201541. lajstromszámú szabadalom • Eljárás epipodofillotoxin és ezzel rokon daganatellenes szerek köztitermékeinek előállítására
1 HU 201541 B 2 a diasztereomer sók keverékét, a diasztereomer sókat szétválasztjuk, és a szétválasztott sókat a szabad vegyületekké alakítjuk. A lehetséges enantiomer formákat ugyancsak elválaszthatjuk egymástól optikailag aktív töltetű HPLC oszlopokon történő frakcionálással. A találmány szerinti megoldást a következő nemkorlátozó példákkal szemléltetjük. A példáiban a hőmérsékletet Celsius-fokokban adjuk meg. A nem korrigált olvadáspontokat Thomas- Hoover kapilláris készülékben határoztuk meg. Az 2 3HNMR spektrumokat kloroformban vettük fel Bruker WM 360 készüléken. A kémiai eltolódásokat deltaegységekben, a csatolási állandókat Hertz-ben adjuk meg. Az NMR- spektrum adatainál az alábbi rövidítéseket használjuk: s - szingulett, d - dublett, t - triplett, q - kvartett, m - multiplett, bp - széles csúcs, dd - dublett dublettje. Az infravörös spektrumokat Beckman Model 4240 spektrofotométerrel állapítottuk meg és cm'1 értékekben adjuk meg. A vékonyrétegkromatográfiát (TLC) szilikagél készrétegeken (60F- 254) végeztük, detektáláshoz UV fényt és/vagy jódgőzös előhívást alkalmazva. A pillanatkromatográfiát Woelm szilikagélen végeztük a feltüntetett oldószerekkel. Az oldószerek lepárlása valamennyi esetben csökkentett nyomáson történt. A Skellysolva B kifejezés alatt a petróleum 60-68 °C forráspontú frakcióját értjük, ami főleg n-hexánból áll. Az „éter” kifejezésen, ha másként nem utalunk rá, dietil-étert értünk. 1. példa A dl-(lalfa,2alfa,3béta,4béta)-l,2,3,4-tetrahidro-3- ciano-4- hidroxi-l-(3,4,5-trimetoxi-fenil)-naftalin-2- karbonsav (Xlg) előállításához (2. ábra) 2,00 g (0,43 mmól) (Xc) képletű klór- izoxazolint szuszpendálunk 100 ml metanolban. A szuszpenzióhoz körülbelül 0,5 cm3 Raney-nikkelt adunk és Parr készülékben rázatjuk 300 kPa nyomású hidrogéngázban 4 órán át. 50 mg platina-oxidot adunk a reakciókeverékhez és a rázatást tovább folytatjuk hidrogéngázban 2,5 órán át. A katalizátort kovafóldrétegen kiszűrjük és a szűrletet bepárolva 2 g szilárd anyagot nyerünk. A bepárlási maradék vékonyrétegkromatogramján (futtató: 20 % metanolt tartalmazó metilén-klorid) a kiindulási anyag mellett (Rp-0,53) két további komponens foltja jelenik meg Rf-0,30 (főtermék) és Rf=0,09 (melléktermék) értéknél. Az anyagot szilikagél oszlopra visszük és az Rf*=0,30 értéknél elmozduló főterméket metanol és metilén-klorid 1:5 arányúval elegyével eluáljunk. 0,9 g fehér szilárd anyagot nyerünk, amit metanolból átkristályosítva megkapjuk a kívánt vegyület analitikai mintáját. Op.: 245-246,5 °C (bomlik). Elemanalízis a C22H2NO8 képlet alapján: számított: C: 61,82; H: 4,95; N: 3,28 %; talált: C: 61,67; H: 4,94; N: 3,27 %. >H-NMR (CDCI3, delta): 3,35 (dd, 1H, 3,4 Hz, 12,4 Hz) 3,71 (dd, 1H, 12,5 Hz, 5,8 Hz), 3,74 (s, 6H), 3,78 (s, 3H), 4,55 (d, 1H, 5,7 Hz), 4,98 (d, 1H, 3,2 Hz), 5,94 (m, 2H), 6,11 (s, 2H), 6,41 (s, 1H), 6,86 (s, 1H). IR (KBr, nümax, cm'1): 3490, 2920, 2240, 1750, 1590, 1500, 1485, 1240, 1130, 1035. 