202279. lajstromszámú szabadalom • Eljárás izopenicillin N-szintetáz és az azt kódoló DNS vegyületek előállítására
15 HU 202279 B I. TÁBLÁZAT 16 0-laktám antibiotikum-termelő organizmusok Organizmus Antibiotikum Agrobacterium Cephalosporium acremonium Chromobacterium Gluconobacter Nocardia lactomadurans uniformis Penicillium chrysogenura Serratia Streptomyces antibiotic us argentealus cattle y a cinnamonensis clavuligerus fimbriatus flavovirens flavus fulvoviridis griseus halstedi heteromorphus hygroscopicus lipmanii olivaceus panayensis pluracidomyceticus rochei sioyaensis sp.OA-6129 sp.KC-6643 tokunomensis viridochromogenes wadayamensis Az előbb felsorolt 0-laktám antibiotikum-termelő organizmusok közül sokat alkalmaznak a gyógyszeriparban antibiotikum termelés céljaira. Ezeknek az organizmusoknak az antibiotikura-termeló képességét lehet növelni és sokkal hatékonyabbá tenni az antibiotikum bioszintetizéló enzimek sejten belüli koncentrációjának növelésével a fermentáció során. A jelen találmány szerinti, izopenicillin N-szintetáz aktivitást kódoló DNS anyagokat lehet alkalmazni kifejező vektorok megalkotására, amelyek, amikor a megfelelő gazdasejtbe transzformáljuk, növelik a transzformált gazdasejt izopenicillin N-szintetáz aktivitásának sejten belüli koncentrációját, ezáltal növelik a sejt antibiotikum-termelő képességét és hatékonyságát, feltéve, ha a gazdasejt a 0- -laktám antibiotikumot izopenicillin N-szintetáz aktivitást is magában foglaló intermedier reakción keresztül termeli. Egy vektor, amely növeli egy adott gazdasejt - amelybe a vektort transzformáljuk - 10 különböző 0-laktámok penicillinek és cefalosporinok különböző 0-laktámok különböző 0-laktámok cefamicin C nokardicin különböző penicillinek és más 0-laktámok különböző /j-laktámok klavulánsav asparenomicin A, MM 4550 és MM 13902 tienamicin, SF 1623 és cefamicin A és B cefamicin A és B PA-32413-I, cefamicin C, A16886A, penicillinek, cefalosporinok, klavulánsav, és más klavámok cefamicin A és B MM 4550 és MM 13902 MM 4550 és MM 13902 MM 4550 és MM 13902 cefamicin A és B, karpetimicin A és B cefamicin A és B 1C2081X és defamicin A és B dezocetoxi-cefalosporin C cefamicin, penicillin N, 7-metoxi-cefalosporin C, A16884, MM4550, MM13902 epitienamicin F, MM4550 és MM13902 C2081X és cefamicin A és B pluracidomicin A cefamicin A és B MM4550 és MM13902 OA-6129A karpetimicin A aszparenomicin A és B cefamicin A és B WS-3442-D izopenicillin N-szintetáz aktivitásának sejten ‘ ‘ belüli koncentrációját, a következő elemeket igényli: 1.) egy, a jelen találmány szerinti, izopenicillin N-szintetáz aktivitást kódoló DNS anyag; 2.) egy átíró és transzlációs aktiváló szekvencia, amely nem csupán működik a transzformálandó gazdasejtben, hanem a korrekt orientációban és helyzetben van elhelyezve, hogy elősegítse az izopenicillin N-szintetáz aktivitást kódoló DNS kifejeződéig sét; és 3.) replikációs vagy integrációs funkciók, amelyek a vektorok fenntartását szolgáltatják a gazdasejtben. Természetesen a fentebb leírt vektorok magukban foglalhatnak antibiotikum-rezisztencia gént vagy bi^ zonyos más elemeket is, amelyek módot nyújtanak azoknak a gazdasejteknek a kiválasztására, amelyek tartalmazzák a vektort, de ilyen szelektálható elemek sem nem szükségesek, sem nem kívánatosak, amikor a vektor a gazdasejt kromoszomális DNS-ébe integráió('° dik.
