200480. lajstromszámú szabadalom • Eljárás az alpha-melanotropin nyíltláncú és gyűrűs analógjai előállítására

1

HU 200480 B

2

Peptid-analóg Hatékonyság*

béka gyík

Az aminosavak helyettesítésének hatása

Ac-[Cys4,D-Phe7,Cysl0]-q-MSH4-i3NH2 6,0 6,0 Ac-[Cys4,Cy s1 °]-a-MSH4-i 2NH2 10,0 1,5

Ac-[Cys4,D-Phe7,Cysl0]-a-MSH4-i2NH2 20,0 6,0 Ac-[Cys4,Cys'°]-a-MSH4-i 1NH2 0,16 0,07

Ac-[Cys4,D-Phe7,Cys1 °]-a-MSH4-i l NH2 2,5 3,0 Ac-[Cys4,Cyslo]-MSH4-ioNH2 0,06 0,003

Ac-[Cys4,D-Phe7,Cyslo]-a-MSH4-ioNH2 0,75 0,5

Peptid-analóg

Hatékonyság* béka gyík

A gyűrű méretének hatása**

Ac-[Cys4Cysl0]-a-MSH4-i3NH2

30,0

0,60

[Mpa^Cysj-a-MSHa-i 3NH2

30,0

1,0

[Maa4,Cy s1 °]-a-MSH4-i 3NH2

0,06

O

O

0\

Ac-[Hcy4,Cys4]-a-MSH4-i3NH2

0,06

0

'-4

O

= A biológiai hatást az a-melanotropinhoz viszonyítjuk, a dózis-hatás görbe lineáris (egyenes szakaszán).

= A gyűrű mérete: a peptidláncból képzett gyűrűt kialakító kötések száma.

A fenti táblázatban szereplő rövidítések jelentését lásd a példák előtti felsorolásban.

5 Az ot-melanotropin 4—10 fragmensei ((X-MSH4-10) szerkezet-hatás összefüggéseinek további vizsgálata céljából részletesen megvizsgáltuk, milyen szerkezeti követelményei vannak a melanotróp hatásnak egy sor, korábban nem ismert, nyíltláncú (a-MSH4-io) analóg 10 fragmens esetében, különös tekintettel a peptidlánc 5- ös és 10-es helyzetébe bevitt aminosavak szerepére.

Ezután az a-melanotropin nyíltláncú analógjaival nyert eredmények alapján vizsgáltunk egy más típushoz tartozó, rögzített konformációjú a-melanotropin 15 analógokat is. Röviden szólva, az a-melanotropin olyan analóg, 4-10 fragmenseit vizsgáltuk, amelyeket az

Ac-[Nle4-Xxx5,D-Phe7,Yyy10]-a-MSH4-ioNH2

általános képlettel jellemezhetünk, ahol a fenti ál- 20 talános képletben

Xxx jelentése egy aminosav, mégpedig glutaminsav vagy aszparaginsav, tehát egy monoamino-dikarbonsav, és

Yyy jelentése egy bázikus aminosav, például li- 25 zin, omitin, 2,4-diamino-vajsav vagy 2,3-diamino-propionsav.

Az a-melanotropinnak az alábbi két táblázatban felsorolt, Ac-a-MSH4-io általános képlettel jellemezhető, nyíltláncú analógjait szilárd fázisú peptid-szin- 30 tézissel állítjuk elő egy p-metil-benzhidril-amin-típusú gyantán mint hordozón, és a termékeket az a-melanotropin és analógjai esetében korábban használthoz hasonló módszerekkel tisztítjuk meg.

Az a-melanotropin analógok szerkezete

Sorszám

Primer szekvencia

1.

2.

3.

4.

5.

6.

7.

8. 9.

10.

11.

12.

13.

14.

15.

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13

Ac-Ser-Tyr-Ser-Met-Glu-His-Phe-Arg-Trp-Gly-Lys-Pro-Val-NH2 Ac-Ser-Tyr-Ser-Nle-Glu-His-D-Phe-Arg-Trp-Lys-Gly-Pro-Val-NH2 Ac-Ser-Tyr-Ser-Nle-Asp-His-D-Phe-Arg-Trp-Lys-Gly-Pro-Val-NH2 Ac-Nle-Glu-His-D-Phe-Arg-Trp-Lys-Gly-Pro-Val-NH2 Ac-Nle-Asp-His-D-Phe-Arg-Trp-Lys-Gly-Pro-Val-NH2 Ac-Nle-Asp-His-D-Phe-Arg-Trp-Gly-NH2 Ac-Nle-Glu-His-D-Phe-Arg-Trp-Lys-NH2 Ac-Nle-Asp-His-D-Phe-Arg-Trp-Lys-NH2 Ac-Nle-Glu-His-D-Phe-Arg-Trp-Orn-NH2 Ac-Nle-Asp-His-D-Phe-Arg-Trp-Orn-NH2 Ac-Nle-Glu-His-D-Phe-Arg-Trp-Dab-NH2 Ac-Nle-Asp-His-D-Phe-Arg-Trp-Dab-NH2 Ac-Nle-Asp-His-D-Phe-Arg-Trp-Dpr-NH2 Ac-Nle-Glu-His-Phe-Arg-Trp-Lys-NH2 Ac-Nle-Asp-His-Phe-Arg-Trp-Lys-NH2

4