200102. lajstromszámú szabadalom • Eljárás mechanikai terheléssel szemben stabilizált vizes inzulin-készítmény előállítására
13 HU 200102 B 14 olyan mennyiségű vízmentes cinkkloridot tartalmaz, hogy a teljes cinktartalom 0,0108 g, desztillált vízzel 150 ml térfogatra feltöltve. A fentiek szerint előállított szuszpenziókat az erre a célra szokásosan használt, a kereskedelemből beszerezhető üvegpalackokba töltöttük. A szuszpenziókat közvetlenül a letöltés után 4 °C-ra hűtöttük. Megdermedés után homogén, zavaros géleket kaptunk, amelyek inzulintartalma 40 N.E./ml volt, s 10% illetve 20% Polygelinet tartalmaztak. A 12. és 13. példa szerint készült szuszpenziókkal végzett útépítési kísérlet A szuszpenziókkal töltött palackokat mozgatás nélkül 37 °C hőmérsékleten inkubáltuk, és a választófalon keresztül egy csövecskét az edény aljáig, egy másikat pedig közvetlenül a folyadékszint alá vezettünk be. Az üvegpalack mozgatása nélkül előre megha- 5 tározott időközökben mintát vettünk, és meghatároztuk annak inzulintartalmát nagynyomású folyadék kromatográfia segítségével. A kapott értékeket a 4. táblázat tartalmazza, N.E./inl egységben megadva. 10 15 4. táblázat Mintavétel időpontja 10% Polygeline Edény alján (12. példa) Folyadékszint alatt 20% Polygeline Edény alján (13. pl.) Folyadékszint alatt 0 perc 40 N.E./ml 40 N.E./ml 40 N.E./ml 40 N.E./ml 5 perc 41 N.E./ml 39 N.E./ml 41 N.E./ml 40 N.E./ml 15 perc 41 N.E./ml 40 N.E./ml 40 N.E./ml 41 N.E./ml 30 perc 40 N.E./ml 40 N.E./ml 40 N.E./ml 41 N.E./ml 60 perc 46 N.E./ml 35 N.E./ml 40 N.E./ml 40 N.E./ml 120 perc 66 N.E./ml 14 N.E./ml 46 N.E./ml 35 N.E./ml 14. és 15. példa 35 8% illetve 16% dextrán 60 tartalmú, nyújtott hatású inzulinkészítmények Steril körülmények között egyesitjük az alábbi steril oldatokat; 10 a) 80 illetve 160 g dextrán 60, desztillált vízzel 800 ml térfogatra feltöltve, és b) 1,455 g deszfenil-(Bl)-sertésinzulin (27,5 N.E./mg), 17,00 g glicerin, 6,00 g trisz(hidroxi-metil)-amino-metán, 1,50 g m-krezol .15 és 1,00 g fenol, desztillált vízzel 200 ml térfogatra feltöltve. A kapott oldatokat, amelyek 4 °C hőmérsékleten sürűnfolyó állapotúak voltak, a szokásosan használt üvegpalackokba töltöttük. A 50 biológiai vizsgálat szerint a hatékonyságuk 40 N.E./ml volt. Ha ezeket az inzulinkészítményeket 0,2 N.E./kg dózisban szubkután beadjuk nyulaknak, akkor éppen olyan vagy még nyújtottabb hatást tapasztalunk, mint a ke- 55 reskedelemból beszerezhető semleges protamin-Hagedorn nyújtott hatású készítménynél (lásd a 4. ábrát). 16. példa 20% Polygeline-tartalmú inzulinkészítmény Steril körülmények között egyesítettük az alábbi steril oldatokat: a) 200 g Polygeline, desztillált vízzel 800 ml térfogatra feltöltve, és b) 3,571 g humán inzulin (28 N.E./mg), 2,10 g kristályos nátriumdihidrogénfoszfát (NaH2P04-2H20, 2,00 g m-krezol és 1,00 g fenol, desztillált vízzel 200 ml térfogatra feltöltve. A készítményt a szokásosan használt üvegpalackokba töltöttük. A biológiai vizsgálat során a hatékonyság 100 N.E./ml volt. A nyújtott hatást nyulakon igazoltuk. 17-19. példa 20% dextránt tartalmazó, különböző molekulasúlyú inzulinkészítmények és ezek nyújtott hatása 9
