202119. lajstromszámú szabadalom • Adjuváns elegy, és eljárás az ezt tartalmazó vakcina előállítására
HU 202119B A találmány tárgya olajmentes, poli(oxi-propilén)-poli(oxi-etilén)poliolokat tartalmazó adjuváns elegy, továbbá eljárás a fenti adjuváns elegyet tartalmazó vakcinák előállítására. A fertőző betegségek elleni védekezés ismert módja az ember- és állatgyógyászat területén egyaránt az, hogy az embert vagy állatot olyan immunogén anyaggal vakcinálják, amely ellen védőhatású antitestek képződnek. A fenti célra például adhatják magát a patogént, vagy élő, de előnyösen nem fertőző formában, vagy az elölt patogént, vagy a patogén egy antigén frakcióját, amelyből hiányzik a fertőző komponens. Az utóbbi két esetben egy vagy több olyan komponenst is kell adagolni az antigén mellett, amely a védendő gazdaszervezet immunválaszát stimulálja. Afenti immunstimuláló komponensek - amelyeket adjuvánsoknak neveznek - közé tartozik például a Freund-féle komplett vagy nem-komplett adjuváns, a Corynebacterium parvum, Bordatella pertussis, muramil-dipeptidek, szaponinok, alhidrogcl, trehalóz-dimikolát és az ásványi olajok. A fenti adjuvánsok azonban mind rendelkeznek valamilyen hátránnyal, és legtöbbjük mellékhatásokat okoz, emiatt rendszeres használatuk nem megengedett az ember- és állatgyógyászat területén. Hunter és munkatársai ismertették a nemionos blokk-polimerek használatát vakcinában [R. Huntér, F. Strickland és F. Kézdy: J. Immunol. 123(3), 1244-1250 (1981); H. Snippe, MJ. de Reuver, F. Strickland, J.M.N. Willers és R.L.Hunter: Int. Archs. Allergy appl. Immunoi. 65,390-398 (1981); R.L. Hunter és B. Bennett: J. Immunoi. 133, 3167- 3175(1984)]. A fenti blokk-polimerek nemionos felületaktív anyagok, amelyek poli(oxi-propilén)-alapú központi hidrofób részből és poli(oxi-etilén)-alapú hidrofil végekből (úgynevezett normál blokk-polimerek), vagy poli(oxi-etilén)-alapú hidrofil központi részből és poli(oxi-propiIén)-alapú hidrofób végekből (úgynevezett fordított blokk-polimerek) épülnek fel. A fenti polimerek az (I), illetve (II) általános képlettel jellemezhetők, a képletekben a és c, vagy d és f kívánt esetben azonos lehet, és átlagos molekulatömegük 1000 és 16000 D közötti. A fenti úgynevezett triblokk-kopolimerek mellett Hunter és Bennett ismertették az úgynevezett TetronicR (gyártó: Pechiney, Nagy-Britannia) poliolok használatát is, blokk-polimer felületaktív anyagként (1984). A fenti polimereket oktablokkkopolimereknek is nevezik, és négy poli(oxi-propilén)- vagy poli(oxi-etilén)-láncot tartalmazó magból állnak, amelyhez a négy végen poli(oxi-etilcn)-, illetve poli(oxi-propilén)-láncok kapcsolódnak. A fenti vegyületeket T-típusú polioloknak nevezik. A 3 308 458 számon közzétett német szövetségi köztársaságbeli szabadalmi leírásban is ismertetik poli(oxi-propilén)-poli(oxi-etilén) poliolok használatát, olajmentes adjuvánsként. Azonban kiderült, hogy noha ezek az adjuvánsok elvileg megfelelőek abból a szempontból, hogy embernek és állatnak biztonságosan adhatók, viszont adjuváns hatásuk lényegesen kisebb, mint például a Freund-féle adjuvánsé. A találmány célja olyan olajmentes adjuváns 1 elegy létrehozása volt, amely hatásosabb mint a fenti ismert, csak poli(oxi-propilén)-poli(oxi-etilén) blokk-polimereket tartalmazó elegyek. A találmány szerinti adjuváns elegy jellemzője, hogy poli(oxi-propilén)-poli(oxi-etüén) blokk-polimerek mellett legalább egy akrilsav-polimert is tartalmaz. Poli(oxi-propilén)-poli(oxi-etilén) blokk-polimerként megfelelnek például a Pluronic, Synperonic és Poloxamer márkanéven forgalomban levő polimerek (gyártó: BASF, NSZK; általános képlet: H0(C2H40)a(C3H60)b(C2H40)cH, ahol a-c és a:b-l:10-l:16). A poli(oxi-propilén)-poli(oxi-etilén) blokk-polimerek aránya az akrilsav-polimerekhez viszonyítva előnyösen 160:1 és 5:1 között van, különösen előnyösen körülbelül 16:1 a tömegarány. A fenti blokk-polimerekben a hidrofób részek aránya a hidrofil-részekhez a legfőbb meghatározója a fizikai állapotnak (folyékony, paszta vagy szilárd halmazállapotú anyag). Apoluronic-sorozatba tartozó vegyületek közül azok a megfelelőek, amelyek a folyékony-sorozatba (L. R vagy T), vagy a paszta-sorozatba (P) tartoznak, előnyösebbek azonban a folyékonyak. A folyékony-sorozatba tartozó Pluronic-vegyületek közül a Pluronic L 101, Pluronic L 121, Pluronic 25R1, Pluronic 3 ÍR 1, Pluronic TI 501 alkalmazhatók előnyösen. A találmány szerinti eljárással előállított vakcinákban a blokk-polimerek koncentrációja előnyösen körülbelül 0,1 -10 v%, még előnyösebben körülbelül 2,4-4,8 v% (vegyes%). Akrilsav-polimer alatt karbomereket, például karboxi-polimetilén- vagy karboxi-vinü-polimereket értünk. Előnyösen egy poliszachariddal keresztkötött, különösen előnyösen poli(allil-szacharóz)-zal keresztkötött poliakrilsavat használunk. A fenti poliakrilsavak tulajdonságait a molekulában jelenlevő karboxilcsoportok száma határozza meg. Akrilsavpolimerként például a Carbopol (gyártó: BJF. Goodrich Chemical Co., USA), Neocryl (gyártó: Polyvinyl Chemical Industries, USA) vagy Carboset (gyártó: B.F. Goodrich Chemical Co., USA) márkanéven forgalomban levő anyagok használhatók. Előnyösen egy Carbopol-sorozatba tartozó polimert, például Carbopol 934-et, Carbopol 907-et, Carbopol 910-et, Carbopol 940-et vagy Carbopol 941-et használunk. A találmány szerinti eljárással előállított vakcinákban az akrilsav-polimerek koncentrációja előnyösen 0,01-2 v%, még előnyösebben 0,015-0,5 v% Mint említettük, a találmány szerinti adjuváns elegy különösen olyan vakcinák előállítására alkalmas, amelyek nem élő antigén-anyagot tartalmaznak. Ezek például elölt patogének vagy azok immunogén frakciói (alegységei) lehetnek. A patogén például vírus, baktérium, vagy parazita lehet. Ezeket kémiai vagy fizikai eszközökkel ölhetjük el. Az elölés a leírásban inaktiválást jelent, például a genetikai anyagban létrehozott változással és/vagy egyéb létfontosságú összetevőben létrehozott változással, aminek következtében patogén nem képes többé szaporodni. A patogének elölésére 2 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 2
