202249. lajstromszámú szabadalom • Új eljárás 2-dezoxi- 2',2'-difluor-nukleozidok előállítására
1 HU 202249 B 2 A találmány új eljárást nyújt 2’-dezoxi-2\ 2’-difluor-nukleozidok előállítására. A 4,526,988 lajstromszámú amerikai egyesült államok-beli szabadalmi leírás kitanítást ad arról, hogy a 2’-dezoxi-2’,2’-difluomukleozidok hasznos vírusellenes szerek. A 184,365 számú európai szabadalmi bejelentés ismerteti ugyanezeknek a vegyületeknek az alkalmazását rákellenes szerekként. Az ezekben a közleményekben ismertetett szintetikus eljárások olyan köztes termékeket foglalnak magukban, amelyek két kiralitási centrumot is tartalmazhatnak. Az egyik ilyen köztes termék, amelynek királis centruma van, eritro és treo enantiomereket tartalmazó védett lakton, ahol az enantiomereket az (I) általános (eritro) és a (II) általános képlet (treo) mutatja be; ahol a képleteken belül P jelentése valamely védőcsoport. A fenti közlemények ismertetik, hogy az eritro enantiomer az előnyös, mivel ez olyan szénhidrátot ad, amely a természetben előforduló ribóz sztereokémiájával bír. Az olyan szénhidrát, amely a természetben előforduló ribóz sztereokémiájával bír, azért előnyös, mert olyan nukleozid végterméket alakít ki, amely kiváló biológiai aktivitást mutat. A 4,526,988 lajstromszámú amerikai egyesült államok-beli szabadalmi leírás a fentebb említett eritro enantiomer előállítását úgy írja le, hogy először alkil-2,2-difluor-3-hidroxi-3- (2,2-dialkil-dioxolán-4- il)propionátot képeznek, amely 3-R- és 3-S-hidroxi enantiomereket tartalmaz, amelyeket a (III) általános képlet (3-R-) illetve (IV) általános képlet (3-S-) mutat be, ahol a képletben R4 és Rs jelentése egymástól függetlenül 1-3 szénatomos alkilcsoport; az arány az enantiomerek között mintegy 3 rész 3-R-enantiomer mintegy 1 rész 3-S-enantiomerre. A közlemény ismerteti, hogy a 3-R-hidroxi-enantiomereknek megfelelő a sztereokémiája ahhoz, hogy a kívánt eritro enantiomert alakítsa ki, és hogy a 3-R- és 3-S- enantiomereket csak drága, munkaigényes oszlopkromatográfiás eljárásokkal lehet szétválasztani. A szabadalom kioktatást ad arról is, hogy amikor a 3-R-hidroxi enantiomert izolálják, azután hidrolizálnak igen enyhe körülmények között, hogy nem védett laktont képezzenek, nevezetesen az (V) képletű 2-dezoxi-2,2-difluor-D-eritro-pentofuranóz-l-ulózt. A szabadalom kioktatást ad arról is, hogy a fenti vegyület képzéséhez alkalmas enyhe körülmények magukba foglalják hidrolizáló reagens alkalmazását is, pl. enyhe savas ioncserélő gyanták vagy viszonylag erős savak alkalmazását, pl. vizes ecetsav vagy klór-ecetsav alkalmazását, amelyek pKa értéke 2,8 és 5,0 között van. A hidrolizáló reagensek mindkét típusa okozhat gondokat a hidrolízises reakcióban. így pl. ioncserélő gyanta alkalmazása nagy mennyiségű víz alkalmazását igényli, amely esetben különösen nagy léptékű reakciókban, a lakton gyakran visszaalakul nyitott láncú prekurzora formájába vízre való érzékenysége miatt. A viszonylag erős savak másrészt kevéssé előnyös hidrolizáló reagensek a 3-R-hidroxi enantiomer átalakításához a nem védett laktonná, mivel ezek nagy mennyiségű nem kívánt reakcióterméket termelnek, beleértve a nem reagált kiindulási terméket is. Végül amikor a nem védett lakton keletkezik, ez átalakul a fentebb leírt védett eritro-laktonná valamilyen hidroxi-védőcsoport hozzáadásával