202320. lajstromszámú szabadalom • Berendezés immunkémiai vizsgálatokhoz
1 HU 202 320 B 2 A találmány tárgya berendezés immunkémiai vizsgálatokhoz, legalább egy tartóval, amelynek tetején nyílás van kialakítva és a tartó belseje immunkémiailag aktív anyaggal van bevonva, a tartó teteje eltávolítható záróelemmel van lezárva, a tartó ezen túlmenően tartalmaz egy második immunkémiailag aktív anyagot, amely - a vizsgálandó anyag távollétében - abban az alakban, amelyben a második immunkémiailag aktív anyag a tartóban jelen van, a tárolás és a szállítás alatt nem léphet kölcsönhatásba a tartó belsejével normál feltételek mellett és semleges a felvitt immunkémiailag aktív anyaggal szemben. Az immunkémiai vizsgálatokhoz alkalmazott berendezések egy részénél [például a „Micro-ELISA” vagy a Vironostika (R) Anti-CHV elnevezésű készülékekben] az immunkémiailag aktív anyag a tartó belsejében van elhelyezve annak érdekében, hogy csökkentsék azon műveletek számát, amelyeketel kell végezni az immunkémiai meghatározás véghezvitelére. A műveletek számának csökkentése két szempontból igen fontos: először is azon intézmények szempontjából, amelyeknek nagyszámú ilyen meghatározást kell elvégezni; másodszor pedig az egyedi meghatározásoknál, ahol a hibalehetőségek csökkennek, ha az elvégzendő munkamenetek száma is kevesebb. Ezért számtalan törekvés irányul arra, hogy a fent említett követelményeket minél jobban kielégítő berendezést fejlesszenek ki. Ahhoz például, hogy az ún. szendvics-meghatározást el lehessen végezni, általában felmerült annak szükségessége, hogy a vizsgálandó anyagon túlmenően egy második immunkémiailag aktív anyagot vigyünk be a tartóba, amelynek mennyiségét pontosan ismerjük. Az inkubációs idő leteltével és a tartó kiöblítésével a vizsgálandó anyag mennyiségileg és minőségileg meghatározható. Azáltal, hogy ezt a második immunkémiailag aktív anyagot pontos mennyiségben kell adagolni, további hibalehetőség jelentkezik, és a bevitel - ha nagyszámú anyagról van szó - igen munkaigényes. Nyilvánvaló tehát az igény egy olyan eszközre, amelynek tartója tartalmazza a második immunkémiailag aktív anyagot, hogy a meghatározó vizsgálatot végző személynek ezt már nem kell hozzáadni. A 4 017 597 sz. USA szabadalom olyan megoldást ismertet a probléma kiküszöbölésére, ahol a második immunkémiailag aktív anyagot olyan tartóba viszik be, amely az első immunkémiailag aktív anyag oldatával van bevonva, majd ezt követően a második immunkémiailag aktív anyagot fagyasztják 5-15 másodperc alatt kb. -78°-ra és liofilizálják. Egy másik megoldás szerint a második immunkémiailag aktív anyagot por alakban viszik be. Bár a fent említett eljárások megoldják azt a problémát, hogy az immunkémiai meghatározást végző személynek ne kelljen beadni a második immunkémiailag aktív anyagot, számtalan hátránnyal járnak és a gyakorlatban nem váltak be. Először is a, második immunkémiailag aktív anyag oldott alakban van jelen a bevonattal ellátott csőben egy bizonyos (rövid) ideig. Amennyiben az első immunkémiailag aktív anyag egy antitest (ellenanyag) és a második immunkémiailag aktív anyag a megfelelő antigén, valamilyen kölcsönhatás mindenképpen fellép. Egy bizonyos mértékű kölcsönhatás a fal és a második immunkémiailag aktív anyag között is végbemegy. Másodszor, nagy számú cső vagy mikrotitráló lemez lehűtése -78"-ra 15 másodpercen