200488. lajstromszámú szabadalom • Eljárás de-mannozil-teikoplanin-származékok előállítására
1 HU 200488 B 2 Komplex (teiko-planin faktorok) pg/ml kiindulási érték RT (perc) Demannozil-származékok |4g/ml végső érték RT (perc) TA2-1 11,3 22,58 DM-TA2-1 2,26 24,17 TA2-2 112,1 24,71 DM-TA2-2 26,3 26,30 TA2-3 39,9 25,60 DM-TA2-3 5,2 27,20 TA2-4 20,0 28,66 DM-TA2-4 2,0 30,19 TA2-5 16,7 29,35 DM-TA2-5 1,7 30,92 Az egyes demannozil : faktorokat a 193 538 sz. A fenti módon eljárva, azonban Streptomyces canmagyar szabadalmi leírásban szereplő módon választdidus NRRL 3218 törzset alkalmazva a termék HPLC juk szét; az egyes faktorokat alacsony kitermeléssel vizsgálatának eredményei az alábbiak. kapjuk. Komplex pg/ml RT Demannozil(tg/ml RT (teiko-planin kiindulási (perc) származékok végső (perc) faktorok) érték érték TA2-1 10,7 27,58 DM-TA2-1 2,3 24,17 TA2-2 110,9 24,71 DM-TA2-2 20,8 26,30 TA2-3 35,2 25,60 DM-TA2-3 6,9 27,20 TA2-4 23,6 28,66 DM-TA2-4 2,8 30,19 TA2-5 19,7 29,35 DM-TA2-5 1,5 30,92 2. A de-mannozil-teikoplanin komplex 3. komponensének (DM-TA2-3) előállítása Az 1. példában leírt körülmények között dolgozva Nocardia orientalis NRRL 2450 törzzsel, de a beoltás után 48 órával TA2-2 helyett 200 mg TA2-3-at adagolva olyan fermentlevet kapunk, amelyet az 1. példában leírt módon dolgozunk fel. A kinyerést és tisztítást az 1. példában leírttal azonos módon végezzük. A fermentlében az átalakítás hatásfoka 32 százalék. Az előzővel azonos körülmények között végzett HPLC analízis a TA2-3-ra 25,60 perc RT értéket mutat, és 27,20 percet a DM-TA2-3-re. A kitermelés 28 mg tiszta DM-TA2-3, azaz olyan (I) általános képletű vegyület, amelyben: R = N-dekanoil-béta-D-2-dezoxi-2-amino-glükopiranozil csoport; Rl = N-acetil-béta-D-2-dezoxi-2-amino-glükopiranozil csoport; R2 = hidrogénatom. A tiszta DM-TA2-3-nak az 1. példában leírtakkal azonos körülmények között rögzített NMR spektrumának jellegzetes csúcsait a II táblázatban mutatjuk be. Az 1. pontban leírtakkal azonos körülmények között rögzített FAB tömegspektrum 1715-ös molekulatömeget mutat, ami egyezik a hozzárendelt szerkezettel. Egy analóg kísérletben, amelyben a Nocardia orientalis NRRL 2450 törzset Streptomyces candidus NRRL 3218 törzzsel helyettesítettük, hasonló eredményeket kaptunk. 3. A de-mennozil teikoplanin komplex 4. komponensének (DM-TA2-4) előállítása. Az 1. példában leírt körülmények között dolgozva Nocardia orientalis NRRL 2450 törzzsel, de a beoltás után 72 órával TA2-2 helyett 200 mg TA2-4-et adagolva olyan fermentlevet kapunk, amelyet az 1. példában leírt módon dolgozunk fel. A fermentlében az átalakítás hatásfoka 34 %. A kinyerést és tisztítást az 1. példában leírttal azonos módon végezzük. Az előzővel azonos körülmények között végzett HPLC 30 analízis a TA2-4-re 28,66 perc RT értéket mutat és 30,19 percet a DM-TA2-4-re. A kitermelés 24 mg tiszta DM-TA2-4, azaz olyan (I) általános képletű vegyület, amelyben: R = N-(8-metil-dekanoil)-béta-D-2-dezoxi-2-amino- 35 -glükopiranozil csoport; Rl = N-acetil-béta-D-2-dezoxi-2-amino-glükopiranozil csoport; R2 = hidrogénatom. A tiszta DM-TA2-4-nek az 1. példában leírtakkal 40 azonos körülmények között rögzített NMR spektrumának jellegzetes csúcsait a H. táblázatban mutatjuk be. A FAB tömegspektrumot olyan Kratos MS-9 berendezéssel rögzítjük, amely MS 50TC konzollal és FAB forrással van ellátva. A pozitív ion spektrumot 45 néhány mikroliter alfa-tioglicerin-diglicerin 1:1 arányú elegyében diszpergált olyan mintából nyeljük, melyet 9 KeV energiájú Xe atomnyalábbal bombázunk. A kísérlet 1891-es molekulatömeget mutat, ami egyezik a hozzárendelt szerkezettel. 50 Egy analóg kísérletben, amelyben a Nocardia orientalis NRRL 2450 törzset Streptomyces candidus NRRL 3218 törzzsel helyettesítjük, hasonló eredményeket kapunk. 4. A de-mannozil teikoplanin komplex 5. kompo- 55 nensének (DM-TA2-5) előállítása Az 1. példában leírt körülmények között dolgozva Nocardia orientalis NRRL 2450 törzzsel, de a beoltás után 48 órával TA2-2 helyett 200 mg TA2-5-öt adagolva olyan fermentlevet kapunk, amelyet az 1. 60 példában leírt módon dolgozunk fel. A fermentlében az átalakítás hatásfoka 36 százalék. A kinyerést és tisztítást az 1. példában leírttal azonos módon végezzük. Az előzővel azonos körülmények között végzett HPLC analízis a TA2-5-re 29,35 perces RT 65 értéket mutat és 30,92 percet a DM-TA2-5-re. A 7
