201954. lajstromszámú szabadalom • Eljárás gyógyhatású nukleozidok előállítására
HU 201954B likagél, 2,5x30 cm, kloroform/metanol- 97/3), majd liofilizálás után 0,3 g cím szerinti vegyületet nyerünk 0,4 hklrátja formájában, op.: 95 °C, részlegesen 75 “C. Elemanalízis a Ci 1H16N6O2.0,4 H2O összegképletű vegyületre: számított: C: 48,66, H: 6,24, N: 30,95%, mért: C: 48,57, H: 6,27, N: 30,77%. 36. példa 2-Amino-6-n-propoxi-purin-9-béta-2\3’-dide zoxi-ribof uranozid 1,21 g (1,1 mmól) 2-amino-6-n-propoxi-purint (előállítása: 2-amino-6-klór-purinból nukleofil helyettesítéssel, amikor a klóratomot nátrium-hidridből és n-propanolból nyert alkoxi-anionnal cseréljük le) és 0,293 g (1,3 mmól) 3’-dezoxi-timidint 100 ml 10 mmólos kálium-foszfát pufferban szuszpendálunk (pH- 7, 0,04% kálium-azid), majd hozzáadunk 28801.U. tisztított purin-nukleozid-foszforilázt és 12001.U. timidin-foszforilázt és a keveréket 33 ”C hőmérsékleten 48 órán át keverjük. A reakciókeveréket AG1-X2 (OH-forma) töltetű oszlopra adagoljuk (2,5x5 cm), 90%-os vizes metanollal eluáljuk és az oldószert vákuumban eltávolítjuk, majd a visszamaradó anyagot flash-kromatografáljuk (szilikagél, 2,5x30 cm, kloroform/metano!= 9/1). Liofilizálás után 0,132 g cím szerinti vegyületet nyerünk, 0,2 hidrát formájában, op.: 70 °C. Elemanalízis a C13H19N5O3.0,2 H2O összegképletű vegyületre: számított: C: 52,29, H: 6,59, N: 23,59%, mért: C: 52,52, H: 6,62, N: 24,49%. 37. példa 6-(Benzü-amino)-purin-9-béta-2’,3’-didezoxiribofuranozid 1 g (4,44 mmól) 6-(benzil-amino)-purint (Sigma Chemicals Co., St. Louis MO) és 1 g (4,4 mól) 3’-dezoxi-timidint 50 ml 15 mmólos kálium-foszfátban szuszpendálunk (pH- 7,2), hozzáadunk 2000 I.U. tisztított purin-nukleozid-foszforilázt és 7900 I.U. timidin-foszforilázt, majd a reakciókeveréket 25 ”C hőmérsékleten keverjük. 1 óra elteltével 6 ml diglimet adunk a keverékhez és a keverést 37 °C-on 6 napon át folytatjuk. Ezután a keveréket szűrjük, a pH- értékét ammónium-hidroxiddal 10,5-re beállítjuk, AG1-X2 töltetű oszlopra adagoljuk (2x6 cm), és a terméket 30%-os vizes propanollal eluáljuk. A terméket ezután P-2 oszlopon kromatografáljuk (2,5x90 cm) 30%-os vizes propanollal eluáljuk, majd liofilizáljuk, amikoris 0,063 g cím szerinti vegyületet nyerünk 0,5 hidrát formájában, op.: 65 °C. Elemanalízis a C17H19N5O2.0,5 H2O összegképletű vegyületre: számított: C: 61,06, H: 6,03, N: 20,94%, mért: C: 61,29, H: 6,21, N: 20,69%. 