201091. lajstromszámú szabadalom • Eljárás gonatriénszármazékok és az ezeket tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
15 HU 201091 B 16 9. példa 17oC-(Tiocian0to-metil)-17ß-hidroxi-13B-etil-gona-4,9,ll-trión-3-on előállítása. (A) és (B) lépések: A 3. példa szerint járunk el. (C) lépés: A (B) lépésben kapott 1,82 g (5,35 mmól) 13ß-etil-3-etil0ndk>xi-gona-4,9,ll-triön-17ß-spiro-l’,2’-oxiránt feloldjuk 200 ml metanolban, hozzáadunk 50 ml vízben oldott 8,67 g (107 mmól) nátrium-tiocianátot és 2,5 ml vízmentes ecetsavat, az elegyet 55 °C hőmérsékleten, nitrogénáramban három napon át keverjük, majd lehűtjük szobahőmérsékletre. A folyékony reakcióelegyet 300 ml kloroformmal hígítjuk és mossuk előbb vízzel, majd telített sósvizes oldattal. A mosott vizes fázist 100 ml kloroformmal extraháljuk, az így kapott szerves fázisokat egyesítjük, vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk és csökkentett nyomáson szárazra pároljuk; így kapunk sárgásbarna - amorf szilárd állapotú - nyersterméket, amelyet alávetünk szilikagéles oszlopkromatografálásnak, eluensként n-hexán és etil-acetót elegyét alkalmazva, majd n-hexán és etil-acetát elegyéböl átkristélyosítjuk. A tisztított termék 0,76 g (kitermelés: 39%) 17oC-(tiocianáto-metil)-170- -hidroxi-13/}-etil-gona-4,9,l l-trién-3-on fehér kristályos alakban, amelynek olvadáspontja: 192-194 °C. NMR-spektrum (CDCls, 90 MHz) é: 1,05 (3H,t,J=7,5 Hz); 3,07 (lH,d,J= =12 Hz); 3,57 (lH,d,J=12 Hz); 5,83 (1H,széles s); 6,39 (lH,d,J=10,5 Hz): 6,69 (lH,d,J=10,5 Hz). IR-spektrum (KBr): 3450, 2280, 1640 cm-1. 10. példa 17oC-(Ciano-metil)-17ß-hidroxi-13ß-etil-gona-4,9,11-trién-3-on- 17ß-acetat előállítása. A 3. példa szerint előállított 0,70 g (2,2 mmól) 17oC-(ciano-metil)-17ß-hidroxi-13ß-etil-gona-4,9,ll-trién-3-ont feloldjuk 13 ml piridinben, hozzáadunk 13 ml vízmentes ecetsavat és 130 mg 4-dimetilamino-piridint, az elegyet 45 °C hőmérsékleten, nitrogénáramban négy órán át keverjük, majd lehűtjük szobahőmérsékletre. A folyékony reakcióelegyet 50 ml etil-acetáttal hígítjuk és mossuk előbb 3n hidrogén-kloridos oldattal, majd nátrium-hidrogén-karbonát telített vizes oldatával, végül vizes, telített sóoldattal. A mosott vizes fázist 50 ml etil-acetáttal extraháljuk, az így kapott szerves fázisokat egyesítjük, vízmentes magnézium-szulfáton szárítjuk és csökkentett nyomóson szárazra pároljuk. Így kapunk 0,91 g nyersterméket sárgásbarna amorf szilárd alakban, amelyet szilikagélen oszlopkromatográfiásan tisztítunk, eluensként n-hexán és etil-acetót elegyét alkalmazva. A halványsárga amorf céltermék tömege 0,55 g (kitermelés: 78%). NMR-spektrum (CDCls) : <5 1,02 (3H,t,J=7,5 Hz), 2,14 (3H,s), 2,88 (lH,d,J=16,5 Hz), 3,18 (lH,d,J=16,5 Hz), 5,78 (lH.brs), 6,67 (2H,s) IR-spektrum (KBr): 2250, 1740, 1660 cm"1. Gyógyászati hatás vizsgálata. Hatóanyagmintákat úgy készítünk, hogy 10%-ban etanolt tartalmazó gyapotmag-olajban szuszpcndáljuk az előállítási példákban leírt módon előállított különböző célvegyületeket és a hatóanyagmintókat orálisan beadjuk nőstény patkányoknak 0,1, 1, illetve 10 mg/kg adagokban 14 napon át. Az ellenőrző csoportokhoz tartozó patkányoknak tiszta gyapotmag-olajat adunk be azonos ideig. A kezelés befejezése után megmérjük a patkányok petefészkének a tömegét és a találmány szerint előállított gonatriénszármazékok anti-gonadotrópiás hatékonyságát úgy értékeljük, hogy egybevetjük a hatóanyaggal kezelt patkányoknál mért tömegeket az ellenőrző csoportba tartozó patkányoknál mért tömegekkel. Az eredményeket a Táblázat mutatja, amelyben a hatóanyagokat az előállítási példájuk számával azonosítjuk. Táblázat Hatóanyag Adag [mg/kg] (Pld. sz.) 0,1 1 10 1-± + + 2-+ ++ 3-+ + + 4-+ + + 6 ± ± ++ 7-± ++ 9 ++ + + Jelmagyarázat:hatástalan hatékony + + nagyon hatékony A vizsgálati eredmények azt mutatják, hogy a találmány szerint olyan új gonatriénszármazékokat állíthatunk elő, amelyek kis toxicitás mellett kiemelkedő anti-gonadotrópiás hatást fejtenek ki, így endometriosis kezelésére alkalmazott gyógyászati hatóanyagként nagyon hatékonyak. SZABADALMI IGÉNYPONTOK 1. Eljárás gonatriénszármazékok előállítására, amelyek (I) általános képletében R1 jelentése 1-3 szénatomos alkilcsoport; X jelentése halogénatom, cianocsoport,-SCN csoport, -OR9, -SR9, -SOR9 ál-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 10
