201475. lajstromszámú szabadalom • Eljárás folyékony inzulin-készítmények előállítására
HU 201475 B mények felszívódási tulajdonságait vizsgáljuk a humán Actrapid összehasonlító oldathoz viszonyítva, a 2-5. példában leírt módon. A 9. példában egy másik összehasonlító oldatot használunk, lásd alább. Egyszerűség kedvéért azonban az összehasonlítás eredményeit az R átlagérték formájában adjuk meg, amelynek jelentése: R = T5o% (vizsgált)/T5o% (összehasonlító), ahol T5o% (vizsgált) és T5o% (összehasonlító) azon, az injekció után eltelt időtartamokat jelentik, amely alatt a vizsgált készítmény és az összehasonlító készítmény esetében az injekció helyén mérhető radioaktivitás a kezdeti értékek felére csökken. 6. példa A vizsgált oldat: 0,14 mól/1 magnézium-szulfát, 0,05 mól/1 magnézium-klorid, 0,01 mól/1 magnézium-acetát, 0,002 mól/1 kalcium-klorid, 2 g/1 m-krezol, 100 nemzetközi egység/ml cinkmentes, humán, egykomponensű inzulin, plusz humán nyomjelző inzulin, az oldat pH-ját sósavval 5,7-re állítjuk be. A sertéseknek a vizsgált oldat és az összehasonlító oldat 0,04 ml térfogatú részleteit adjuk be injekció formájában. At R-érték: 0,73 (a vizsgált állatok száma: 6). 7. példa A vizsgált oldat: 0,02 mól/1 magnézium-klorid, 0,11 mól/1 arginin-monohidroklorid, 2 g/1 fenol, 100 nemzetközi egység/ml cinkmentes, humán, egykomponensű inzulin plusz nyomjelző inzulin; az oldat pH-ját nátrium-hidroxiddal 7,7-re állítjuk be. Minden egyes sertésnek a vizsgált oldat és az összehasonlító oldat 0,08 ml térfogatú részleteit adjuk be injekció formájában. Az R-érték: 0,74 (a vizsgált állatok száma: 2). 8. példa A vizsgált oldat: 0,095 mól/1 magnézium-klorid, 2 g/1 fenol, ml-enként 100 nemzetközi egységgel egyenértékű cinkmentes sertés monodezamido-inzuiin plusz nyomjelző származék; az oldat pH-ját sósavval 3,2-re állítjuk be. Minden egyes sertésnek a vizsgált oldat és az összehasonlító oldat 0,08 ml térfogatú részleteit adjuk be injekció formájában. Az R-érték: 0,71 (a vizsgált állatok száma: 2). 9. példa A vizsgált oldat: 0,095 mól/1 magnézium-klorid, 2 g/1 fenol, ml-enként 100 nemzetközi egységgel egyenértékű cinkmentes, humán inzulin-származék, ahol a B-lánc 9-es helyzetében levő szerint helyett aszparaginsav szerepel, továbbá a B-lánc 27-es helyzetében levő treonin helyett glutaminsav áll, plusz nyomjelző származék; az oldat pH-ját 7,4-re állítjuk be. Miután már korábban ismeretes volt (vesd össze a 83306721 számú európai szabadalmi bejelentéssel), hogy e származék - az Actrapidhoz hasonló készítménybe foglalva - gyorsabban felszívódik, mint a humán Actrapid, ezért a jelen példában leírt 13 kísérletben az összehasonlító oldat e származéknak az Actrapidhoz hasonló módon elkészített oldata, amely ml-enként 100 nemzetközi egységgel egyenértékű ilyen származékot tartalmaz. Minden egyes sertésnek a vizsgált oldat és az összehasonlító oldat 0,08 ml térfogatú részleteit adjuk be injekció formájában. Az R-érték: 0,85 (a vizsgált állatok száma: 5). így ennek a gyorsabban felszívódó inzulin-származéknak az esetében is a magnézium-ionok felgyorsítják a felszívódást. 10. példa Elkészítjük az 1 jelzésű, alábbi összetételű oldatot: 0,095 mól/1 magnézium-klorid, 0,002 mól/1 cinkacetát, 1 mg/ml protamin-szulfát, 3 g/ml m-krezol, ml-enként 100 nemzetközi egységgel egyenértékű, cinkmentes sertés monodezamido-inzulin, plusz nyomjelző származék; az oldat pH-ját sósavval 3,2- re állítjuk. Elkészítjük a 2 jelzésű, a fenti 1 jelzésű oldattal azonos összetételű oldatot, azzal az eltéréssel, hogy a 0,095 mól/1 magnézium-klorid helyett 0,14 mólÁ nátrium-kloridot használunk. Az 1 vagy 2 jelzésű vizsgálati oldatok és az összehasonlító oldat (humán Actrapid, plusz humán nyomjelző inzulin) 0,05 ml térfogatú részleteit beadjuk sertéseknek, A talált R-értékek: az 1 jelzésű oldatra: 3,7 (a vizsgált állatok száma: 2), és a 2 jelzésű oldatra: 2,9 (a vizsgált állatok száma: 2). Az eredmények azt mutatják, hogy a protamint tartalmazó monodezamido-inzulin-oldatok hatását a magnézium-ionok a cink-ionok hasonló hatásán túlmenően, megnyújtják. 11. példa Egészséges önkénteseken farmakokinetikai vizsgálatot végzünk. A vizsgálati oldat: 0,14 mól/1 magnézium-szulfát, 0,05 mól/1 magnézium-klorid, 0,01 mól/1 magnézium-acetát, 2 g/1 m-krezol és 100 nemzetközi egység/ml cinkmentes, humán, egykomponensű inzulin; az oldat pH-ját sósavval 5,7- re állítjuk. Összehasonlító oldat (ActrapidTMHM): 16 g/1 glicerin, 3 g/1 m-krezol, 100 nemzetközi egység/ml humán egykomponensű inzulin (hexamerenként 3 cink-iont tartalmaz); pH 7,4. A vizsgálati oldathoz és az összehasonlító oldathoz nyomnyi mennyiségben (1.85.105 Bq/ml, illetve 1,01 . 105 Bq/ml) humán '“i-inzulint adunk. A vizsgáld oldat 4 nemzetközi egységnek megfelelő részletét szubkután injekció formájában beadjuk az egyik kísérleti személy egyik combjába, míg a másik combjába az összehasonlító oldat 4 nemzetközi egységnek megfelelő részletét adjuk be. A két készítmény beadásához véletlenszerűen választjuk ki a jobb vagy bal combot. A felszívódást úgy követjük, hogy külsőleg folyamatosan mérjük mindkét combon az injekció helyén maradó radioaktivitást. A talált R-érték: 0,78 (a vizsgált személyek száma: 15). így, hatásnyújtó szerek nélkül a magnézium-ionok embereken is felgyorsítják az inzulin felszívódását. 14 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 8
