200183. lajstromszámú szabadalom • Eljárás beta-laktám antibiotikumok és az ezeket tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
13 HU 200183B meghatározott tartalma: Retenció: 1,10 (ld, 10,8%)), 3,08 (L-alak, 46,5%), 3,82 (D-alak, 38,5%). 2Luélík D-7-f2-Amino-benzotiazol-6-il-glicil-amido)-3- klór-3-cefem-4 karbonsav és a vegyület L-alakjának előállítása A) kromatográfiás elválasztás 2,3 g (lg) jelű vegyületet 50 ml futtatószer (1000 ml víz/50 ml acetonitril/1 ml TFE) és 4 csepp TFE elegyében oldunk, 20 percig keverünk, az oldhatatlan anyagot leszívatjuk, a szűrletet még egyszer szűrjük (Millex-GS, 0,22 pjn, millipórusú) és 10 mles részletekben (460 mg) 10—15 perc alatt lassan preparatív oszlopra (Hibar 250—25, RP 18, 7 jun, átfolyási sebesség 15 ml/perc) szivattyúzzuk. D-alak (II. csúcs): Kitermelés: 350 mg trifluor-acetát Összesen 4,3 g trifluor-acetátot 500 ml vízben oldunk és 25 ml Amberlite IRa—68 (acetát-alakú) tartalmú oszlopra visszük és 1,5 liter vízzel (desztillált) eluáljuk. Az eluátumot bepároljuk 1000 ml térfogatúra és 0,45 p,m-es milli[>órus-szűrőn leszívatjuk és liofilizál juk. Kitermelés: 3,0 g (75%). Elemanalízis a Ci6Hi4Cln504S2 x 3 H2Q x 0,5 CH3COOH (523,9) összegképlet alapjáN. számított: C: 38,97, H: 4,23, N: 13,36, S: 12,24, Cl: 6,76%, kapott: C: 38,9, H: 4,0, N: 13,6, S: 12,0, Cl: 6,8%. A termék nagynyomású folyadékkromatográfiásán (Hibar 250—4, RP 8, 10 p.m, 254 nm, 3 ml/prc, 0,5 mg/ml, futtatószter: 1000 ml víz/30 ml CH3COOH) meghatározott tartalma: 97,4%. NMR (DCOOD): 8:3,58 (d, J-18Hz, 1H). 3,94 (d, J-18HZ, 1H), 5,32 (d, 1-5 Hz, lH),5,75(s, 1H),5,94 (d, J-5Hz, 1H), 7,84 (s, 2H), 8,12 (s, 1H) ppm. L-alak (I csúcs): Kitermelés: 400 mg trifluor-acetát. Összesen 2,01 g trifluor-acetátot feloldunk 500 ml vízben, 30 ml Amberlite IRA-68 (acctát-alakú) tartalmú oszlopra visszük és 1,5 liter vízzel (desztillált) eluáljuk. Az eluátumot bepároljuk 1000 ml térfogatúra és liofilizáljuk. Kitermelés: 1,08 g (60%). Elemanalízis a C16H14CIN 5O4S2 x 3H2O (493,9) összegképlete alapján: számított: C: 38,90, H: 4,08, N: 14,17%, kapott: C: 38,6, H:3,7, N:13,3 %. A termék nagynyomású folyadékkromatográfiásán (Hibar 250—4, RP 8, 10 jun, 254 nm, 1,8 ml/perc, futtatószer: 930 ml H2O/2O ml pH- 7 értékű puffer/50 ml acetonitril) meghatározott tartalma: 94,5% NMR (DCOOD): 6- 3,78 (d, J-17,5Hz, 1H), 4,03 (d. J-17,5Hz, 1H). 5.4 (d, J-5Hz, 1H), 5,8 (s, 1H), 5,92 (d, J-5HZ. 1H). 7,87 (s, 2H), 8,2 (s, 1H) ppm. B) A D-7-(2-Amino-benzotiazol-6-il-glicil-amido)-3-klór-3-cefem-4-karbonsav előállításánál kiindulási vegyületként alkalmazott D-fenil-glicin előállítása a) D-tt-Acetamido-a-fenil-ecetsav /(2a) jelű vegyüld/ előállítása ‘ 500 g (331 mól) D-a-amino-a-fenil-ecetsavat 6 liter vízben szuszpcndálunk, lehűtünk 10 'C hőmérsékletre és 1000 ml vízben oldott, 132 g (3,31 mól) nálrium-hidroxid oldattal elegyítjük. 