202229. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új pirazolil- és indazolil-piridin-amin-származékok és ilyen vegyületeket tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
1 HU 202 229 B 2 A találmány tárgya új pirazolil- és indazolil-piridin-amin-származékok és ilyen vegyületeket tartalmazó gyógyászati készítmények előállítása. Felismertük, hogy az új (I) általános képletű vcgyülctck - a képletben Rí jelentése hidrogénatom vagy 1-5 szénatomot tartalmazó alkilcsoport, R3 és R4 egymástól függetlenül hidrogénatomot vagy együtt -CH=CH-CH=CH- képletű csoportot alkotnak úgy, hogy a (XXII) képletű csoport indazolgyűrűnck felel meg - fájdalomcsillapító és antidepresszáns hatásúak. Az (I) általános képletű vegyületeket két csoportba, és pedig az (la) és 0b) általános képletű csoportokba sorolhatjuk. A találmány szerinti eljárással előállítható vegyülctck szokásos módon gyógyászatilag elfogadható savaddíciós sókká alakíthatók, szervetlen vagy szerves savakkal, például hidrogén-kloriddal, kénsavval, ecetsavval vagy malcinsavval. Az „1-5 szénatomot tartalmazó alkilcsoport” egyenes vagy elágazó láncú csoport lehet, ha csak másképpen nem jelezzük. Az ilyen alkilcsoportokra példaképpen megemlíthetjük a metil-, etil-, n-propil-, izorpopil-, n-butil-, izobutil-, szek-butil-, tcrc-butil- és az egyenes vagy elágazó láncú pentilcsoportokat. A találmány szerinti (I) általános kcplctű vcgyülcleket a következőkben ismertetett módon állíthatjuk elő (Rí, R3 és R4 jelentése a korábban megadott, hacsak másképpen nem jelöljük). A. lépés Valamely, R! helyén hidrogénatomot vagy 1-5 szénatomot tartalmazó alkilcsoportot hordozó (II) általános kcplctű vcgyülctet egy (III) általános képletű vegyülcttel - a képletben Hal jelentése klór- vagy fluoratom - reagáltatunk az A reakcióvázlalban bemutatott módon, amikor valamely megfelelő (I) általános képletű vcgyülctet kapunk. A rcagáltatást jellegzetesen éter-típusú oldószerben, így például bisz(2-metoxi-ctil)-étcrbcn, dictil-éterbcn, dimctoxi-élerbcn, dioxánban vagy tetrahidrofuránban, vagy pedig egy poláris aprotikus oldószerben, így például dimetil-formamidban, dimclil-acctamidban, hexamelil-foszforsav-lriamidban vagy dimetil-szulfoxidban, vagy pedig egy protikus oldószerben, így például etanolban vagy izopropanolban 20 °C és 150 °C közötti hőmérsékleten hajthatjuk végre. B. lépés Valamely, a fenti A. lépesben ismertetett módon előállítható (I) általános képletű vcgyülctet egy erős bázissal, így például nálrium-hidriddel vagy kálium-hidriddcl reagáltatunk egy alkalmas oldószerben, így egy poláris aprotikus oldószerben, például dimclil-forinamidban vagy dimetil-szulfoxidban, vagy éter típusú oldószerben vagy aromás szénhidrogénben, -10 °C és +50 °C, előnyösen 0 "C és 25 °C közötti hőmérsékleten, majd a kapott aniont valamely (Rg-Cl) általános képletű klórvegyülcttel - a képletben R8 jelentése 1-5 szénatomot tartalmazó alkilcsoport - reagáltatunk -10 °C és +80 °C, előnyösen 0 “C és 25 °C közötti hőmérsékleten, egy (V) általános képletű vcgyülctet kapva. A rcagáltatást a B reakcióvázlalban mutatjuk be. Miként említettük, a találmány szerinti eljárással előállítható (I) általános képletű vegyülctck antídeprcsszáns hatásúak. Antidepresszáns hatásuk kiértékelhető egereken a tetrabenazinnal kiváltott ptózis megelőzésében. A kísérleti módszer és az eredmények a következők. Tetrabenazin által kiváltott ptózis gátlása egereknél A tetrabenazin egereknél ptózissal együítjáró olyan viselkedési depressziót okoz, amely hasonló a rezerpin által okozotthoz. Az antidepresszáns hatású vegyületek - mind a monoamin-oxidáz-inhibitorok, mind a triciklusos vegyülctck - ismert módon ezeket a hatásokat megelőzik vagy an tagonizálják és az antagonizmus mértéke korrelációban van a klinikai hatékonysággal. A tetrabenazin által kiváltott ptózis megelőzése egereknél tehát egy lehetséges antidepresszáns aktivitás előzetes megállapítására használatos. Közelebbről a következőképpen járunk el: 5-5 egyedből álló kísérleti csoportokban 20-30 g tömegű hím egereken használunk. Mindegyik kísérleti vegyületet feloldjuk vagy szuszpendáljuk felületaktív anyag desztillált vizes oldatából egy cseppben, majd olyan térfogatban adjuk be, hogy az megfeleljen 10 ml/tesllömcgkg dózistérfogatnak. Mctán-szulfonátsójából tetrabenazin (TBZ) oldatot készítünk cl úgy, hogy az oldat koncentrációja lehetővé tegye intraperitoncális injektálással (i.p.) a szabad bázisra vonatkoztatva 60 mg/tcstlömegkg-os dózis beadását. A vizsgálandó vcgyülctet 60 perccel, míg a tetrabenazint 30 perccel a kísérleti megfigyelés előtt adjuk be. Egy-egy kontrollcsoport ugyanezen a módon oldószert és TBZ-t kap. Elsődleges vizsgálat (screening) céljából a kísérleti vegyületet i.p. adagoljuk 5 egyedből álló csoportnak. Egy-egy dózistartományra 8 egyedből álló csoportot használunk az EDj« megállapítása céljából. A TBZ injektálása után 30 perccel az egyedeket egyenként 266,7, 203,2 és 152,4 mm méretű műanyag tartályokba helyezzük, és az elhelyezés után 1 perccel értékeljük őket ptózisra a következő skála alapján: a szemek zártak = 4, a szemek 3/4 részig zártak = 3, a szemek félig zártak = 2, a szemek 1/4 részig zártak = 1 és a szemek nyitottak = 0. Az öt egyedből álló csoportok mindegyike cselén az elsődleges vizsgálatnál az összérték 0 és 20 közötti lesz; ezeket az értékeket használjuk a kísérleti vegyület hatékonyságának jelzéseként. A csak hordozóanyaggal kezelt kontrollcsoport értékét használjuk fel annak megállapítására, hogy egy kísérlctsorozat egyáltalán értékelhető-e. Ha ennek a kontrollcsoportnak az értéke 17-nél kisebb, az eredményeket értékelhetetlennek tekintjük és a kísérletet megismételjük. A ptózis százalékos gátlását a következőképpen számítjuk ki: kontroll értéke - kísérleti vegyület értéke . jqq% kontroll értéke Az ED^ meghatározása céljából négy vagy öt dózist adunk be, hogy a becsült értéket körbchatároljuk, és csak 27 és 32 közötti kontrollértékct fogadunk el, hogy biztosítsuk az ED30 értékének pontosságát. Más szavakkal ez azt jelenti, hogy ez az átlagos kon troli-érték állatonként 3,4-4,0 kell legyen, és minthogy az ED50 meghatározásához 8 állatot használunk, az említett értéke 27-32. Az ED50 értékek meghatározása céjlából lineáris reg-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 2
