200474. lajstromszámú szabadalom • Eljárás renin-gátló di- és tripeptidek, valamint ezeket hatóanyagként tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
1 HU 200474 B 2 nátrium-szulfáton szárítjuk. Kieselgélen kromatografáljuk (metanol), amelynek során a cím szerinti terméket színtelen olaj formájában kapjuk. Rf (MeOH) = 0,08; MS (FAB): 676 (M+l). Kitermelés; 49 %. a) Etoc-Thi-His-ACHPA-Ile-E-NHZ 475 mg Etoc-Thi-His(DNP)-ACHPA-Ile-£-NHZ-t az la) összehasonlító példával analóg módon tiofenollal a cím szerinti vegyületté alakítunk. Rf (EE/MeOH) (8:1) = 0.20: MS (FAB): 810 (M+l). b) Etoc-Thi-His(DNP)-ACHPA-Ile-B_NHZ 380 mg Boc-His(DNP)-ACHPA-Ile—B—NHZ-t 2 ml dioxánban oldunk és 9 ml félig koncentrált dioxános sósavval elegyítjük. A reakcióelegyet 3 órán keresztül szobahőmérsékleten keverjük, majd a dioxánt vákuumban eltávolítjuk, a maradékot 50 ml EE és 50 ml telített vizes nátrium-hidrogén-karbonát elegyében felvesszük és a vizes fázist 2 x 50 ml EE-vel extraháljuk. A szerves fázist vízmentes nátrium-szulfáton szárítjuk és vákuumban bepároljuk. A maradékot 5 ml THF-ben felvesszük, és az oldatot 104 mg EtOC-Thi-OH, 97 mg DCC és 86 mg HOBt elegyével 15 órán keresztül szobahőmérsékleten keverjük. A diciklohexil-karbamidot kiszűrjük, a szűrletet vákuumban bepároljuk és 50 ml EE-ben felvesszük. 2 x 50 ml telített vizes nátrium-hidrogénkarbonát oldattal és egyszer vízzel extraháljuk, vízmentes nátrium-szulfáton szárítjuk és vákuumban bepároljuk. A cím szerinti terméket sárga olaj formájában kapjuk, amely további tisztítás nélkül felhasználható. Rf (EE/MeOH 5:1) = 0,61. c) Boc-His-(DNP)-ACHPA-Ile-£_NHZ 1,34 g Boc-His(DNP)-OH. 0.26 ml piridin és 0,46 ml N-etil-piperidin 100 ml CH2Ch-ben felvett elegyéhez -5 °C hőmérsékleten 0.37 ml pivaloil-kloridot adunk. A reakcióelegyet 30 percen keresztül 5-10 °C hőmérsékleten keverjük, majd -10 °C hőmérsékletre hűtjük és 1.32 g H-ACHPA-lle-B_NHZ 50 ml CHjCb-ben felvett oldatát csepegtetjük hozzá. A reakcióelegyet 16 órán keresztül hűtés nélkül tartjuk, majd vákuumban bepároljuk és a maradékot 300 ml EE-ben felvesszük. Egyszer 100 ml kálium-karbonát oldattal és vízzel extraháljuk, vízmentes nátrium-szulfáton szárítjuk és vákuumban bepároljuk. Kieselgélen kromatografálva (futtatószer: MTB) cím szerinti terméket kapunk enyhén sárgás por alakjában. Rf (MTB) = 0,1;'MS (FAB): 851 (M+l). d) H-ACHPA-Ile-B—NHZ 1,50 g Boc-ACHPA-Ile-B-NHZ-t 25 ml dioxánban oldunk. 