202548. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 4,-demetil-epipodofillotoxin glükozid 4,acil-származékok és e vegyületeket tartalmazó gyógyászati készitmények előállitására.

HU 202548B

savgélt (230-400) használva végeztük.

A következő példák csak a találmány bemutatására szolgálnak anélkül, hogy az igénypontok által meghatározott oltalmi kört szűkítenék.

1. példa

Etopozid-4’-bróm-acetát

(Xlla, Y - bróm-acetil-csoport)

2,05 g (3,48 mmól) etopozid 210 ml száraz acetonitrillel készült és mágneses keverővei kevert szuszpenzióját rövid ideig a szinte teljes oldódás eléréséig melegítjük, majd szobahőmérsékletre hűtjük. Ehhez az elegyhez 0,91 ml (5,2 mmól) N,N-diizopropü-etil-amint, majd 0,63 g (3,92 mmól) brómacetü-kloridot adunk 1 perc alatt fecskendő segítségével. Az elegyet szobahőmérsékleten 30 percig keverjük, majd további 0,246 g (1,56 mmól) brómacetü-kloridot adunk hozzá. További 30 perces keverés után az elegyet 250 ml 0,05 mólos, 7-es pH-jú foszfát puffer és 300 ml etü-acetát között megosztjuk. A szerves réteget két alkalommal 200-200 ml telített vizes nátrium-klorid-oldattal mossuk és nátrium és magnézium-szulfát keverékén szárítjuk. Az oldószert rotációs bepárlóban eltávolítjuk, a visszamaradó sötét szüárd anyagot gyorsan kromatográfiásan tisztítjuk metilén-kloridtól 3-4% metanolt tartalmazó metilén-kloridig változó összetételű gradiens elegyet használva eluálószerként. így

I, 89 g (76,5%) tiszta, cím szerinti vegyületet kapunk, világos sárga szilárd anyag formájában. Egy kis mennyiséget prepára tív rétegkromatográfiás után 5% metanolt tartalmazó metilén-klorid futtatóelegyben tisztítva 192-196 °C-on olvadó analitikai mintát kapunk színtelen szüárd anyag formájában.

IR (KBr): 1775, 1605, 1515, 1490, 1340, 1238, 1130,1040,1010,935,700 cm'1.

*H-NMR (360 MHz, CDCb): delta 6,81 (s, 1H);

6,54 (s, 1H); 6,26 (s, 2H); 5,98 (d, 2H); 4,89 (d, 1H, J-3,4Hz); 4,73 (q, 1H, J-5pHz); 4,65-4,61 (m, 2H);

4,41 (dd, 1H); 4,32 (s, 1H); 4,22 (dd, 1H); 4,15 (dd, 1H); 4,07 (s, 1H); 3,73 (m, 1H); 3,66 (s, 6H), 3,56 (m, 1H); 3,43 (m, 1H); 3,34-3,31 (m, 2H), 3,27 (dd, 1H, J-5,2 és 14,1Hz); 2,90-2,78 (m. 1H); 2,68 (d, 1H,

J. 2,lHz, OH); 2,40 (d, 1H, J-2,6Hz, OH); 1,38 (d, 3H,J~5,0Hz).

Elemi analízis a C3lH33BrOt4 összegképlet alapján:

számított: C:52,k48,H:4,69%,

talált: C:52,72, H: 4,77%.

2. példa

Etopozid-4’-()4-bróm-butirát)

(XHa, Y- 4-bróm-butiril-csoport)

3,20 g (5,44 mmól) etopozid 300 ml száraz acetonitrillel az 1. példában leírtak szerint készült, szinte teljes oldatához szobahőmérsékleten 1,14 ml (6,54 mmól) N,N-diizopropü-etü-amint, majd 1,16 g (6,00 mmól) 4-bróm-vajsavkloridot adunk 1 perc alatt. Az elegyet szobahőmérsékleten 1 órán át keverjük, majd -10 'C-ra hűtjük és400 ml 0,05 mólos, 7-es pH-jű foszfát puffer és 500 ml etil-acetát között megosztjuk. A szerves réteget 150 ml vízzel és 350 ml telített vizes nátrium-klorid-oldattal mossuk, majd nátrium- és magnézium-szulfát keveré9

kén szárítjuk. Az oldószert forgó bepárlóban eltávolítjuk, így 4,1 g (100%) tiszta, cím szerinti vegyület marad vissza színtelen szüárd anyag formájában. Etanol és hexán elegyéből való átkristályosítás után az analitikai mintát tiszta, fehér szüárd anyagként kapjuk.

