201954. lajstromszámú szabadalom • Eljárás gyógyhatású nukleozidok előállítására
HU 201954B számított: C: 56,49, H: 5,50, N: 21,96%, mért: C: 56,50, H: 5,53, N: 21,97%. 29. példa 6-(Benzil-tio)-purin-9-béta-D-2’,3’-didezoxi-ri bofuranozid 0,501 g (2,07 mmól) 6-benzil-tio-purint (Sigma Chemicals Co., St. Louis MO) és 0,704 g (3,14 mmól) 3’-dezoxi-timidint reagáltatunk és AG1-X2 (OH-forma) töltetű oszlopon a 18. példában leírtak szerint kromatografáljuk azzal az eltéréssel, hogy a purin-bázist 10 ml glimben oldjuk. A terméket tartalmazó frakciókból az oldószert eltávolítjuk, a visszamaradó anyagot flash-kromatográfiával tisztítjuk (szilikagél, 3x50 cm, kloroform/metanol- 95/5), a terméket etanolban oldjuk, majd liofilizáljuk. íly módon 0,304 g cím szerinti vegyületet nyerünk, amely 0,05 vizet és 0,05 etanolt tartalmaz, op.: 81-83 'C. Elemanalízis a C17H18N4O2.0,05 H2O . 0,05 C2H6O összegképletű vegyületre: számított: C: 59,43, H: 5,37, N: 16,21,5:9,28%, mért: C: 59,49, H: 5,38, N: 16,32, S: 9,30%. 30. példa 6-AniIino-purin-9-béta-D-2’,3’-didezoxi-ribof uranozid 0,5 g (2,37 mmól) 6-anilino-purint (Sigma Chemicals Co., St. Louis MO) és 0,752 g (3,32 mmól) 3’dezoxi-timidint reagáltatunk, majd a 18. példában leírtak szerint AG1-X2 gyantán (OH-forma) kromatografálunk, majd az oldószert a terméket tartalmazó frakcióból eltávolítjuk és a visszamaradó anyagot flash-kromatografáljuk (szilikagél, 2,5x50 cm, kloroform/metanol- 5/5). Liofilizálás után 0,470 g cím szerinti vegyületet nyerünk 0,05 hidrát formájában, op.: 170-172 °C. Elemanalízis a C16H17N5O2.0,05 H2O összegképletű vegyületre: számított: C: 61.55, H: 5,52, N: 22,43%, mért: C: 61,57,H: 5,55,N: 22,43%. 31. példa 2-Amino-6-etoxi-purin-9-béta-D-2’,3’-didezo xi-ribofuranozid 0,5 g 2-amino-6-etoxi-purint (előállítása: 2-amino-6-klór-purinból /Aldrich Chemical Co., Milwaukee WI/, oly módon, hogy a klóratomot a nátriumhidrid és etanol reagál tatásával nyert alkoxi-anionnal helyettesítjük) és 0,950g (4,19 mmól) 3’-dezoxitimidint reagáltatunk, majd a 18. példában leírtak szerint AG1-X2 és XAD-2 töltetű oszlopon kromatografálunk A terméket tartalmazó frakcióból az oldószert elpárologtatjuk, a visszamaradó anyagot flash-kromatografáljuk (szilikagél, 5 x 20 cm, kloroform/metanol - 9/1), majd a terméket liofilizáljuk. íly módon 0,443 g cím szerinti vegyületet nyerünk, amely 0,3 hidrátot tartalmaz, op.: 150 °C, egy része 65 ”C. Elemanalízis a C12H17N5O3.0,3 H2O összegképletű vegyületre: számított: C: 50,63, H: 6,23, N: 24,60%, mért: C: 50,77, H: 6,21, N: 24,63%. 32. példa 19 2,6,8-Triamino-purin-9-béta-D-2\3,-<iidezoxi-ribofuranozid 0,5 g (3 mmól) 2,6,8-triamino-purint (Davies, R., és munkatársai, Biochim. Biophys, Acta, 564(3), 448, 1979) és 1,02 g (4,5 mmól) 3’-didezoxi-timidint reagáltatunk, majd a 18. példában leírtak szerint kromatografálunk Liofilizálás után 0,148 g cím szerinti vegyületet nyerünk, amely 0,7 metanolt tartalmaz, op.: 154 °C, Elemanalízis a C10H15N7O2.0,7 CH4O összegképletű vegyületre: számított: C: 44,76, H: 6,24, N: 34,08%, mért: C: 44,51, H: 5,95, N: 33,78%. 33. példa 2-Amino-ó-(benzü-amino)-purin-9-béta-D-2\ 3’-didezoxi-ribofuranozid 0,2 g (0,8 mmól) 2-amino-6-(benzü-amino)-purint (előállítása: 2-amino-6-klór-purinból /Aldrich Chemical Co., Milwaukee WI/ oly módon, hogy a klóratomot nukleofü helyettesítéssel benzil-aminra cseréljük) és 3’-dezoxi-timidint (0,282g, 1,2 mmól) reagáltatunk, majd a 18. példában leírtak szerint kromatografálunk, kivéve, hogy kisebb mennyiségű purin-nukleozid-kfoszforilázt (10.000 LU.) és timidin-foszforilázt (5.000LU.) alkalmazunk Liofüizálás után 0,182 g cím szerinti vegyületet nyerünk, amely 0,6 metanolt tartalmaz, op.: 92-94 °C. Elemanalízis a C17H20N6O2.0,6 CH4O összegképletű vegyületre: számított: C: 58,78, H: 6,28, N: 23,37%, mért: C: 58,60, H: 6,06, N: 23,48%. 34. példa 2-Amino-6-(ciklopropü-amino)-purin-9-béta- D-2’,3 ’-didezoxi-ribof uranozid 0,495 g (2,1 mmól) 2-amino-6-(ciklopropü-amino)-purint (előállítása: 2-amino-6-klór-purinból oly módon, hogy a klóratomot nukleofü helyettesítéssel ciklopropü-aminnal cseréljük le) és 3’-dezoxi-timidint (0,73 g, 3,2 mmól) reagáltatunk, majd a 18. példában leírtak szerint kromatografálunk. Liofilizálás után 0,419 g cím szerinti vegyületet nyerünk, 0,3 hidrát-tartalommal, op.: 82-84 ‘C. Elemanalízis a C13H18N6O2.0,3 H2O összegképletű vegyületre: számított: C: 52,80, H: 6,34, N: 28,42%, mért: C: 52,83, H: 6,35, N: 28,44%. 35. példa 2-Amino-6-(metü-amino)-purin-9-béta-D-2’,3 ’-didezoxi-ribofuranozid 0,5 g (3 mmól) 2-amino-6-(metü-amino)-purint (előállítása: 2-amino-6-klór-purinból nukleofü helyettesítéssel, amikor a klóratomot metü-aminra cseréljük) és 0,893 g (3,9 mmól) 3’-dezoxi-timidint 100 ml 10 mmólos kálium-foszfát pufferban szuszpendálunk (pH- 6,8, 0,04% kálium-azid), hozzáadunk 28801.U. tisztított purin-nukleozid-foszforilázt és 12001.U. timidin-foszforilázt és a keveréket 33 °C hőmérsékleten 72 órán át keverjük, majd AG1-X2 (OH-forma) töltetű oszlopra adagoljuk (2,5x10 cm) és a terméket 90%-os vizes metanollal eluáljuk. Az oldószert vákuumban eltávolítjuk, a visszamaradó anyagot flash-kromatografáljuk (szi-20 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 11