38. példa 6-(Izopropoxi)-purin-9-béta-2’,3’-didezoxi-rib ofuranozid 0,5 g (2,8 mmól) 6-(izopropoxi)-purint (Sigma Chemicals Co„ St. Louis MO) és 0,95 g (4,2 mmól) 3’-dezoxi-timidint reagáltatunk, majd a 18. példában leírtak szerint kromatografáljuk. A terméket 21 tartalmazó frakciókból az oldószert vákuumban eltávolítjuk, a visszamaradó anyagot 30%-os vizes propanolban oldjuk, G-10 töltetű oszlopon kromatografáljuk (5x90 cm), 30%-os vizes propanollal eluáljuk és a visszamaradó gumiszerű anyagot acetonban oldjuk. Liofilizálás után 0,313 g cím szerinti vegyületet nyerünk, amely 0,2 vizet és 0,2 acetont tartalmaz, op. 75 °C. Elemanalízis a C13H18N4O3.0,2 C3H6O . 0,2 H2O összegképletű vegyületre: számított: C: 55,65, H: 6,73, N: 19,09%, mért: C: 55,65, H: 6,59, N: 19,12%. 39. példa 6-(n-Propü-amino)-purin-9-béta-2\3’-didezox i-ribofuranozid 0,5 g (2,81 mmól) 6-(n-propü-amino)-purint (Sigma Chemicals Co., St. Louis MO) és 0,957 g (4,26 mmól) 3’-dezoxi-timidint reagáltatunk, majd a 18. példában leírtak szerint kromatografálunk, kivéve, hogy az 5 ml dimetü-szulfoxidot további 5 ml N,N-dimetü-formamiddal helyettesítjük, A terméket tartalmazó frakcióból az oldószert vákuumban eltávolítjuk, a visszamaradó anyagot flash-kromatografáljuk (szüikagél, 3x50 cm, kloroform/metanol- 9/1, amikoris liofüizálás után 0,499 g cím szerinti vegyületet nyerünk, amely 0,7 mól vizet tartalmaz. Elemanalízis a C13H19N5O2.0,7 H2O összegképletű vegyületre: számított: C: 53,85, H: 7,09, N: 24,15%, mért: C:53,93,H:7,08,N:24,18%. 40. példa 6-(Ciklohexü-amino)-purin-9-béta-2’,3’-didez oxi-ribof uranozid 1 g (5 mmól) 6-(cüohexü-amino)-purint (előállítása: 6-ldór-purinból és cildohexü-aminból) 2,07 g (9,1 mmól) 3’-dezoxi-timidint 25 ml 2-metoxi-etU- éterben és 500 ml 10 mmólos kálium-foszfát pufferban oldunk (pH- 7,2), hozzáadunk 5000 I.U. tisztított purin-nukleozid-foszforilázt és 38501.U. timidin-foszforilázt és a keveréket 37 "C hőmérsékleten 7 napon át keverjük. Ezután a keveréket XAD-2 töletű oszlopra adagoljuk, vízzel jól átmossuk és 90%os vizes metanollal eluáljuk. AzUV abszorbciót mutató frakciókat összegyűjtjük, AG1-X2 (OH-forma) töltetű oszlopra adagoljuk (2x12 cm), majd 30 %-os vizes metanollal eluáljuk. A terméket ezután P-2 töltetű, majd G«-10 töltetű oszlopon (2,5x90 cm, ill. 2,5x90 cm) kromatografáljuk, mindkét oszlopot 30%-os vizes propanollal eluáljuk. Liofüizálás után 0,093 g cím szerinti vegyületet nyerünk, op. 70-72*C. Elemanalízis a C16H23N5O2 összegképletű vegyületre: számított: C: 60,55, H: 7,30, N: 22,07%, mért: C:60,37,H:7,39,N:21,94%. 41. példa 6-(Metil-amino)-purin-9-béta-2\3’-didezoxi-r ibofuranozid 1 g (4,31 mmól) 6-(metü-amino)-purint (Sigma Chemicals Co., St. Louis MO) és 1 g (4,4 mmól) 3’dezoxi-timidint 50 ml 10 mmólos kálium-foszfát pufferban (pH- 7,0,04% kálium-azid) szuszpendá-22 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 12
