201520. lajstromszámú szabadalom • Eljárás triciklusos aromás vegyületek és az ilyen hatóanyagot tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
1 HU 201520 B 2 közleményben leírt eljárással állítjuk elő: op. 78-79 °C (egyezik az irodalmi adattal). PMR spektrum (dimetil-szulfoxid-dö) delta-értékek: 7,89 (dublett, J = 2,2 Hz, 1H, Hí), 7,43-7,76 (multiple«, 5H, aromás H), 7,07 (dublett, J = 8,4 Hz, 1H, H4), 5,29 (szingulett, 2H, ArCH20), 3,74 (szingulett, 2H, ArCH2C02), 3,63 (szingulett, 3H, -CH3). Analízis a C17H14O4 képlet alapján: számított: C 72,63 %, H 5,00 %; talált: C 72,33 %, H 5,03 %. b) E/Z-ll-[3-(Dimetil-amino)-propilidén]-6,ll- dihidrodibenz[b,e]oxepin-2-ecetsav-hidroklorid Vízmentes 3-(dimetil-amino)-propil-trifenil-foszfónium-bromid-hidrobromidot 4,0 g (7,9 mmól) mennyiségben 21 mmól n-butil-lítium hexános oldatával és 1,8 g (6,1 mmól) 6,11-dihidro-ll-oxo-dibenz[b,e]oxepin-2-ecetsav-metilészterrel reagáltatunk 100 ml vízmentes tetrahidrofuránban, az 1. példa d) szakaszában leírt eljárással. A kapott reakcióterméket 10 ml 10 %-os nátrium-hidroxid-oldat és 90 ml metanol elegyében hidrolizáljuk, és így a cím szerinti E/Z-izomerelegyet kapjuk. A kapott izomerelegyet fordított fázisú PRP-1 fél-preparatív oszlopon kromatografáljuk víz és acetonitril 84:16 tf. - arányú elegyével, és így 0,05 g tiszta Z-izomert kapunk, világosbarna üvegszerű termék alakjában. PMR spektrum (CD3OD) delta-értékek: 7.27- 7,33 (multiple«, 4H, aromás H), 7,16 (dublett, J = 2,2 Hz, 1H, Hí), 7,07 (kettős dublett, J = 2,3, 8,3 Hz, 1H, H3), 6,77 (dublett, J = 7,8 Hz, 1H, H4), 5,64 (triple«, 1H, CH=), 5,16 (széles szingulett, 2H. ArCH20). 4,43 (szingulett, 2H, ArCT^CCH), 3,30 (multiplett, 2H, -NCH2-), 2,86 (szingulett, 6H, -NMe2), 2,70-2,80 (multiplett, 2H, CH2C=). További termékként 0,006 g tiszta E-izomert kapunk világosbarna üvegszerű termék alakjában. PMR spektrum (CD3OD) delta-értékek: 7.28- 7,45 (multiplett, 4H, aromás H), 7,24 (dublett, J = 2,1 Hz, 1H, Hí), 7.07 (kettős dublett, J = 2,2, 8,6 Hz, 1H, H3) 6,69 (dublett, J = 8,7 Hz, 1H, H4), 6,02 (triplett, 1H, CH=), 5,20-5,50 (széles szingulett, 2H, A1-CH2O), 3,43 (multiplett, 2H, ArCH2C02), 3,30 (multiplett, 2H, -NCH2-), 2,79 (szingulett, 6H, -NMe2), 2,65 (multiplett, 2H, CH2C=). Analízis a C2iH23NChxHCl képlet alapján: számított: C 67,46 %, H 6,47 %, N 3,75 %. talált (Z-izomer): C 67,24 %, H 6,75 %, N 3,69 %. a C2tH23N03x3/2 HClx3/2 H2O képlet alapján: számított: C 60,18 %, H 6,61 %, N 3,34 %; talált (E-izomer): C 60,26 %, H 6,22, N 3,02 %. 6. példa Aiuiliisztamin aktivitás A. In vitro antihisztamin aktivitás 250-400 g közötti testtömegű, hím, Hartley tengerimalacok érintetlen ileumából elkülönítettük a hosszirányú izmot, és szervfürdőbe helyeztük 300 mg feszítés mellett. Hagytuk, hogy 1 óra alatt egyensúly jöjjön létre, majd meghatároztuk a hisztaminnal szembeni kumulatív koncentráció - reagálás görbéket [Van Rossum. J.M., Arch. Int. Pharmacodyn. Then, 143, 299-330 (1963)]. Mosás után a szöveteket 1 órán át inkubáltuk a vizsgált vegyülettel, majd ismét meghatároztuk a hisztaminnal szembeni koncentráció- reagálás görbét. A primer izom koncentráció - reagálás görbéjétől jobbra történő, az antagonisták hatására bekövetkező eltolódásokat felhasználtuk Schild-füagvények felállítására [Arunlakshana, O. és Schild, H.O., Br. J. Pharmacol., 14, 48-58 (1959)]. A log (dr-1) regressziója log [B]-vel, ahol dr az azonos mértékű reagálás az antagonista jelenlétében és távollétében, [B] az antagonista mólkoncentrációja, lehetővé tette pAi meghatározását. pA2 az antagonista koncentráicójának negatív logaritmusa, amely kétszeres értékre tolja el az eredeti hisztamin koncentráció- reagálás görbét jobbra. 1. táblázat Antihisztamin aktivitás in vitro vizsgálatnál a (IIA’) képletű vegyületek származékainak felhasználásával Vegyület száma Vegyület pA3 . Doxepin1 9,7 1 Z-2-COOH 8,3 2 E-2-COOH 8,3 6 Z-8-COOH 6,7 7 E-9-COOH 9.2 8 Z-9-COOH 7,8 aA vizsgált Doxepin minta Z/E aránya 4:1 volt. B. In vivo antihisztamin aktivitás 300-350 g testtömegű, hím, Hartley tengerimalacokat 20 órán át köpi altattunk, majd perolrálisan vagy intraperitoneálisan beadtuk az állatoknak a vizsgált vegyületet. A vegyület beadása után 1 órával az állatok külön-külön egy-egy átlátszó műanyagkamrába helyeztük. A kamrákat telítettük és folyamatosan elláttuk 0,25 % hisztaminnal egy aeroszolporlasztóból. Megfigyeltük a tengerimalacokon a hisztaminnal szembeni allergiás reakció esetleges tüneteit (ilyenek például a következők: köhögés, tüsszentés, erős hasi mozgások, cianózis vagy a felállás képességének elvesztése). A vizsgálat körülményei között a kontroll csoportba tartozó állatok átlagosan 33 másodpercen belül összeestek. A hisztaminnal szembeni védelemre vonatkozó ED50 értékeket probitos analízissel számíttuk ki. Ennél a vizsgálatnál az ED50 értékek azt mutatják, hogy az illető dózisnál az állatok 50 %-a teljesen védve van a hisztamin behatásával szemben a vizsgálat időpontjában (1 órával a beadás után). Tökéletes védelemnek azt tekintettük, amikor 6 percig nem jelentkeztek a hisztamin behatásával kapcsolatos tünetek az aeroszol kamrában (ez az idő mintegy tízszerese a kontroll csoportba tartozó állatok öszszeeséséhez szükséges időnek). 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 8
