201064. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 2-amino-alkil-1,2-benzizotiazol-3(2H)-on-1,1-dioxid-származékok és ilyen vegyületeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
9 HU 201064 B 10 Whatman GF/B szűrón történő gyors szűréssel fejeztük be, majd a szüredéket 3x5 ml jéghideg Tris-sósav pufferrel (50 mM, pH= =7,0) átmostuk. A radioaktivitás mérése előtt Aquasol-Z-vel (NEN) 45-50%-os hatékonyságú extrahálást végeztünk. Az 5-HTia receptorhelyek megjelölésére l3H]-8-hidroxi-2-(di-/n- propil/-amino )-tetralint {[3H J-8-OH-DPAT} használunk 1 mM koncentrációban. A fenti eljárással az alábbi táblázatban szereplő vegyületeket vizsgáltuk. Az eredményeket a pICso értékkel adjuk meg, ez a vizsgált vegyület azon koncentrációjának tizes alapú logaritmusa, mely a specifikus kötődést 50%-ban gátolja. A táblázatban szereplő pICso értékek három, egymástól független mérés eredményének középértékét és a középértéktől való eltérését mutatják. Vizsgált 5-HTia kö- Hányszoros vegyület tési affinitás, a növekedés* patkány agyi cortex Buspirone 7.52±0.10 1 1/A/ példa 9.34+0.03 66 2. példa 8.16+0.07 4.4 3. példa 8.52±0.14 10 5. példa 8.03±0.15 3.2 * A vizsgált vegyülettel és a buspironenal kapott eredmények közötti eltérés logaritmusának numerusa A fenti eredményekből látható, hogy a vizsgált vegyületek az 5HTu kötési vizsgálatokban 3-60-szor hatásosabbnak bizonyultak a buspirone-nál. 7. Példa Vérnyomáscsökkentő tulajdonságok meghatározása 250-350 g súlyú, hím, normotenziv Sprague- Dawley patkányokat (szállító: Charles River, Franciaország) 60 mg/kg intraperitorteálisan és 15 mg/kg szubkután beadott pentobarbitone-nátriumraal elaltattunk. A vérnyomást vagy a baloldali nyaki artériából, vagy pedig egy combi artériából, P23 AA típusú Statham nyomásátalakitóva], szivfrekvenciát pedig egy 9757 típusú Beckman kardio-tachométer csatlakozóval előállított elektrokardiogrammal regisztráltuk. A kapott jeleket egy R típusú Beckman dinográf képernyőjén jelenítettük meg. A gyógyszerek intravénás beadásához egy nyaki vénát kanülöztünk. Az összes operációs műveletek elvégzése után 500 egység heparint injektáltunk be intravénásán. Az 1. példa szerinti vegyületből, a 2-{4- -[(2,3-dihidro-l,4-benzodioxin-2-il)-metil-amino]-butil}-l,2-benzoizotiazol-3(2H)-on-l,l-dioxidból 1 ml/testtömeg-kg-nyi mennyiséget adtunk be szubkután, fiziológiás sóoldatban. A vérnyomásban és a szivfrekvenciában az alábbi változásokat észleltük: Dózis A vérnyomás A szívfrekváltozása vencia (Hgmm) változása (ütés/perc) 25 pg/kg -35 -80 500 Mg/kg -50 -90 Egy másik kísérletben az artériás vérnyomást, és a szivfrekvenciét közvetlenül mértük 250-350 g tömegű, éber állapotban lévő hím, spontán hipertenziv patkányoknál (szállító: Charles River, Franciaország). Ugyanazt a vizsgálandó vegyületet adtuk be szubkután vagy orálisan, fiziológiás sóoldatban, 1 inl/losttömeg-kg mennyiségben, az alábbi táblázaton látható dózisokban. Beadás módja és dózis A vérnyomás változása (Hgmm) A szivfrekvencia változása (ütés/perc) 100 Mg/kg szubkután-20 +80 200 Mg/kg szubkután-65 +100 500 Mg/kg szubkután-75 + 120 1 mg/kg szájon át-25 + 100 5 mg/kg szájon át-45 + 100 Összefoglalva megállapíthatjuk, hogy a vizsgált vegyület, a 2-{4-[(2,3-dihidro-l,4- -benzodioxin-2-il)-metil-amino]-butil}-l,2- -benzizotiazol-3(2H)-on-l,l-dioxid a vizsgálatnál alkalmazott körülmények között, altatott, normotenziv patkányoknál hatásosan csökkenti a vérnyomást és a szivfrekvenciét, éber állapotban lévő, spontán hipertenziv patkányoknál pedig reflexes tachikardia (kórosan szapora szívműködés) fellépése mellett csökkenti a vérnyomást. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 7
