199897. lajstromszámú szabadalom • Eljárás tisztított dezacetoxi-cefalosporin C-szintetáz enzim előállítására
(19) Országkód: HU SZABADALMI LEÍRÁS (11) Lqjstromszám: 199897 B (22) Bejelentés napja: 1987.09.09. (22) (4023/187) (30) Bejelentés elsőbbsége: US 1986.09.10. (905 601) (40) Közzététel napja: 1988.03.28. (51) Int Cl5 C 12 N 9/90 MAGYAR KÖZTÁRSASÁG ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL (45)Megadás meghirdetésének dátuma a Szabadalmi Közlönyben: 1990.03.28. (72) Feltalálók: Yeh Wu-Kuang, Dotzlaf Joe Edward, Greenwod, Indiana. US (73) Szabadalmas: Eli Lilly and Company, Indianapolis, Indiana, US (54) Eljárás tisztított dezacetoxi-cefalosporin-C-szintetáz enzim előállítására (57) KIVONAT A találmány tárgya eljárás tisztított dezacetoxi-cefalosporin-C-szintetáz enzim előállítására. A találmány szerinti eljárást az jellemzi, hogy i) proteázgátlót, pH = 7,8 kémhatású puffert és GEDA-t tartalmazó sejtmentes, nyers vizes enzimkivonatot gyenge anioncserélő gyantára visszük, az enzimet GEDA-t tartalmazó kálium-klorid vagy nátrium-klorid, vagy Tris-HCI grádienssel eluáljuk, majd ii) az i) lépésből származó, az enzimet tartalmazó eluátumot keresztkötéses poliszáét haridgélen szűrjük, a gélt GEDA-val mossuk, és iii) az ii) lépésből származó, az enzimet tartalmazó szűrletet hidroxilapatitra visszük és az enzimet GEDA-t tartalmazó kálium-foszfát grádienssel eluáljuk. A GEDA jelentése: 5-15% glicerin vagy szaccharóz, 5-15% 1-3 szénatomszámú egyértékű alkohol, 1 - 20 mM koncentrációban szulfhidrilcsoportot tartalmazó redukálószer és 1 - 20 mM koncentrációban aszkorbát. A leírás terjedelme: 9 oldal, 4 ábra HU 199897 B