202249. lajstromszámú szabadalom • Új eljárás 2-dezoxi- 2',2'-difluor-nukleozidok előállítására
1 HU 202249 B 2 elfogadható savaddíciós sóját kapjuk meg mintegy 99,0%-os tisztaságban. Az alábbi példák a jelen találmány speciális kiviteli módjait mutatják be. A példáknak nem az a célja, hogy bármilyen módon is korlátozzák a találmány oltalmi körét. 1. példa D-eritro- és D-treo-2-dezoxi-2,2-difluor-pentofuranóz-l-ulóz-3-benzoát enantiomer keverékének előállítása. Visszafolyató hűtővel összeillesztett 2 literes lombikhoz 104 g (0,27 mól) 96,0% tisztaságú etil-2,2- difluor-3-(benzoil-oxi)-3- (2,2-dimetil-dioxolán-4- il)propionátot adunk, amely 3 rész 3-R-benzoil-oxi enantiomerből és 1 rész 3-S-benzoil-oxi enantiomerből áll. Acetonitrilt (1000 ml), ionmentesített vizet (25ml, 1,35 mól) és trifluor-ecetsavat (6,4 g, 0,05 mól) adunk hozzá. Az így létrejött oldatot visszafolyatási hőmérsékletére melegítjük (mintegy 78 °C), és ezen a hőmérsékleten kevertetjük 4 órán át. 4 óra múlva a hűtőt módosítjuk abból a célból, hogy a forró folyadék deszti 1 Iáiódjék visszafolyatás helyett. Amikor az illó acetonitril, víz és trifluor-ecetsav desztillálódon, friss acetonitrilt adunk hozzá, abból a célból, hogy az oldat térfogatát mintegy 1000 ml-en tartsuk. Miután összesen mintegy 3000 ml folyadék desztillálódon, az oldatot lehűtjük szobahőmérsékletre (22 °C). A főbb komponensek azonosítását az oldatban nagy teljesítményű folyadékkromatográfiás (HPLC) összehasonlítással végezzük autentikus referencia standardokkal. A vizsgálati mintát úgy készítjük el, hogy 125 pl reakcióoldatot elhelyezünk egy 25 ml-es lombikban, hozzáadunk 2 ml izopropanolt, majd az így létrejött oldatot hígítjuk 25 ml-re hexánnal. Az oszlopot olyan eluáló oldószerrel eluáljuk, amely 6 térfogat% izopropanolból és 94 térfogat % hexánból áll. Az alkalmazott oszlop 25 cm-es Zorbax CN. A detektor hullámhosszúsága 230 nm, az oszlop átáramlási sebessége 2,0 ml/perc, az injekciós térfogat lOpl. A HPLC elemzés megállapítja, hogy a reakcióoldat olyan terméket tartalmaz, amely 87,2 tömeg % D-eritro- és D-treo-2-dezoxi-2,2’-difluor-pentofuranóz-l-ulóz-3-benzoát enantiomer keveréknek mérhető. A HPLC vizsgálat azt is jelzi, hogy a jelen levő főbb szennyezések az alábbiak: 2,7 tömeg % nem reagált propionát és 5,5 tömeg % etil-2,2-difluor-3-(benzoil-oxi)-4,5-dihidroxi- petanoát. 2. példa D-eritro- és D-treo-2-dezoxi-2,2-difluor-pento-furanóz-l-ulóz-3-benzoát előállítása 110 1-es üveggel bélelt reaktorba 64 liter acetonitrilt, 6,00 kg (16,2 mól) etil-2,2-difluor-3-(benzoiloxi)-3-(2,2-dimetil-dioxolán-4-il)propionát 3 rész 3- R-ből és 1 rész 3 S-ből álló enantiomer keveréket, 0,57 kg (4,4 mól) trifluor-ecetsavat és 1500 ml (83,3 mól) tisztított vizet adunk. Az így létrejött keveréket visszafolyatási hőmérsékletére melegítjük (mintegy 78 °C), és ezen a hőmérsékleten kevertetjük 5V2 órán át. Ezután az acetonitril, víz és trifluor-ecetsav oldatából 16 litert desztillálunk és 16 liter toluollal helyettesítjük. Az így létrejött oldatot mintegy 96,5 *C-ra melegítjük és további 16 liter illó folyadékot desztillálunk le. Friss toluolt adunk hozzá és az oldatot ismét 96,5 °C hőmérsékletre melegítjük. A desztillálást, friss toluol hozzáadását, és a 96,5 °C hőmérsékletre melegítés folyamatát addig ismételjük, amíg 107 liter illó alkotórészt desztillálunk le. A maradék oldatot szobahőmérsékletre lehűtjük (22 °C), miközben csekély nitrogén- szivárgást tartunk fenn a reaktorban annak biztosítására, hogy nedves levegő ne léphessen be a reaktroba a hűtés során. Az így létrejött oldat, az 1. példában leírt HPLC vizsgálattal jellemezve, olyan terméket tartalmaz, amelyben D- eritro- és D- treo-2-dezoxi-2,2-difluor-pentofuranóz-1- ulóz-3-benzoát enantiomer keverékéből tömeg szerinti 81,8% mérhető. A HPLC vizsgálat az alábbi nagyobb tisztálatlanságokról jelzi, hogy jelen vannak: 2,2 tömeg % nem reagált propionát és 7,7 tömeg % etil-2,2-difluor-3-(benzoil-oxi)-4,5-dihidroxi-petanoát. 3. példa A. D-eritro- és D-treo-2-dezoxi-2,2-difluor-pentafuranóz-1 -ulóz-3,5-dibenzoát előállítása. D-eritro- és D-treo-2-dezoxi-2,2-difluor-pentafuranóz-1-ulóz-3-benzoát toluolban képzett oldatát készítjük el a 2. példa eljárása szerint. Ez az oldat, az 1. példában leírt HPLC vizsgálat szerint, olyan terméket tartalmaz, amelyben 73,0 tömeg % D-eritro- és D-treo-2- dezoxi-2,2-difluor-pentofuranóz-1 -ulóz-3- benzoát mutatható ki. Az oldatot 50 °C hőmérsékletre melegítjük fel csökkentett nyomáson, hogy a toluolt eltávolítsuk és így 20,0 g (53,6 mmól) D-eritro- és D-treoenantiomer keveréket kapunk olajként. Az olajat átvisszük 500 ml-es lombikba és 100 ml etil- acetátot és 11,6 g (146,8 mmól) piridint adunk hozzá. Benzoilkloridot (10,3 g; 73,5 mmól) oldunk fel 100 ml etilacetátban, és az így létrejött oldatot cseppenként 2 óra alatt hozzáadjuk az 500 ml-es lombik tartalmához. A reakciókeveréket mintegy 60 'C hőmérsékletre felmelegítjük és kevertetjük ezen a hőmérsékleten 3*/2 órán át, majd lehűtjük szobahőmérsékletre (22 °C), és egy éjszakán át kevertetjük. Az így létrejött keveréket egymás után mossuk 200 ml vízzel, 200 ml 1 n sósav oldattal, 200 ml vízzel, 200 ml telített nátrium-bikarbonát oldattal, és 200 ml telített nátrium-klorid oldattal, majd vízmentesítjük vízmentes magnéziumszulfátban. A vízmentesített oldatot csökkentett nyomáson koncentráljuk, így 26,0 g olajat kapunk. Az olaj reprezentatív mintáját acetonitrilben feloldjuk és az 1. példában leírtak szerint HPLC eljárást alkalmazva mérjük, így megállapítjuk, hogy az olaj 52,0 tömeg % 2-dezoxi-2,2- difluor-D-eritro-pentafuranóz-l-ulóz-3,5-dibenzoátot és 16,7 tömeg % megfelelő D-treo enantiomert tartalmaz. -B. 2-dezoxi-2,2-difluor-D-eritro-pentofuranóí®l - ulóz-3,5-dibenzoát. A fentebb készített megmaradó olajat feloldjuk 20 ml metilén kloridban. Hexánt (30 ml) adunk hozzá keverés közben. Az oldatot beoltjuk autentikus 2-dezoxi-2,2-difluor-D-eritro-pentofuranóz-1 - ulóz-3,5-dibenzoáttal és további 25 ml hexán/metilén-klorid oldatot (3:2, térfogat/térfogat) adunk hozzá. Az így létrejött oldatot mintegy 0 'C hőmérsékletre lehűtjük 15 percre. A kicsapódott szilárd anyagot vákuumszűréssel összegyűjtjük és mossuk 25 ml hideg (0 “C) hexán/metilén-klorid oldattal (3:2, térfogat/térfogat). 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 7
