldható keményítőt (a Nichiden Kagaku cégtől szerezhető be), 1% hallisztet (a Hokuyo Suisan cégtől szerezhető be), 0,6% kalcium-szulfát-dihidiátot és 0,5% kalcium-karbonátot tartalmazó oltóközeget helyeztünk el, és a pH értékét sterilizálás előtt 7,0-ra állítjuk. A lombikokat 32 *C hőmérsékleten 7 napig 200 percenkénti fordulatszámú forgó rázóasztalon rázzuk, majd a lombikokból származó 500 ml alikvot tenyészetet 20 literes keverős fermentorba oltunk, amely 12 liter második oltóközeget tartalmaz. Ez az oltóközeg 14% oldható keményítőből, 0,5% glükózból, 1% cukorrépamelaszból, 1% hallisztből és 0,5% kalcium-karbonátból és desztillált vízből áll (pH értéke 7,0). A fermentációt 28 ‘C-on 92 órán át 250 fordulat/perc sebességű keveréssel, és percenként 12 literes levegőztetéssel végezzük. A második oltóközegből 2 litert egy 200 literes fermentortartályba viszünk át, amely 120 liter azonos összetételű közeget tartalmaz, mint a fentebb leírt második oltóközeg. A fermentációt 28 *C hőmérsékleten 73 órán át 250 fordulat/perc sebességű keveréssel, percenként 120 liter levegő bevezetésével végezzük. A fermentlében termelődött antibiotikumot nbutanollal extraháljuk, és papírlemez-agardifFúziós módszerrel, tesztorganizmusként Bacillus subtilis alkalmazásával (pH 8,0) vizsgáljuk. Az antibiotikum rendkívül lassan termelődik, maximális mennyisége 1 pg/ml marad. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 9
