201094. lajstromszámú szabadalom • Eljárás immunstimuláns acil-tripeptidek és az azokat hatóanyagként tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
15 HU 201094 B 16 azokat. A termék vékonyréteg-ki'omatográfiás Rf-értéke=0(24. Ily módon színtelen, amorf, szilárd anyag formájában 1,04 g (hozam: 36%) tiszta, cim szerinti vegyületet kapunk. lH-NMR-spektrum (60 mHz, CDCh), delta: 1,45 (9H, s), két átfedő szingulett: 3,71, 3,72 (6H), 5,14 (2H, s), 7,31 (5H, s). 9. példa lfi-[Heptanoil-gamma-D-glutaniil-cC-benzil-észter-0-(L)-aszpartil-cC-D-alanin-metil-észter]--4-amino-4-metoxi-karbonil-piperidin 1,04 g (1,31 mmól) N3-[heptanoil-gamma-D-glutamil-oC-benzil-észter-ű-(L)-aszpartil-ct-alanin-metil-észter]-4-(tercier-butoxi-karbonil-amino)-4-metoxi-karbonil-piperidin 6,8 ml vízmentes dioxánnal készült, 10 normál sósav-oldattal készült elegyét 4 órán át 20 °C hőmérsékleten keverjük. Utána az oldószert csökkentett nyomáson ledesztilláljuk, és az olajos maradékot feloldjuk 60 ml etil-acetátban. Az oldatot 80 ml vízzel keverjük, és az elegy pH-ját 2 normál, vizes sósavval 2,0-ra állítjuk. A szerves és vizes részt alaposan összekeverjük, utána az emulzió megbontása céljából kellő mennyiségű telített nátrium-klorid-oldatot adunk hozzá, majd a vizes részt elválasztjuk, és azonos térfogatú, tiszta etil-acetáttal kirázzuk. Az etil-acetátos részeket elöntjük. A vizes részt 80 ml tiszta etil-acetáttal keverjük, és az elegy pH-ját 2 normál, vizes nátrium-hidroxid-oldattal 9,5-re állítjuk. Ezután a vizes részt elválasztjuk, és tiszta etil-acetáttal ismét kirázzuk. A meglúgositott, vizes rész etil-acetátos kirázása útján kapott szerves részeket egyesítjük, azonos térfogatú vízzel mossuk, vízmentes nátrium-szulfáton megszáritjuk, és az oldószert csökkentett nyomáson ledesztilláljuk. Ily módon színtelen, habos anyag formájában 564 mg (hozam:63%) cím szerinti vegyületet kapunk. Ez a termék a vékonyréteg-kromatográfiás vizsgálat szerint lényegében tiszta. Rr-értéke=0,50 (szilikagél lemezen, eluens: ecetsav, n-butanol és viz 1:4:1 arányú elegye, a lemezeket úgy hívjuk elő, hogy 10%-os etanolos foszfor-molibdénsav-oldattal befújjuk, majd megmelegitjük azokat). Az így kapott terméket további tisztítás nélkül használjuk fel a következő reakciólépésben. 10. példa ífl-fHep tanoil-gamma-D-glu tamil-0- (L)-aszpai— til-cC-D-alanin-metil-észter]-4-amino-4-metoxi-karbonil-piperidin 564 mg (0,82 mmól) N^fheptanoil-gamma-D-glutamil-oC-benzil-észter-/5-(L)-aszpartil-oC-D-alanin-metil-észter]-4-amino-4-metoxi-karbonil-piperidin 106 ml metanollal készült oldatát egy Parr-féle készülékben, 395 mg Pearlman-féle katalizátor (csontszenes palládium-hidroxid, amelynek palládium-hidroxid-tartalma: 20%, és víztartalma: 31%) jelenlétében, 3,5 • 105 Pa nyomáson, 18 órán át 20 °C hőmérsékleten hidrogénezzük. Utána a katalizátort kiszűrjük, és 150 ml forró metanollal mossuk. A szűrletet és a metanolos mosófolyadékot egyesítjük, és az oldószert csökkentett nyomáson ledesztilláljuk. Ily módon színtelen, habos anyag formájában 478 mg (hozam:98%) cim szerinti vegyületet kapunk. A termék vékonyréteg-kromatográfiás Rf-értéke=0,36 (szilikagél lemezen, eluens: ecetsav, n-butanol és víz 1:4:1 arányú elegye, a lemezeket úgy hívjuk elő, hogy 10%-os etanolos foszfor-molibdénsav-oldattal befújjuk, majd megmelegitjük azokat). ^-NMR-spektrum (60 mHz, CD3OD), delta: 3,73 (3H, s), és 3,86 (3H, s),-CO2CH3. 11. példa A® -[He p tanoil-gam ma-D-glu tamil-0-(L)-asz partil-oC-D-alanin]-4-amino-4-karboxi-piperidin-trinétriumsó 100 mg (0,17 mmól) N3-[heptanoil-gamma-D-glu tamil-/!-(L )-aszpartil-oC-D-alanin-metil-észter]-4-amino-metoxi-karbonil-piperidin 1,3 ml és 0,4 ml víz elegyével készült oldatához 5 °C hőmérsékleten egyszerre hozzáadunk 0,491 ml 1,000 normál, vizes nátrium-hidroxid-oldatot (0,49 mmól). Az oldatot 3 órán át 5 °C hőmérsékleten keverjük, majd az így kapott tiszta oldatot fagyasztva szárítjuk. Ily módon színtelen, amorf szilárd anyag formájában 97 mg (hozam: 92%) cim szerinti vegyületet kapunk. A termék vékonyréteg-kromatográfiás Rf-értéke=0,26 (szilikagél lemezen, eluens: ecetsav, nbutanol és víz 1:4:1 arányú elegye, a lemezeket úgy hívjuk elő, hogy 10%-os etanolos foszfor-molibdénsav-oldattal befújjuk, majd megmelegitjük azokat). l3-C-NMR-spektrum (D2O), ppm: 183,4, 179,9, 178,6, 176,9, 175,8, 171,9, 169,9, 56,8, 55,0, 51,5, 51,0, 43,2, 39,5, 36,3, 35,5, 35,0, 32,7, 31,1, 28,4, 25,6, 22,2, 18,2, 13,8. 12. példa N-Benziloxi-karbonil-4-amino-4-karboxi-piperidin 2,25 g (10 mmól) 4-amino-4-karboxi-piperidin-hidrobromidot [P. Jacobsen, K. Schaumburg, P. Krogsgaard-Larsen, Acta Chem. Scandinavica B34, 319-326. (1980)] feloldunk 18 ml kálium-dihidrogén-foszfát-puffer (0,05 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 10