IR (KBr): 1769, 1602, 1506, 1486, 1465, 1421, 1386, 1362, 1338, 1237, 1159, 1131, 1099, 1078, 1039,1004,933 cm'1.

!H-NMR (360 MHz, CDCto): delta 6,81 (s, 1H);

6.54 (s, 1H); 6,26 (br.s, 2H); 5,98 (d, 2H); 4,89 (d, 1H, J-3,3Hz); 4,74 (q, 1H, J-5,lHz); 4,66-4,62 (m, 2H);

4.41 (dd, 1H); 4,24-4,13 (m,2H); 3,72 (m, 1H); 3,65 (s, 6H); 3,58 (m, 1H); 3,55 (t, 2H); 3,43 (m, 1H); 3,34-3,23 (m, 3H); 2,90-2,80 (m, 1H); 2,75 (t, 2H); 2,63 (d, 1H, J-2,lHz, OH); 2,33 (d, 1H, J-3,4Hz, OH); 2,27 (t, 2H); 1,38 (d, 3H, J=5,lHz).

Elemi analízis a C33H37BrOi4 összegképlet alapján:

számított: C: 53,74, H: 5,06, Br: 10,83%,

talált: C:54,03,H:5,13,Br: 10,80%.

3. példa

Etopozid-4’-(4-jód-butirát)

(XHa, Y- jód-butiril-csoport)

3,55 g (4,81 mmól) etopozid-4’-(4-bróm-butirát) 175 ml acetonnal készült és mágneses keverővei kevert oldatához 12,8 g (85,4 mmól) nátrium-jodidot adunk és az elegyet nitrogén atmoszférában 48 ”C- on 22 órán át tartjuk, majd 1 órán át forraljuk. Ezután szobahőmérsékletre hűtjük, celitrétegen átszűrjük, három alkalommal acetonnal utána mossuk és a szűrletet vákuumban bepároljuk. A maradékot 300 ml metüén-klorid és 250 ml víz között megosztjuk, majd a vizes részt két alkalommal 50- 50 ml metüén-kloriddal extraháljuk. Az egyesített szerves extraktumokat 150 ml telített vizes nátrium-klorid-oldattal mossuk, és nátrium- és magnézium-szulfát keverékén szárítjuk. Az oldószert forgó bepárlóban eltávolítjuk, a maradékot 13,3 Pa nyomáson tovább szárítjuk, így kvantitatív hozamban kapjuk a tiszta, cím szerinti vegyületet vüágossárga szüárd anyagformájában.

‘H-NMR (360 MHz, CDCb): delta 6,81 (s, 1H);

6.54 (s, 1H); 6,26 (br.s, 2H); 5,98 (d, 2H); 4,89 (d, 1H, J=3,2Hz);4,74(q, lH,J-5,0Hz); 4,65-4,61 (m,2H);

4.41 (dd, 1H); 4,22 (dd, 1H); 4,15 (dd, 1H, J-3,5 és 10,6Hz); 3,74 (m, 1H); 3,66 (s, 6H); 3,56 (m, 1H);

3.42 (m, 1H); 3,35-3,24 (m, 3H); 3,31 (t, 2H); 2,90- 2,79 (m, 1H); 2,69 (t, 2H); 2,23 (t, 2H); 1,38 (d, 3H, J-5,0Hz).

4. példa

Etopozid-4’-(4-azido-butirát)

(XHa, Y- 4-azido-butirü-csoport)

115 mg (0,147 mmól) etopozid-4’-(4-jód-butirát) 2 ml száraz dimetü-formamiddal készült oldatához 16,5 mg (0,337 mmól) száraz lítium-azidot adunk, és szobahőmérsékleten nitrogén atmoszférában 28 órán át keverjük. Az elegyet ezután 65 ml etü-acetáttal hígítjuk és 50 ml, 0,05 mólos 7-es pH- jú foszfát pufferrel kirázzuk. A szerves réteget négy alkalommal 25-25 ml vízzel és két alkalommal 40- 40 ml telített vizes nátrium-klorid-oldattal mossuk, majd nátrium- és magnézium-szulfát keverékén

10

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

6