200262. lajstromszámú szabadalom • Hatóanyagként optikailag aktív tetrahidro-2-furanon-származékokat tartalmazó fungicid készítmények és eljárás a hatóanyagok előállítására
19 HU.200262 B 20 hatóanyag a talaj térfogatára számítva). A cserepeket ezután három héten át 20 °C hőmérsékletű melegházban tartjuk. A talaj felületét enyhén nedvesen tartjuk. A kísérlet kiértékelésénél meghatározzuk a kikelt cukorrépa növények számát, valamint az egészséges és fertőzött növények arányát. A 3.2. kísérletben megadottakhoz hasonló módon meghatározott dózis-faktorokat a II. táblázatban foglaljuk össze. 3.5. Szisztemikus hatás Pythium debaryanum ellen Zea mays-on A gombát répaszelet-tápoldaton tenyésztjük, és föld-homok elegyhez adjuk. Az Így fertőzött talajt virágcserepekbe töltjük, és kukoricamagokat ültetünk el. Közvetlenül az ültetés után a nedvesíthető porként formált kísérleti készítményt vizes szuszpenzió- 5 -formában a talajhoz öntjük (20 ppm hatóanyag a talaj térfogatára számítva). Ezután a cserepeket 3 héten át körülbelül 20 °C hőmérsékletű melegházban helyezzük el. A földet időközönként enyhe felületi morzsolás 10 mellett egyenletesen nedvesen tartjuk. A kísérlet kiértékelésekor megállapítjuk a kikelt kukoricanövények számát, valamint az egészséges és fertőzött növények arányát. A 3.2. kísérletben leírtak szerint megha- 15 tározott dózis-faktorokat a II. táblázatban foglaljuk össze. II. Táblázat (I) képletű vegyület izomer je (hatóanyag) Az egyes kísérletek dózisfaktorai (f) 3,2 3,3 a b a b 3,4 3,5 aS.l’R enantiomer 1 <1 <1 1 1 1 Izomerelegy* 3,3 1 <1 3,3 3,3 10 aS,l’S enantiomer 3,3 3,3 >3 10 10 3,3 aR.l’R enantiomer 33 3,3 >3 100 10 33 aR.l’S enantiomer 33 3,3 >3 3,3 33 10 A II. táblázatból látható, hogy a találmány szerinti (aS,l’R)-enantiomer átlagosan 3-30-szor jobb hatást mutat, mint a másik három enantiomer, és a racemót (az izomerelegy* a DE-OS 2,804,299 számú nyilvánosságrahozatali irat szerinti anyag). 3.6. Gombanövekedés gátlása in vitro (agar-keveréses vizsgálat) 0,1 ml 0,75%-os, acetonos hatóanyag-oldatot steril vízzel 15 ml-re töltünk fel. A törzsoldatból, illetve az abból viz hozzáadásával sterilen előállított hígítási sorból 1-1 ml-t 19 ml, 9 cm átmérőjű Petri-csészékben elhelyezett táptalajhoz adunk 50 °C hőmérsékleten. A hatóanyag-mennyiség a Petri-csészékben 50, 5, 0,5, 0,05 és 0,005 ppm. Két óra elteltével a csészéket és a hatóanyagot nem tartalmazó kontrollcsészéket Phytophthora capsici-val fertőzzük meg, 0,6 ram átmérőjű, a gombát az alsó felükön tartalmazó agar-gyűrűk formájában. A fertőzött tenyészeteket a növekedés meghatározásáig 60- -70%-os relatív nedvességtartalmú levegőn 18 °C hőmérsékleten sötétben tartjuk. 4-6 nap elteltével, amikor a kontrollcsészében levő tenyészet a Petri-csésze kétharmad részét elfoglalja, meghatározzuk a hígítási sor növekedési értékeit, ahol a hatóanyag koncentrációt a sugárirányban mért növekedés arányában (a kontrollkisérlet %-éban) grafikonon logaritmikusán ábrázoljuk. Az egyes hatóanyagok összehasonlítására mindegyik koncentrációt grafikusan meghatározzuk, 35 mégpedig azt az értéket, ahol a növekedés a kontrollkisérlet 50%-át éri el (ELso-érték). Az ELso-értékeket a III. táblázatban foglaljuk össze: 40 III. Táblázat Az (I) képletű vegyület izomerje (hatóanyag) ELso (ppm hatóanyag/ /csésze) aS,l'R-enantiomer 0,011 (aR,l’R)(aS,l’R) 0,011 . Izomerelegy* 0,064 aR,l’S-enantiomer 0,26 aS.l’S-enantiomer 0,62 aR,l’R-enantiomer 2,7 55 A 3.6. kísérlet mutatja, hogy a leghatékonyabb (aS,l’R)-enantiomer az (aR,l’R)-enantiomerrel alkotott 1:1 arányú elegyeként hasonlóan magas hatékonyságot mutat. 00 3.7. A tartós talajfungicid hatás meghatározása A vizsgálandó hatóanyagot nedvesíthető porként 100-100 ml vízzel elkeverjük, és 20 1 65 12