2. példa A dl-(lalfa,2alfa,3béta,4béta)-l,2,3,4-tetrahidro-3- ciano-4- hidroxi-l-(3,4,5-trimetoxi-fenil)-naftalin-2-karbonsav előállításánál (3. ábra) kb. 1,0 cm3 Raney-nikkelt adunk 1,40 g (3,23 mmól) (Xc) képletű klór-izoxazolin-sav 200 ml metanolban készült szuszpenziójához és a szuszpenziót Parr készülékben rázatjuk 2 órán át hidrogéngázban, melyek kezdeti nyomása 350 kPa. A katalizátort kovaföldön kiszűrjük és az oldószert csökkentett nyomáson lepároljuk. A vizes oldatot 6n sósavval megsavanyítjuk és 10 % metanolt tartalmazó metilén- kloriddal extraháljuk. Az egyesített szerves extraktumot magnézium-szulfáttal szárítjuk és bepárolva 0,8 g (60 %-os termelés) amorf szilárd anyag alakjában megkapjuk a kívánt vegyületet. Az ‘H-NMR spektrum azonos az 1. példa termékének spektrumával. 3. példa A dl-(lalfa,2alfa,3béta,4béta)-l,2,3,4-tetrahidro-3- ciano-4- hidroxi-l-(3,4,5-trimetoxi-fenil)-naftalin-2- karbonsav-etilészter (Xlh) előállításához (0,106 g/0,2 mmól) (Xa) képletű észtert szuszpendálunk 20 ml etil-acetáttal telített víz és 5 ml metanol elegyében. Hozzáadunk 36 mg (0,6 mmól) bórsavat, majd kb. 0,1 cm3 Raney-nikkelt. A szuszpenziót Parr készülékben hidrogénezzük 300 kPa nyomáson 6 órán át. A vékonyrétegkromatográfiás vizsgálatok szerint (futtató: 5 % etil- acetát metilén-kloridban) a kiindulási (Xa) képletű észter mellett (Rp-0,61) egy új komponens is megjelenhet Rf-0,15 magasságban. A katalizátort kiszűrjük és a szűrletet szilárd maradékig pároljuk. Szilikagél oszlopon kromatografáljuk a terméket, eluensként 5 % és 10 % etil-acetátot tartalmazó metilén-kloridot használva. 54 mg szilárd amorf anyag alakjában jutunk a kívánt vegyülethez (Rf-0,15), amit 95 %-os etanolban átkristályosítjuk. Op.: 215— 216 °C. Elemanalízis a C24H25NO8 képlet alapján: számított: C: 63,29; H: 5,53; N: 3,08 %; talált: C: 63,16; H: 5,59; N: 3,02 %. JH-NMR (CDCI3, delta): 1,17 (t, 3H, 7,3 Hz), 2,62 (d, 1H, 4,4 Hz), 3,44 (dd, 1H, 3,3 Hz, 12,4 Hz), 3,74 (m, 1H), 3,74 (s, 6H), 3,80 (s, 3H), 4,06 (q, 2H, 7,1 Hz), 4,53 (d, 1H, 5,9 Hz), 5,07 (t, 1H, 3,8 Hz), 5,97 (dd, 2H), 6,03 (s, 2H), 6,42 (s, 1H), 6,85 (s, 1H). IR (KBr, nümax, cm'1): 3560, 2245, 1725, 1590, 1235, 1128. 4. példa A dl-(lalfa,2alfa,3béta,4béta)-l,2,3,4-tetrahidro-3- ciano-4- hidroxi-l-(3,4,5-trimetoxi-fenil)-naftalin-2- karbonsav-etilészter (Xlh) előállításához (5. ábra) 64 mg (0,12 mmól) (Xa) képletű észtert oldunk 5 ml száraz benzolban. Nitrogéngáz alatt 0,12 ml (0,45 mmól) tributil-ón-hidridet és 2 mg 2,2’-azo-bisz-izobutiro- nitrilt adunk az oldathoz. A reakciókeveréket 6 órán át forraljuk visszafolyatásos hűtő alatt, és szobahőmérsékleten kevertetjük egy éjszakán át. A reakciókeveréket csökkentett nyomáson bepároljuk és a bepárlási maradékot szilikagél oszlopon tisztítjuk, eluensként 5 % és 15 % etil-acetátot tartalmazó metilén-kloridot használva. A megfelelő frakciókat egyesítjük, csökkentett nyomáson bepároljuk, kinyerve a kívánt vegyületet, melynek 'H-NMR spektruma azonos a 3. példa termékének spektrumával. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 3
