200093. lajstromszámú szabadalom • Eljárás tumorellemes gyógyászati készítmények előállítására
29 HU 200093 B 30 juváns' hatást az antigénnel egyidejűleg adva, illetve az antigén beadását közvetlenül megelőző vagy követő időszakban adva fejti ki. Ez arra utal, hogy a CDM elsődlegesen a makrofágokon, illetve ezt követően a T sejtek szintjén fejti ki immunmoduláló hatását.- A.B-sejtek produktivitását csakis a T sejtek közvetítésével fokozza, és a már beállott ellenanyag-választ nem befolyásolja. Réthy, L., Ann. Immunol. Hung. Suppl. I, 429. (1984), Réthy, L., Ann. Immunol. Hung. 26, 185. (1986). 2) Limfocitás choriomeningitis (LCM) vírusfertőzés lefolyásának módosítása egerekben Ép, kifejlett immunrendszerrel bíró felnőtt egerekben az LCM vírusfertőzésre adott celluláris immunválasz következményeként limfocitás choriomeningitis jön létre, és a vírusfertőzés utáni 6-8. napon az állatok 100%-ban elhullanak. A celluláris immunválasz-képességet csökkentő kezelésekkel és beavatkozásokkal felnőtt egerekben a betegség kivédhető, az állatok idegrendszeri tüneteket nem mutatnak, és életben maradnak. Földes, P. és munkatársai, Acta Microbiol. Acad. Sei. Hung., 11, 277. (1964/65), Anderlik, P. és munkatársai, Acta Microbiol. Acad. Sei. Hung., 22, 27. (1975), Szeri, I. és munkatársai, Acta Microbiol. Acad. Sei., Hung., 23, 231. (1976), Hori, R. és munkatársa, Jph. J. Microbiol., 20, 249. (1976). A celluláris immunválasz-képességet fokozó kezelések, igy pl. a limfoid rendszer proliferációját okozó fitohemagglutinin (PHA) kezelés viszont elősegíti az i. cer. LCM vírusfertőzés halálos kimenetelű meningitis formájában történő lefolyását, azaz fokozza a vírusfertőzésre kialakuló celluláris immunreakciót. Bános, Zs. és munkatársai, Experienta, 29, 1137. (1973), Bános, Zs. és munkatársai, Kísérletes Orvostudomány, 27, 327. (1975). Szopós egerekben az elhullás aránya és időpontja attól függ, hogy az állatok milyen korúak a fertőzés időpontjában. A fertőzést vírushordozó állapotban túlélő szopós egerek aránya az újszülött kortól a felnőtt kor felé haladva, az immunrendszer érésével párhuzamosan csökken, és az idősebb egerek a fertőzést követően korábban hullanak el, mint a fiatalabbak. Szopós egerekben az immunrendszer működését serkentő, stimuláló hatások elősegítik az i. cer. LCM vírusfertőzés meningitis formájában történő lezajlását. Bános, Zs. és munkatársai, Acta Microbiol. Acad. Sei., hung., 26, 29. (1979), Bános, Zs. és munkatársai, Acta Microbiol. Acad. Sei., hung., 26, 127. (1979), Bános, Zs. és munkatársai, Acta Microbiol. Acad. Sei., hung., 29, 99. (1982), LCM vírusfertőzés Kísérleteinkben a W. E. törzset használtuk, amelyet egerekben végzett sorozatos agypasszázsokban tartunk fenn, és -70 °C-on tárolunk. Az agyszuszpenziók és virushigitások elkészítéséhez minden esetben PBS oldatot használtunk. Az agyszuszpenziók elkészítéséhez az agyakat steril körülmények között eltávolítottuk, kvarchomokkal eldörzsőltük, 1:10 arányban hígítottuk és ülepítettük. A virus titrálását minden alkalommal úgy végeztük, hogy az LCM virus tizes léptékű hígításainak 0,03 ml mennyiségével hathetes felnőtt egereket oltottunk i. cer.-an. A virus LÜ50-értékét Reed és Muench módszere szerint számítottuk ki [Am. J. Hyg., 27, 403. (1938)]. A kísérleti állatokat az előzetesen titrált virus 100 LDso mennyiségével (0,03 ml volumenben) oltottuk i. cer.-an. A kontrollként szolgáló egereket a vírusfertőzéssel azonos módon normál agyszuszpenzióval oltottuk. A kísérletek folyamán naponta kétszer ellenőriztük a limfocitás-choriomeningitisre jellemző idegrendszeri tünetek (remegés, görcsök) kialakulását, és regisztráltuk az állatok elhullását. LCM vírusreizolálás A vírusfertőzést 21 nappal túlélt egerekből a steril feltételek mellett eltávolított agyakat egyedileg kvarchomokkal eldörzsöltük, 1:10 arányban hígítottuk, és az igy nyert szuszpenziók spontán ülepedés utáni felülúszójával oltottunk egércsoportokat i.cer.-an. A LCM virus visszanyerését az egerekben a jellemző idegrendszeri tünetek és elhullás alapján állapítottuk meg. Eredmények Felnőtt egerekben 100-2000 pg/kg közötti dózisokkal végzett egyszeri intraperitoneális előkezelés nem befolyásolta az LCM vírusfertőzés lefolyását. Szopós egerekben 100-1000 jug/kg között vizsgáltuk a hatást. A nagyobb dózisú előkezelések (500 és 1000 jug/kg CDM) 19%-kal emelték a limfocitás choriomeningitisben való elhullást. A vizsgált rendszerben tehát a CDM immunmoduláns hatást mutat, vagyis a celluláris immunválasz-képesség fokozását eredményezi. Mivel ezen hatás csak a szopós egereknél jelentkezett, ez egyben azt jelenti, hogy a CDM szopós egereknél elősegíti az immunrendszer érési folyamatát. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 17