a lakton hidroxi-csoportjaihoz. Második királis centrum is keletkezik az anomer szénatomnál, amikor a lakton ketocsoportja alkohollá alakul át. Pontosabban a kívánt eritro-konfiguráció két anomerjét a- és ß-anomerkönt azonosítjuk, amelyek képletét a (VI) illetve (VII) képlet mutatja be. Az 1. helyzetnél levő nem védett hidroxil-csoportot végül helyettesíthetik valamilyen heterociklusos bázissal, pl. citozinnal, hogy a biológiailag aktív 2’dezoxi-2’,2’-difluor-nukleozidok védett prekurzorait nyerjék. A ß-anomer prekurzor előnyösebb, mivel ez a 2’-dezoxi-2’,2’-difluor-nukleozidokat szolgáltatja, amelynek nagyobb biológiai aktivitása van. A 4,526,988 lajstromszámú amerikai egyesült államok-beli szabadalmi leírás ismerteti a t-butil-dimetil-szilil alkalmazását védőcsoportként. Amikor ezt a védőcsoportot alkalmazzák a 2’-dezoxi,2’-difluor-nukleozidok szintézisében, a termék mintegy 4:1 a/ß anomer arányban alakul ki. Ezt a terméket drága, munkaigényes oszlopkromatográfiás eljárásokkal kell tisztítani, hogy izoláljuk a kívánt ß-anomert. A jelen találmány kényelmes eljárást nyújt olyan 2’-dezoxi-2’,2’-difluor-nukleozidok előállítására, amelyek a kívánt eritro- és ß-sztereokömiäval bírnak; ez az eljárás szükségtelenné teszi azt a terjedelmes oszlopkromatográfiás tisztítást, amelyet a korábbi eljárások igényeltek. Ezen kívül a jelen találmány nagyobb kitermelésű eljárást nyújt a kívánt eritro- és |3-sztereokémiájú (XÚI) általános képletű 2’-dezoxi-2’,2’-difluor-nukleozidok előállítására, mint ez korábban lehetséges volt. A fenti képletben R hidrogénatom vagy (IX) általános képletű csoport, és B (XIV), (XVII) vagy (XIX) általános képletű csoport, ahol R1 hidroxicsoport, R2 bróm-, klór- vagy jódatom, R3 hidrogénatom vagy 1-4 szénatomos alkilcsoport, R4 hidrogénatom vagy 1-4 szénatomos alkilcsoport, és az ß/ß anomer aránya körülbelül 1:1. A jelen találmány szerinti eljárás intermedierjei a (VIII) általános képletű eritro- és treo laktonok enantiomer keverékei. Ezek előállítása abban áll, hogy egy (X) általános képletű alkil-2,2-difluor-3-hidroxi- 3-(2,2-dialkil-dioxolan-4-il)-propionát 3-R- és 3-S- enatiomerjeinek vagy ezek védett származékainak keverékét, ahol a képletben R jelentése a fentebb megadott és R4 és R5 jelentése egymástól függetlenül 1-3 szénatomos alkilcsoport, hidrolizáljuk, hidrolizálószerként erős savat alkalmazva, majd a vizet azetrop desztillálással eltávolítjuk. Az eljárás kristályos laktont alakít ki, amely stabil, ennek megfelelően a visszalakulás a nyílt láncú prekurzorrá minimális szinten marad, akárcsak a nem-kívánatos reakciótermékek képződése. Ugyancsak értékes intermedier a (XI) képletű 2- dezoxi-2,2-difluor-D-eritro- pentofuranóz-l-ulóz-3,5- dibenzoát, mely szelektíven izolálható 95,0%-nál nagyobb tisztaságban a (XII) képletű eritro- és treolaktonok enantiomer keverékéből; az eljárás abban áll, hogy az enantiomer keveréket metilén-kloridban, feloldjuk, az oldatot -5 ‘C és 10 'C közti hőmérséklettartományban lehűtjük, és a kicsapódó eritro enantiomert összegyűjtjük. Ilyen módon a kívánt eritro enantiomert kaphatjuk meg anélkül, hogy drága, munkaigényes oszlopkromatográfiás módszereket alkalmaznánk. A jelen találmány továbbá eljárást nyújt legalább 80,0% tisztaságú ß-2’-dezoxi-2’,2’-difluor-citidin-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 2
