201956. lajstromszámú szabadalom • Eljárás szteroid-5alfa reduktáz inhibitorok és hatóanyagként ezeket tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
HU 201956 B II. Táblázat folytatása Humán prosztata-szteroid 5a-reduktáz gátlási konstansai 11 Vegyület IQ (mmól/1) (22) képletű vegyület 35 (23) képletű vegyület 790 (24) képletű vegyület 170 (25) képletű vegyület 110 Néhány, a találmány szerint előállított vegyület in vivo hatásosságát is megvizsgáltuk szteroid 5areduktáz aktivitás gátlására. Hím, Charles River CD törzsbe tartozó, 48 napos, közelítőleg 200 g testtömegű patkányoknak 10 mg/kg N,N-diizopropil-androszt-3,5-di6n-17ß- karboxamid-3-karbonsav propilén-glikolban készült és normál sóoldatban hígított oldatát adjuk be. A vegyület beadagolását követően az állatokat leöljük, a ventrális prosztatákat kimetsszük, és a DHT szintet a következő eljárással mérjük. A prosztata szövetet kimetsszük, körülvágjuk, mérjük, aprítjuk, majd foszfátpufferrel mossuk. A szövetet ezután foszfátpufferben homogenizáljuk és etil-acetát hozzáadásával, orbitális keverővei 45 percig végzett keverés mellett extraháljuk, az etilacetátot lepároljuk, a visszamaradó anyagot etanolban felvesszük, centrifugáljuk és 0,45 p.mól/1 szűrőpapír alkalmazásával szűrjük. A komponenseket ezután fordított fázisú nagynyomású folyadékkromatográfiás eljárással elkülönítjük, a DHT szinteket ezután standard eljárásokkal, például radioimmun vizsgálattal határozzuk meg. A vegyülettel kezelt patkányok prosztata DHT szintje a vegyület beadását követő 4 óra múlva a hordozóanyaggal kezelt állatokban mért szinthez képest 40%-kal csökkent. A csökkent DHT szinteket az adagolást követően több mint 8 órán át észleltük, és a kontroll szintjére a DHT érték csak 24 óra után tért vissza. A fenti vegyület metil-észterének egyszeri 10 mg/kg dózisban való beadása a prosztata DHT szintet 6 óra elteltével a hordozóanyaggal kezelt kontrolihoz képest 48%-kal csökkentette. így, bár ez a vegyület a szteroid 5a-reduktázt in vitro nem gátolja, e vegyület in vivo adagolása jelentős enzimgátlást eredményez. Megvizsgáltuk az N,N-diizopropil-androszt-3,5- diön-17ß-karboxamid-3-karbonsav prosztatanövekedésre kifejtett hatását is. A vegyület 14 napon át 0,5-50 mg/kg dózisban naponta kétszer orálisan adtuk be kifejletlen patkányoknak, így a prosztatanövekedés dózis-függésének csökkenését váltottuk ki. Az állatok prosztatanövekedése a maximális dózis alkalmazása esetén 40-50%-kal kisebb, mint a kontrolié. A fentihez hasonló eljárással in vivo vizsgáltuk a 17ß-N-terc-butil-karboxamid-androszta-3,5- dién- 3-karbonsav hatását. A patkányoknak napi egyszeri orális dózisban hordozóanyagot, illetve 5, 10, 20 vagy 50 mg/kg fenti vegyületet adagoltunk. A prosztata dihidrotesztoszteron szintje valamennyi dózisnál jelentősen csökkent, körülbelül a kontroll 50%ára, míg a tesztoszteron szint változatlan maradt. Ugyancsak a fenti vegyületet adtuk 10 mg/kg dózisban patkányoknak és vizsgáltuk a prosztata tesztoszteron és dihidrotesztoszteron szintjét 24 órán belüli különböző időpontokban. A dihidrotesztoszteron szintek jelentősen csökkentek közelítőleg a kontroll 60%-ára, ez a csökkenés a vegyület adagolásától számított 2-18 óra időszakban minden időpontban észlelhető volt, a szintek a kontroll értékre a kezelést követő 24 óra múlva estek vissza. A prosztata tesztoszteron szintekben következetes trendeket nem észleltünk. Adagoltuk továbbá a fenti vegyületet patkányoknak, naponta kétszer 2 héten át 1, 5,10, 25, illetve 50 mg/kg dózisban, annak meghatározására, hogy az ismételt kezelés okoz-e a ventrális prosztata tömegében csökkenést. A ventrális prosztata tömege a kontroliénak 90%-a 5 mg/kg dózis adagolásakor, és 65%-a 10 és 50 mg/kg dózis adagolásakor. Az ondóhólyag tömege minden kezelési szintnél jelentősen csökkent. Az (I) általános képletű vegyületeket különféle kiszerelési formákra alakíthatjuk, készíthetünk például kapszulákat, tablettákat vagy injektálható készítményeket belőle. A készítmények előállításához szilárd vagy folyékony, gyógyászati célra alkalmas hordozóanyagokat használunk. Ilyen szilárd hordozóanyagok például a keményítő, laktóz, kalciumszulfát-dihidrát, magnezit, szacharóz, talkum, zselatin, agar, pektin, akácmézga, magnézium-sztearát és sztearinsav. Megfelelő folyékony hordozóanyagok például a szirup, a földimogyoróolaj, az olívaolaj, a sóoldat és a víz. A hordozó- vagy hígítóanyag tartalmazhat valamely hatást elnyújtó szert, például glicerin-monosztearátot vagy gÜcerin-disztearátot önmagában vagy viasszal együtt. A szilárd hordozóanyag mennyisége széles tartományban változik, előnyösen 25 mg és 1 g közötti dózisegységenként. Ha folyékony hordozóanyagot alkalmazunk, a készítményt szirup, elixir, emulzió, lágy zselatinkapszula, steril injektálható folyadék, például ampulla vagy vizes vagy nemvizes folyékony szuszpenzió formára szereljük ki. A gyógyászati készítményeket a gyógyszerkészítésben ismert szokásos eljárások szerint készítjük, olyan műveleteket alkalmazunk, mint például a keverés, granulálás, préselés, kívánt esetben tablettává formálás vagy keverés, töltés és az alkotóelemek oldása a szükségnek megfelelően, így a kívánt orális vagy parenterális készítményeket állítjuk elő. Az (I) általános képletű vegyületeket tartalmazó dózisegységeket hatásos, nemtoxikus dózisban adagoljuk, az alkalmazott tartomány 0,1-1000 mg/kg hatóanyag, előnyösen 1-100 mg/kg hatóanyag. A beadni szánt dózist a szteroid 5a-reduktáz gátlására szoruló embernek napi l-ő alkalomra elosztva, helyileg, orálisan, rektálisan, injektálással vagy folyamatosan infúzió formájában adjuk be. Az orális adagolásra szolgáló dózisegységek szakember számára előnyösen 1-500 mg hatóanyagot tartalmaznak. Parenterális adagolásra alacsonyabb dózisok előnyösek. Alkalmazható azonban orálisan adagolva magasabb dózis is, ha a beteg biztonsága és a célszerűség ezt megkívánja. A találmány szerint előállított (I) általános kép-12 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 7
