200183. lajstromszámú szabadalom • Eljárás beta-laktám antibiotikumok és az ezeket tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
11 HU 200183B 60 ’C hőmérsékleten keverjük. A metanolt vákuumban ledesztilláljuk és a visszamaradó oldatot 0 'C hőmérsékleten 2 n sósav-oldattal pH- 2 értékre megsavanyítjuk, majd pH értékét 2 n nátrium-hidroxid-oldattal 4-re állítjuk vissza és a kiváló terméket leszívatjuk. Kitermelés: 20,5 g (65%). Elemanalízis a C10H8N4O2S (248,3) összegképlet alapján: számított: C: 48,38, H: 3,25, N: 22,56, S: 12,91%, kapott C:48,4, H:3,5, N:21,2, S:l2,3%. NMR (DMSO): 6:5,17 (s, 1H), 7,17 (q, 1H), 7,35 (d, 1H), 7,57 (s, 1H),7,62 (s, 1H), 8,4 (s, 1H), 10,6— 10,82 (széles s, 1H) ppm. d) DL- a-Amino-a-(2-amino-benzotiazol-6-il)ecetsav /DL-6-amino-benzotiazolil-glicin, (ld) jelű vegyület/ előáüítása 20 g (0,081 mól) (le) jelű vegyületet 19,4 g (0,81 mól) lítium-hidroxiddal 400 ml vízben keverés közben 24 órán át 100 °C hőmérsékleten melegítünk. A kapott oldatot forrón szűrjük, a visszamaradó anyagot forró vízzel mossuk és a szűrletet jéghűtés mellett tömény sósav-oldattal pH- 2 értékre megsavanyítjuk. A kapott reakcióelegyet 15 percig 0 *C hőmérsékleten keverjük és a kapott, a kiváló anyagot tartalmazó oldat pH-értékét 4,5-re állítjuk vissza. A kapott csapadékot lesavatjuk, víz/aceton elegyével mossuk és vákuumban szárítjuk. Kitermelés: 10,4 g (56%). Elemanalízis a C9H9N3O3S x 1/2 H2O (232,3) összegképlet alapján: számított: C: 45,05, H: 4,20, N: 17,51, S: 23,36%, kapott: C: 45,3, H: 4,50, N: 15,50, S: 13,40%. NMR (DMSO): 8:5,11 (s, 1H), 7,8 (s, 2H),8,11 (s, 1H) ppm. e) DL-o-(terc-Butil-oxi)-karbonU-amino-a-(2- 'terc-butü-oxiZ-karbonü-amino-benzotiazol-ő—ü)ecetsav (di-Boc-származék) és DL-a-(terc-butil-oxi)karbonil-amino-a-(2-amino-benzotiazol-6-il)-ecet sav (mono-Boc-származék) /(le) jelű vegyület/ előállítása 20,9 g (0,08% mól) (ld) jelű vegyületet 100 ml víz és 130 ml dioxán elegyében szuszpendálunk és 140 ml 2 n nátrium-hidroxid-oldattal oldatba viszünk. A kapott reakcióelegyhez hozzácsepegtetünk 78,1 g (0,358 mól) di-terc-butü-dikarbonátot 30 perc alatt és a kapott reakcióelegyet 1 éjszakán át keverjük. A dioxánt ledesztilláljuk, a visszamaradó oldatot vízzel hígítjuk és etil-acetát/petroléter elegyével mossuk. A vizes fázist jéghűtés közben 2 n sósav-oldattal pH- 2 értékre megsavanyítjuk és kétszer etil-acetát/tetrahidrofurán (1:1) elegyével extraháljuk. Konyhasó-oldattal való mosás, nátrium-szulfáton való szárítás és a szerves fázis bepárlása után a mono- és a di-Boc-származékok elegyét kapjuk. Kitermelés: 27,4 g. A kapott terméket kovasavgél-oszlopon (Merck, 0,04—0,063 mm) kromatografáljuk, futtatószerként a következő oldószereket, illetve oldószerelegyeket alkalmazzuk: 1. 2000 ml metilén-klorid, 2. 