202242. lajstromszámú szabadalom • Új eljárás telítetlen aminosav-vegyületek és ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
HU 202242 B 2 perc múlva a diklórmetános fázist elválasztjuk és háromszor 15-15 ml vízzel mossuk. A vizes fázist háromszor 20-20 ml diklórmetánnal extraháljuk és vákuumban bepároljuk. A maradékot 10 ml 5 n sósavban oldjuk és 48 órán át keverjük, 20 ml vízzel hígítjuk és háromszor 20-20 ml diklórmetánnal extraháljuk. A vizes fázist vákuumban bepároljuk, a maradékot nagyvákuumban szárítjuk, 3 ml etanolban oldjuk és körülbelül 1 ml propilénoxidot csepegtetünk hozzá. A szuszpenziót szűrjük, a szüredéket etanolla mossuk és nagyvákuumban szobahőmérsékleten szárítjuk. így 62 mg 10 vegyületet kapunk, mely 165 °C-on olvad bomlás közben. Az enantiomer tisztaságvizsgálata céljából kis mennyiséget (R)-(+)-metoxi-trifiuormetil-fenil-acetsavkloríddal amiddá alakítunk. 'H-NMR (300 MHz) az OCH.v-jelek integrálásával eredményeként adódott: >95% (2R)-izomer (3,44 ppm) és < 5% (2S)-izomer (3,37 ppm). 5. példa: (2R)-2-Amino-4-metil-5-foszfono-3- -penténsav-etilészter a) (4R)-2,2-Dimetil-4-(3’-diizopropil-foszfono-2’metil-prop-l’-enil)-oxazolidin-3-karbonsav-terc-butil észter (7) 6,68 g a 40 példában leírtak szerint előállított bromidot 14,8 ml triizopropil-foszfitban 17 órán át melegítünk 70 °C-on és 100 mbar nyomáson. A keveréket 0,4 mbar nyomáson 70 °C-on bepároljuk. Ezután 350 g szilikagélen kromatografáljuk. ELuálószerként 1:1 arányú hexán-etilacetát elegyet használunk. így 8,28 g 1 vegyületet kapunk. Rf érték = 0,077. b) N-[(2R)-5-Diizopropil-foszfono-l-hidroxi-4-metil-3-pentén-2-il]-karbaminsav-terc-butilészter (2) 4,49 g a) pontban leírtak szerint előállított 1 foszfonsav észter 100 ml metanollal készített oldatához 2,25 g Amberlyst®-15 jelű (H+-alak, 20-50 mesh) ioncserélőt adunk. Két napon át keverjük szobahőmérsékleten, szűrjük és a szűrletet bepároljuk. A maradékot 125 g szilikagélen kromatografáljuk. Eluálószerként 20:1 arányú etilacetát-metanol elegyet használunk. így 2,44 g 2 vegyületet kapunk. c) (2R)-2-terc-Butoxi-karboniI-amino-5-diizopropil-foszfono-4-metil-3-penténsav (3) 1,6 g b) pontban leírtak szerint előállított 2 alkohol 60 ml acetonnal készített oldatához 0-5 °C-on 3,3 ml oldatot adunk, mely króm (IV) oxidra 3,25 mólos és kénsavra 5,29 mólos. A reakcióelegyet 6 órán át keverjük 0 °C-on és 12 órán át szobahőmérsékleten. 5 ml izopropanol és 40 ml 20%-os nátriumklorid oldat hozzáadása után 10 percen át keverjük, végül egy Kutscher-Steudel-készülékben folyamatosam extraháljuk metilacetáttal. A szerves fázist nátrium szulfát felett szárítjuk, bepároljuk és a maradékot 75 g szilikagélen kromatografáljuk. Eluálószerként 16:10:1 arányú hexán-etilacetátecetsav elegyet használunk. így 0,92 g 3 vegyületet nyerünk. [alfa]D= -94,5' (c-1,2, CHCb). 