15 perc elteltével a kapott tiszta oldathoz 0 ”C hőmérsékleten erős keverés közben hozzáöntünk 675 g (6,62 mól) ecetsavanhidridet, majd 1000 ml vízben oldott, 397 g (9,93 mól) nátrium-hidroxid-oldatot. Ekkor a reakcióelegy hőmérséklete 0 ”C-ról 30 ‘C-ra emelkedik. Az oldatot 20 percig 9—10 pH-érték mellett jég/konyhasó-fürdőn keverjük, majd pH-értékét tömény sósav-oldattal (mintegy 1 liter) 1-re állítjuk be. A kapott reakcióelegyet 10 percig keverjük, a 10 *C hőmérsékletre lehűtött szuszpenziót leszívatjuk és 10 liter vízzel mossuk. A kapott terméket káliumhidroxid felett vákuumban szárítjuk. Kitermelés: 553 g (87%). C10H11NO3 (193,2) Op.: 190—191 *C [a] 589- -218,6* (c- 1, C2H5OH) b) D-a-Acetamido-a-(4-nitro-fenil)-ecetsav és D-a-acetamido-a-(3-nitro-fenil)-ecetsav izomerelegy /(2b) jelű vegyüld/ előállítása 227 g (1,17 mól) (2a) jelű vegyületet 40—50 *C hőmérsékleten lassan hozzáadunk 570 ml tömény kénsav-oldathoz. A beadagolás befejezése után a reakcióelegyet 5 percig keverjük 40 °C hőmérsékleten, majd lehűtjük 0 "C-ra. —5 *C és 0 "C közötti hőmérsékleten 30—45 perc alatt lassan hozzácsepegtetünk 115 ml (2,39 mól) 95%-os salétromsavoldatot (d- 1,5). A kapott reakcióelegyet 30 percig keverjük —5 'C és —10 *C közötti hőmérsékleten 8 liter jégre öntjük, a kiváló terméket leszívatjuk és sok vízzel mossuk. Kitermelés: 276,1 g (98%). C10H10N2O3 (139,2) Op.: 193,9 *C [a] 589- -193,9* (c- 1, C2H5OH) c) D-a-Acetamido-a-(4-amino-fenil)-ecetsav /(2c) jelű vegyüld/ előállítása 240 g (1,0 mól) (2b) jelű izomerelegyet 3 liter 95%-os etanolban oldunk és 10 g aktív szénre felvitt palládium (10%-os) jelenlétében 2 órán át 23 *C hőmérsékleten és 10 at nyomáson hidrogénezzük. A kapott szuszpenziót 2,4 liter vízzel elegyítjük, viszszafolyatás közben forraljuk, majd kovasavgélen leszívatjuk. A szűrletből egy éjszakán át való állás során finomkristályos sárga anyag válik ki, ezt leszívatjuk, kevés etanol/víz (3:1) eleggyel mossuk és szárítjuk. Kitermelés: 67,2 g Ci0H12N2O3 (208,2). Op.: 208—211 *C. Op.: 190-191* [a] 589--186,’(c-l,lnsósavoldat). NMR (DMSO): 8- 1,8 (s. 3H), 5,05 (d, 1H), 6,52 (d, J«8,5Hz, 2H), 7,02 (d, J-8,5Hz, 2H), 8,35 (d, 1H) ppm. d) D-a-Acetamido-a-(4-amino-fenil)-ecetsavmetil-észter /(2d) jelű vegyüld/ előállítása 67,7 g (0,33 mól) (2c) jelű vegyületet 400 ml metanolban szuszpendálunk és keverés közben —10 *C és —5 *C közötti hőmérsékleten cseppenként 34,9 ml (0,487 mól) tionil-kloriddal elegyítjük, ennek során tiszta oldat keletkezik. A rcakcióelegy hőmérsékletét egy éjszakán át hagyjuk 25 *C-ra felmelegedni, majd vákuumban szárazra pároljuk. A viszszamaradó anyagot megosztjuk 1000 ml etil-acetát és 800 ml 10%-os nátrium-hidrogén-karbonát-oldat között és pH-értékét 2 n nátrium-hidroxid-ol-14 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 8