4000 ml metüén-klorid/metanol (10:0,5), 3. metilén-klorid/metanol (10:1), 4. metilén-klorid/metanol (1:1). Di-Boc-származék /(1 e) jelű vegyület/: Kitermelés: 8,7 g (26%). C19H25N3O6S (423,5) NMR (DMSO): 8: 1,37 (s, 9H), 1,52 (s, 9H), 5,12 (d, 1H), 7,45 (d. 2H), 7,65 (d, J-7,5Hz, 1H), 7,% (s, lH)ppm. Mono-Boc-származék Kitermelés: 9,2 g (32%) C14H17N3O4S (323,4) NMR (DMSO): 8:1,36 (s, 9H), 4,98 (d, 1H), 7.2— 7,3 (q, 2H), 7,48 (s, 2H), 7,54 (s, 1H) ppm. f) DL-7-[2-(/terc-butil-oxi/-karbonil-amino)-2- (2-/terc-butil-oxi/-karbonil-amino-benzotiazol-6- il)-acetamido]-3-klór-3-cefem-4-karbonsav /(lf) jelű vegyület/ előállítása A prekurzorsav aktiválása: 5,1 g (12 mmól) (le) jelű vegyületet feloldunk 40 ml dimetil-formamidban, 1,69 ml (12 mmól) trietflaminnal elegyítünk, —40 ’C hőmérsékleten cseppenként hozzápermetezünk 1,48 ml (12 mmól) pivaloil-kloridot és a kapott reakcióelegyet 3 órán át —30 "C és—15 *C közötti hőmérsékleten keverjük. Az aminkomponens előkészítése: 2,83 g (12 mmól) 7-amino-3-klór-3-cefem-4- karbonsavat (7-ACCA) 20 ml tetrahidrofurán és 10 ml víz elegyében szuszpendálunk és tömény trietílamin-oldattal oldattá alakítjuk (pH- 8,3). A kapott reakcióelegyhez hozzáadunk 5 ml dimetil-formamidot, így egyfázisú reakcióelegyet kapunk. Kapcsolás és izolálás: A kapott 7-ACCA-oldatot —40 *C hőmérsékleten hozzápermetezzük a képződött anhidridhez és hűtőfürdőn keverjük. Egy óra elteltével a reakcióelegyhez hozzáadunk 10—20 ml vizet és pH-értékét 10%-os trietil-amin-oldat/tetrahidrofurán eleggyel 7,3-ra állítjuk be. További két óra elteltével a reakcióelegyhez 200 ml vizet adunk, keverés közben etil-acetát/tetrahidrofurán (2:1 elegyével elegyítjük és 0 ‘C hőmérsékleten pH-1,7 értékre megsavanyítjuk. A szerves fázist elválasztjuk, konyhasó-oldattal mossuk, szárítjuk, 30 ml térfogatúra bepároljuk, petroléterbe bekeverjük, a kiváló terméket leszívatjuk és szárítjuk. Kitermelés: 6,2 g (81%), a kívánt termék tartalma 66% a nagynyomású folyadékkromatográfiás meghatározás alapján. C26H30CIN5O8S2 (640,1) 1H-NMR spektrum (90 MHz, CDC13, TMS, ppm): 1,39 (s, 9H), 1,52 (s, 9H), 3,5—4,02 (széles m, 2H), 5,1—5,24 (dd, 1H), 5,38 (d, 1H), 5,62—5,8 (dd, 1H), 7,42—7,53 (m, 1H), 7,68 (d, 1H), 7,98 (s, 1H) ppm. g) DL-7-{2-Amino-benzotiazol-6-il-glicil-amido)-3-klór-3-cefem-4-karbonsav /(lg) jelű vegyület/ előállítása 8,4 g (13,1 mmól) (lf) jelű vegyületet feloldunk 50 ml metilén-kloridban, 0 *C hőmérsékleten hozzáadunk 0,5 ml anizolt és 50 ml trifluor-ecetsavat (TFE) és 15 percig hűtés nélkül keverjük. A trifluor-ecetsav/metilén-ldorid legyet vákuumban ledesztilláljuk és a visszamaradó olajos anyagot éterrel elegyítjük. A trifluor-acetátot leszívatjuk, éterrel mossuk és szárítjuk. Kitermelés: 6,5 g (89%). C16H14CIN5O4S2 x CF3COOH (553,9) A termék nagynyomású folyadékkromatográfiásán (Hibar250—4.RP8,10 pjn, 254 nm, 3 ml/perc, futtatószer: 1000 ml víz/40 ml acetonitril/1 TFE) 12 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
