199881. lajstromszámú szabadalom • Eljárás vazopresszin antagonista hatású új bázikus peptidek előállítására
1 HU 199881 B 2 A találmány tárgya eljárás vazopresszin antagonists hatású új, bázikus gyűrűs hepta- és hexapeptidek előállítására. E gyűrűs peptidek közelebbi szerkezete a következő: egy l-(/?-merkapto-/?,0-cikloalkilén)-propionsav molekulából és 5 aminosavból képzett, 6 egységből álló gyűrű 1 risztéin egységből és 1, a propionsav egységből származó kénatomot tartalmaz, és a gyűrűnek a 6-cisztein egységéhez közvetlenül vagy egy másik aminosavon keresztül amidkötéssel kapcsolódó megkülönböztető Mzikus amino-alkil vagy guanidino-alkil lánca van. M. Manning, W. H. Sawyer és munkatársaik közlemények sorozatát adták közre, melyekben különféle [ l-(//?-merkapto-/3,/?-ciklopentametilén/-propionsav), 4-valin]-arginin-vazopresszin antagonists hatással bírnak. E vegyületek mindegyike a diszulfid gyűrű 6. egységéhez kötődő peptid láncot tartalmaz. A találmány szerint előállított vegyületek ezekből abban különböznek, hogy olyan hexapeptidek, amelyek 6. egységéhez bázikus lánc kapcsolódik. A találmány szerint előállított vegyületek is hatásos vazopresszin antagonisták. A leírásban és az igénypontokban a peptid- és vazopresszin-kémiában szokásosan használt nomenklatúrát alkalmazzuk. Ha a konfigurációt nem jelöljük meg, az aminosav egységek L konfigurációjúnak, illetve a természetben előforduló konfigurációjúnak tekintendők. Egyes képletekben a Cap és a Cys egységek kénatomját az áttekinthetőség kedvéért külön feltűntetjük. Az egyes peptidek jelölésére szolgáló, a leírásban használt rövidítések jelentése a következő: Pmp, l-(/Mnerkapto-/?,/J-ciklopentametilén)-propionsav; Tyr (Alk), O-Alk-tirozin; Cad, kadaverin; Put, putreszcin; Put(G), l-amino-4-guanidino-bután; Tos, tozilát; BHA, benzhidril-amin; DIEA, diizopropil-etil-amin; 4-MeBzl, 4- -metil-benzil; TFA, trifluor-ecetsav; DCC, ciklohexil-karbodiimid; Boc, terc-butil-oxi-karbonil; Z, benzil-oxi-karbonil; VSP, vazopresszin; HBT, hidroxi-benzotriazol; ACM acetamido-metil. Az "Alk" jelölés jelentése 1 — 4 szénatomos alkilcsoport. Ilyen helyettesítők lehetnek a metil-, etil-, n-propil-, izopropil- vagy butilcsoport, előnyös az etilcsoport. A "vazopresszin" megjelölésen más megjelölés híján mindig L-arginin vazopresszint (AVP) értünk. A találmány szerint előállított bázikus vazopresszin-szerű vegyületek az (I) általános képlet alá tartoznak. A képletben A jelentése -NH-(CH2)„-NH2 vagy -NH(CH2)„-NH-C( - NH)-NH2; X jelentése D-Tyr vagy D-Tyr(Alk); P jelentése L-Pro vagy vegyértékkötés és n értéke 2 — 7. A találmány szerint előállított vegyületek alcsoportját képezik azok az (I) általános képletű vegyületek, amelyekben az n helyettesítő értéke 5, ez a kadáverint tartalmazó csoport. Az (I) általános képletű vegyületeket az 1. reakcióvázlat szerint állítjuk elő a (IV) általános képletű vegyületen gyűrűzárást végezve, majd a kapott (II) általános képletű vegyületet H2N(CH2)„-NH2 vagy (III) általános képletű vegyülettel reagáltatva. A képletekben X, n és P jelentése az előzőekben az (I) általános képletű vegyületnél megadott A Pmp természetesen az (I) általános képletben 1-helyzetben szereplő egység. A (III) és (IIP) általános képletű dibázisos vegyületet, ha szükséges, egy vagy két bázisos centrumán védett formában alkalmazzuk a reakcióban. A vegyületet például célszerűen Boc származéka formájában reagáltatjuk. Ha guanidinocsoport van a vegyületben, a (III) általános képletű vegyületet szakember számára ismert módon tozilátszármazék formájában reagáltatjuk. Ugyancsak alkalmazhatók más, a szakember számára ismert amino-védő-csoportok is. A (II) általános képletű karbonsav és a (III), iletve (IIP) általános képletű bázis reagáltatását bármely, a peptidkémiában szokásosan amidképzésre alkalmazott eljárással végezzük. Például reagáltathatjuk a két kiindulási anyag lényegében ekvimoláris mennyiségét karbodiimid, például diciklohexil-karbodiimid és 1-hidroxi-benzotriazol jelenlétében, szerves oldószerben szobahőmérsékleten a reakció teljes lezajlásáig. Ezután a védőcsoportokat ismert módon eltávolítjuk. A guanidinocsoport védelmére felvitt tozilátot például trifluor-metánszulfonsav vagy trifluor-ecetsav és anizol jelenlétében szobahőmérsékleten reagáltatva, az aminocsoport védelmére felvitt Boc védőcsoportot pedig trifluorecetsawal hidegen reagáltatva távolítjuk el. A guanidinocsoportot tartalmazó vegyületek előállíthatók az aminocsoportot tartalmazó megfelelő vegyületből az utóbbinak O-metil-izoureá- ■ val való közvetlen reagáltatásával. A reagáltatást általában enyhén bázikus pH-n, vizes oldatban, hidegen végezzük a reakció teljes lezajlásáig. A (II) általános képletű kiindulási anyagok új vegyületek, maguk is vazopresszin antagonista hatásúak, bár jóval nagyobb dózis alkalmazása szükséges belőlük, mint az (I) általános képletű vegyületekből. A (II) általános képletű vegyületeket a (IV) általános képletű lineáris heptapeptidből — ahol X és P jelentése az (I) általános képletre az előzőekben megadott, oxidációval állítjuk elő. A merkaptocsoportok a Pmp és a Cys egység részei. A (IV) általános képletű vegyület oxidálását alkálifém-ferricianid, például kálium- vagy nátrium-ferricianid feleslég alkalmazásával végezzük. A reakció végrehajtásához közömbös oldószert, előnyösen vízzel elegyedő oldószert alkalmazunk semleges, 7 — 7,5 körüli pH-n. A reagáltatást szobahőmérsékleten vagy annál alacsonyabb hőmérsékleten végezzük, amíg a reakció lényegében lezajlik. Előnyösen mind a lineáris peptiddimerkaptán, mind az oxidálószer koncentrációja alacsony, például néhány liter vizes oldatban 1 — 5 g dimerkaptánon 0,01 — 0,1 mól/1 koncentrációban jelenlévő oxidálószerrel hajtjuk végre a gyűrűzárást. Más, a ferrocianiddal közel azonos oxidációs potenciállal bíró gyenge oxidálószerek is alkal5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 2
