201770. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új 4,5,7,8-tetrahidro-6H-tiazolo[5,4-d]azepinek és az ezeket tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
HU 201770 B (Canberra Packard cég) határozzuk meg folyadéksztincillációs méréssel. A nem-specifikus kötődést 10'5 mól haloperidol (Sigma Chemical Co.) jelenlétében határoztuk meg. 5 Adatelemzés: A mért adatokból a TOPFIT programcsomag [G. Heinzel: „Pharmacokinetics During Drug Development: Data Analysis und Evaluation Techniques”, G. Bozler és J. M. van Rossum Eds., G. 10 Fischer Verlag, Stuttgart 1982, 207] segítségével kapunk elnyomási görbéket. Az anyagok a radioligandot agonistákra tipikus bifázisos módon nyomják el; a megadott D2-Ki-értékek [Ki= ICso:(l + Cl/Kl), ahol Cl és Kl a 15 hozzáadott radioligand koncentrációját, illetve disszociációs állandóját jelentik; lásd Cheng és Prusoff, Biochem. Pharmacol. 22, 3099 (1973)] a dopamin-receptor nagyaffinitású formájára vonatkoznak. 20 2. a2-receptorokhoz való affinitás meghatározása [3H]-clonidinnel végzett elnyomási kísérletekkel. [B. Jarott, W. J. Louis és R. J. Summers, Bio- 25 chem. Pharmacol. 22,141 (1979) módosított módszere]. Membránpreparálás: Egy hím patkányt (Chbb: Thom törzs; kb. 200 g) tarkóütéssel leölünk. Az agyat eltávolítjuk, és a 30 kérget kipreparáljuk, lemérjük és 25 térfogat triszpufferban (50 mmól trisz.HCl; pH = 7,50) Ultra- Turraxon maximális sebességnél 30 másodpercig, 13 majd 10 menetben Potter-Elvehjem homogenizátorban 1400 fard./perc-nél homogenizáljuk. A homogenizátum trisz-pufferral l:50-re (a kéreg súlyára számítva) hígítjuk. Kötődésvizsgálat: A membránpreparátum 1 ml-es aliquotjait 1-1 ml 1 mmól [3H]-clonidint (2,2 TBq/mmól: DuPont NEN cég) növekvő koncentrációjú (10' -tői lO"4 mólig) vizsgálati anyagot tartalmazó oldattal szobahőmérsékletre 3 óra hosszat inkubáljuk. Az inkubálást 5 ml jéghideg trisz-puffer hozzáadásával és Whatman GF/B-szűrőn át való szűréssel fejezzük be. A szűrőt kétszer mossuk 5-5 ml jéghideg pufferral. A szűrő radioaktivitását Instager^-ben (Canberra Packard cég) folyadékszcintillációs méréssel határozzuk meg. A nem-specifikus kötődést 10'5 mól oximetazolin (sigma Chemical Co.) jelenlétében állapítjuk meg. Adatelemzés: A mért adatokból a TOPFlT-programcsomag [G. Heinzel: „Pharmacokinetics During Drog Development: Data Analysis and Evaluation Techniques”, G. Bozldr és J.M. van Rossum Ends., G. Fischer Verlag, Stuttgart 1982, 207] segítségével kapunk elnyomási görbéket. A következő I. táblázatban a találmány szerinti vegyületek D2-Ki-értékeit és a2-IC50-értékeit soroljuk fel. Az ct2-IC5o/D2-Ki hányados egy mérőszámot jelent valamely anyagnak a2-adrenoreceptorokhoz viszonyított dopamin-D2-receptorokhoz való relatív affinitására. Minél nagyobb ez a mérőszám, annál magasabb a D2/a2-szelektivitás. 14 I. Táblázat Vegyület (példa száma) D2-Ki [mmól] ct2-IC50a2-IC50/ [mmól] /D2-Ki 3a 7 620 88 3b 24 810 145 4d 10 890 89 4e 3 190 63 4g 2 240 120 4i 13 2050 157 4o 1,3 550 423 4p 0,89 89 100 4t 3,1 460 14,8 4u 6,9 2200 318 4v 8 2300 287 4w 3 2200 733 4y 0,73 300 410 4z 8,4 3800 452 7a 0,92 3100 3370 8n 15 2000 133 8o 14 3300 235 9 6,7 530 79 10 17 15000 882 11a 4,3 760 176 Ili 2,6 1500 576 111 3,2 820 256 llp 9,9 3000 303 12b 4,4 2000 450 14b 2,6 500 192