0 °C hőmérsékleten 55 ml 12 %-os, dioxános sósavat adunk hozzá. Az elegyet 4 órán keresztül szobahőmérsékleten tartjuk, majd vákuumban bepároljuk. a maradékot vízben felvesszük, telített vizes nátrium-karbonát oldattal pH=9-10 értékre állítjuk és háromszor 100 ml EE-vel extraháljuk. Vízmentes nátrium-szulfáton szárítjuk és vákuumban bepároljuk. Így cím szerinti terméket kapunk, amely további tisztítás nélkül a következő kapcsolási lépéshez felhasználható. e) Boc-ACHPA-Ile-B—NHZ 2,5 g Boc-ACHPA-OH [előállítás: J. Med. Chem., 28, 1779 (1985)) és 1,6 g HOBt 100 ml THF-ben felvett elegyéhez 0 °C hőmérsékleten 1,8 g DCC 50 ml THF-ben felvett oldatát csepegtetjük. A reakcióelegyet 1 órán keresztül hűtés nélkül tartjuk, majd 0 °C hőmérsékleten 2,8 g H-Ile—B—NHZ 100 ml THF-ben felvett elegyét adjuk hozzá. Ezután 16 órán keresztül szobahőmérsékleten tartjuk, majd szűrjük, bepároljuk és a maradékot 100 ml EE-ben oldjuk. Kétszer 50 ml nátrium-karbonát oldattal és egyszer 50 ml vízzel extraháljuk. Vízmentes nátrium-szulfáton szárítjuk, vákuumban bepároljuk és Kieselgélen kromatografáljuk (futtatószer: EE/n-hexán 1:1). így cím szerinti terméket kapunk színtelen por alakjában. Rf (EE/n-hexán 1:1) = 0,2 MS (FAB): 548 (M+l). f) H-Ile-^-NHZ Az ld) példával analóg módon 3,5 g Boc-Ile—NHZ kiindulási anyagból hab alakjában kapjuk a cím szerinti vegyületet, amely további tisztítás nélkül a következő kapcsolási lépéshez felhasználható. g) Boc-Ile-S-NHZ 6.0 g Boc-Ile—B—NH2 és 6,9 g Z-O-szukcinimid 100 ml dimetil-formamidban felvett oldatát 16 órán keresztül szobahőmérsékleten keverjük. Ezután vákuumban bepároljuk és a maradékot 100 ml EE-ben oldjuk, kétszer 100 ml telített vizes kálium-hidrogén-szulfát oldattal extraháljuk, vízmentes nátrium-szulfáton szárítjuk és vákuumban bepároljuk. így cím szerinti vegyületet kapunk színtelen olaj formájában, amely további tisztítás nélkül felhasználható. Rf (EE) = 0,8; MS (FAB): 351 (M+l). h) Boc-Ile-£-NH2 28.0 g Boc-L-2-amino-3-metil-valeriánsav-nitrilt [előállítás: J. Amer. Chem. Soc. 88, 2033 (1966) cikkel analóg módon előkezelt Raney-nikkellel [előkezelés: (1) vízzel alaposan mossuk, (2) dekalinnal hevítjük és dekantáljuk, (3) metanolban szuszpendáljuk és dekantáljuk] 1 liter metanolos hígított NHvban 2 órán keresztül szobahőmérsékleten hidrogénezünk. Szűrés és vákuumban történő bepárlás után a maradékot 500 ml EE-vel felvesszük és háromszor 200 ml 5 %-os vizes nátrium-hidrogén-szulfát oldattal extraháljuk. A vizes fázist 2n nátrium-hidroxid oldattal pH=9 értékre állítjuk és háromszor 200 ml EE-vel extraháljuk. Vízmentes nátrium-szulfáton szárítjuk és vákuumban bepároljuk. A kapott enyhén sárga olaj további tisztítás nélkül felhasználható. Rf (MeOH/1 % NH3) = 0,6; MS: 217 (M+l). A 2-4. példa szerinti vegyületek az 1. példával analóg módon állíthatók elő. 2. példa Iva-Thi-His-ACHPA-Ile-B—NH2 Rf (EE/MeOH 1:1) = 0,1; MS (FAB): 688 (M+l), kitermelés 60 %. 3. példa Etoc-Thi-His-ACHPA-Leu-B_NH2 Rr (MeOH) = 0.08: MS (FAB): 676 (M+l). kitermelés 51 %. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 5
