201944. lajstromszámú szabadalom • Eljárás izoxazolo-azepin-származékok és ilyen hatóanyagot tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
15 HU 201944 B 16 14. példa (Ic) képletű 2,6-dialkil-2,3,4,5,7,8-hexahidro-3-oxo- 6H-izoxazolo[4,5-d]aze pin (2,6- diáik il-THAZ) előállítása Valamely (Ib) képletű vegyületet és ekvimoláris mennyiségű, vagy csekély feleslegű vízmentes kálium-karbonátot valamilyen aprotikus oldószerben, például acetonitrilben vagy tetrahidrofuránban ekvimoláris mennyiségű megfelelő alkil-halogenid ugyanazon oldószerrel készített elegyével reagáltatunk. A kapott elegyet 1-24 óra hosszat visszafolyatás közben forraljuk, majd szűrés után a szűrletet vákuumban bepároljuk. A maradékot vagy egy alkalmas oldószerből átkristályositjuk, így 2,6-dialkil-THAZ szabad bázist kapunk, vagy etanolos sósavval vagy egy szerves savval, például fumársavval vagy maleinsavval történő reagálta tás útján a megfelelő sókat állítjuk elő. A fenti általános előállítási eljárással bevezetett 6-alkil-csoport rövidszénláncú alkilcsoport lehet. 15. példa Az elektromos sokk indukálta amnézia kivédésének vizsgálata a passzív kiküszőbőlési reakció kapcsán A passzív kiküszőbőlési reakció vizsgálata során a patkányokat arra szoktattuk, hogy láb-sokk elkerülésére ne változtassák helyüket. Két kontroli-csoportot alkalmaztunk: az egyik csoport csak vivőanyagot kapott és elektromosan sokkoltuk őket, a másik csoport is csak vivőanyagot kapott, de elektromos sokkolást nem alkalmaztunk. Tréning - 1. nap Az állatokat először aurikuláris elektródákkal láttuk el és a biztonságos területen helyeztük el őket. Azokat az állatokat, amelyek 60 másodpercen belül elhagyták a lemezt, azonnal 1,0 mA árammal 2 másodpercig láb-sokkot kaptak, majd 3 másodperc pihenés után elektromosan sokkoltuk őket, azonnal kivettük őket a vizsgálati kamrából és viszszahelyeztük ketrecükbe. Azokat a patkányokat, amelyek a láb-sokk vagy a pihenési idő alatt vissza akartak mászni a lemezre, azonnal elektromos sokkot kaptak, majd kivettük őket a teszt-kamrából. Ugyanigy kezeltük a sokkot nem kapott kontroli-állatokat is. Azokat az állatokat, amelyek 60 másodpercen belül nem másztak le a lemezről, visszatettük a ketrecükbe és nem használtuk ezeket a vizsgálathoz. Azokat a patkányokat, amelyek 5 másodpercen belül léptek le a lemezről, szintén eltávolitottuk a vizsgálatból. 2. nap - a vizsgálat értékelése 21 óra elteltével az állatokat a passzív kiküszőbőlési reakció késleltetése szempontjából újra vizsgáltuk. Az állatokat egyedenként elhelyeztük a vizsgálati lemezen és feljegyeztük a látens időket. Azokat az állatokat, amelyek 120 másodpercig maradtak a lemezen, amnéziásnak tekintettük. Az eredményeket százalékosan határoztuk meg és a szignifikanciát statisztikai módszerekkel értékeltük ki. A frakciókat az alábbi képlet segítségével kaptuk meg: visszatartott állatok száma vizsgált állatok száma A százalékos eredményeket az elektromos sokkot nem kapott kontroll vizsgálat százalékában fejeztük ki az alábbi képlet segítségével: visszatartott állatokX------------------------------------ x 100 elektromos sokkot nem kapott, visszatartott állatokX A vegyületet akkor tekintjük aktívnak ebben a tesztben, ha a legalább egy dóziscsoportból kapott retenciós pont szignifikánsan nagyobb, mint az elektromos sokkot kapott kontroli-csoport retenciója és nem különbözik szignifikánsan az elektromos sokkot nem kapott kontroli-csoportétól, a közepes aktivitású anyagok eredményei statisztikusan mindkét kontroli-csoportéitól különböznek, azonban nem adnak teljes védelmet az amnéziával szemben. A 3. táblázat a kiválasztott (I) általános képletű vegyületek biológiai aktivitását mutatják a 15. példában ismertetett vizsgálat során. 3. táblázat (I) általános képletű vegyületek biológiai aktivitásának vizsgálata az elektromos sokk indukálta amnézia kivédésére a passzív kiküszőbölési reakció kapcsán Példa száma, elnevezés Elektromos sokk indukálta amnézia kivédése pramiracetám aktív 10 mg/kg (referencia szubkután vegyület) 6) 3-metoxi-5,6,- aktiv 1 mg/kg 7.8- tetrahid- per os ro-4H-izoxazolo[4,5-d]azepin-hidroklorid 7) 2-metil-2,3,4- aktív 10 mg/kg 5.7.8- hexahid- per os ro-3-oxo-6H-izoxazoloí 4,5- d ]azepin-hidrobromid 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 10