'H-NMR (300 MHz, CDCI3): 1,2-1,3 (4d, (2-propO)2); 1,4 (s, (CH3)3CO); 1,95 (d, J-3, CH3- C(4)); 3,5 és 3,62 (2 dxd, J-23 és 15, 2H-C(5)); 4,66 (m, (2-propO)2); 4,92 (m, H-C(2)); 5,30 (m, H-C(3)); 5,42 (d, J- 7, NH); 9,0-10,0 (széles, CO2H). d) (2R)-2-terc-Butoxi-karbonil-amino-5-diizopropil-foszfono-4-metil-3-penténsav-etilészter (4) 0,2 g c) pontban leírtak szerint előállított 3 sav 15 ml vízmentes diklórmetánnal készített oldatához 0-5 °C-on 0,09 g l-amino-l-klór-N,N,2-trimetil-propént adunk. A reakcióelegyet 30 percen át keverjük 0 "C-on, majd 0,4 g piridin 5 ml etanolos oldatát adjuk hozzá. Ezután 90 percen át keverjük 0 “C-on és 15 órán át szobahőmérsékleten, 20 ml diklórmetánnal hígítjuk és kétszer 20-20 ml vízzel mossuk. A szerves fázisokat nátriumszulfát felett szárítjuk, bepároljuk és 25 g szilikagélen kromatografáljuk. 10:1 arányú etilacetát-metanol eleggyel eluálunk, így 0,12 g 4 vegyületet kapunk. 'H-NMR (300 MHz, CDCI3): 1,2-1,4 (m, 2-CH3)2CHO, CH3CH2O); 1,45 (s, (CH3)3CO); 1,45 (s, (CH3)3CO); 1,98 (d, J-3, CH3-C(4)); 2,55 (d, J=23, 2H-C(5)); 4,2 (m, CH3CH2O); 4,69 (m, 2(CH3)2CHO); 5,0 (m, H-C(2)); 5,16 (m, H-C(3), NH). e) (2R)-2-Amino-4-metil-5-foszfono-3-penténsavetilészter (5) A d) pontban leírtak szerint előállított 4 észter 0,1 g-ját 10 ml diklórmetánban oldjuk és 0 °C-on 0,11 ml trimetil-szilil-bromidot adunk hozzá. A reakcióelegyet 4 órán át 0 °C-on és 15 órán át szobahőmérsékleten keverjük. 20 ml vizet adunk hozzá, 15 percen át keverjük, a vizes fázist elválasztjuk és a vizet nagyvákuumban lepároljuk. A maradékot kétszer 5-5 ml etanolban oldjuk, bepároljuk és ismételten oldjuk 5 ml etanolban. 0,5 ml propilénoxidot adunk hozzá. A csapadékot szűrjük, etanollal mossuk és 15 órán át szárítjuk nagyvákuumban. így 48 mg 5 vegyületet kapunk. [alfa]D=-75° (c=0,5, H2O). Az enatiomer tisztaságvizsgálatához egy kis mennyiséget (R)-(+)-metoxi-trifluor-metil-fenil-ecetsavkloriddal, ezt követően diazometánnal amid-dimetilészter származékká alakítunk. 'H-NMR (300 MHz): OCH3-jelek integrálásának eredményeként adódott: >97% (2R)-izomer (3,5 ppm) és <3% (2S)-izomer (3,37 ppm). 6. példa (2R)-2-Amino-4-metil-7-foszfono-3-hepténsav a) (4R-2,2-Dimetil-4-(l’-hidroxi-2’-metil-prop-2’enil)-oxazoIidin-3-karbonsav-terc-butilészter (7) 6,9 g (4S)-2,2-dimetil-4-formil-oxazolidin-3-karbonsav-terc-butilésztert (előállítását lásd (4c) példánál) oldunk 60 ml vízmentes tetrahidrofuránban és 25 perc alatt 0-5 °C-on 45 ml 1,1 mólos izopropil-magnéziumbromidot oldatot csepegtetünk hozzá. Ezután 45 percen át keverjük 0 °C-on, hagyjuk szobahőmérsékletűre melegedni, ismét lehűtjük 10 “C-ra és 90 ml pufferoldatot (1 mólos foszfát, pH=7) adunk hozzá. Ezután szűrjük és a szűrletet kétszer 50-50 ml vízzel és telített nátriumklorid-oldattal mossuk, nátriumszulfát felett szárítjuk. Az oldószer lepárlásával 8 g 7 vegyületet nyerünk diasztereomer elegyként. Az elválasztást végezhetjük szilikagélen kromatografálva, eluálószerként 4:1 arányú hexán-etilacetát elegyet használunk. így kristályos (l’S)-treo-epimert (Rf-érték: 0,2) és (l’R)-eritro-epimert (Rf-érték: 0,16) nyerünk, arányuk körülbelül 1:2. b) (4R)-4-(r-Acetoxi-2’-etiI-prop-2’-enil)-2,2-dimetil-oxazolidin-3-karbonsav-terc-butilészter (2) 1,56 g az a) pontban leírtak szerint előállított epimer keverék 60 ml piridinnel készített oldatához 0-5 °C-on 10 perc alatt 60 ml ecetsavanhidridet 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 12