belül műszakilag komplikált és költséges lépéseket igényel, a liofolizáláshoz pedig nagy és költséges liofilizáló tér szükséges. A jelen találmánnyal olyan berendezés kialakítása a célunk, amelynek alkalmazásával elkerülhető, hogy az immunkémiai meghatározást végző személynek kelljen bevinni a második immunkémiailag aktív anyagot és egyidejűleg kiküszöbölhetők az ismert megoldások hátrányai. A kitűzött feladatot olyan berendezéssel oldottuk meg, amely magában foglal legalább egy, a tetején nyílással ellátott tartót, amelynek belseje immunkémiailag aktív anyaggal van bevonva, a tartó teteje eltávolítható záróelemmel van lezárva és tartalmaz egy második, immunkémiailag aktív anyagot, amely - a vizsgálandó anyag távollétében - abban az alakban, amiben a második immunkémiailag aktív anyag a zárt tartályban jelen van, a tárolás és a szállítás alatt, normál feltételek mellett semmiféle kölcsönhatásba nem lép a tartó belsejével és semleges az arra felvitt immunkémiailag aktív anyaggal szemben. A berendezés azzal jellemezhető, hogy a tartó tartalmaz egy szilárd, lényegében gömb alakú fagyasztva szárított részecskét, ami tartalmazza a második immunkémiailag aktív anyagot. A gömbszerű részecskéket azt megelőzően készítjük el, mielőtt a második immunkémiailag aktív anyag (IAS 2) érintkezésbe kerülne a fal belső részével vagy az első immunkémiailag aktív anyaggal (IAS 1). Ezen túlmenően a találmány szerinti berendezés fokozott mértékű szignifikanciát mutat, ami azt jelenti, hogy a találmány szerinti készülék detektálási határa jobb, mint a technika állását képviselő US-PS 4017 597 szerinti készüléké. Kitűnt ugyanis, hogy a találmány szerinti berendezéssel végzett meghatározás érzékenysége és specifikussága ugyanolyan minőségű - még hosszú ideig tartó tárolás esetén is - mint az ismert berendezésekkel végzett meghatározásoknál, ahol a második immunkémiailag aktív anyagot (IAS 2) a vizsgálat során adják hozzá. Maga a berendezés legalább egy tartót tartalmaz. Amennyiben a berendezés csak egy tartóval van ellátva, ez lehet egy vizsgálócső, amelynek belsejébe az első immunkémiailag aktív anyagot bevisszük és amely tartalmazza a második immunkémiailag aktív anyagot, ami semminemű kölcsönhatásba nem lép a fal belső felével és semleges az első immunkémiailag aktív anyaggal szemben. A tartó teteje fedéllel van lezárva. A vizsgálócsövek és az ilyen jellegű fedelek jól ismertek, készülhetnek üvegből, vagy szintetikus polimerekből, pl. polisztírolból. A vizsgálócső lehetőleg átlátszó kell hogy legyen. A fedő és a vizsgálócső adott esetben készülhet ugyanabból az anyagból. A vizsgálócső mérete és alakja széles határok között változhat: lehet szögletes, kúpos vagy félgömb alakú fenékkel kialakítva, legelőnyösebbnek a félgömb alakú fenékkiképzés tekinthető. A cső magassága változhat pl. 1 és 10 cm között, a belső átmérő 0,3-5 cm, előnyösen 0,5-3 cm lehet. A fedél önmagában ismert módon szerelhető a vizsgálócsőre, oly módon, hogy eltávolítható legyen és zárt állapotban légmentesen zárja le a csövet. A berendezés tartalmazhat több tartót is. A tartók száma széles határok között változhat, pl. 2 és 1000, előnyösen 10 és 500 között, különösképpen 25 és 200 között. A tartók előnyösen ugyanazon anyag segítségével köthetők össze egymással, mint amilyen anyagból 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 2
