199880. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 15-ös helyzetben levő lizin helyén más aminosavakat tartalmazó aprotinin homológok és ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
1 HU 199880 B 2 2. Táblázat Szemikvantitatív adatok néhány fontos proteináznak néhány, a jelen találmány szerint előállított aprominhomológgal történő gátolható&ágáról* Az inhibitor 15 helyzetében lévő aminosav Kimotripszin Katepszin Granulocita kollagenáz granulocita Enzim Elaszláz hasnyálmirigy Kallikrein Trip- Plaz- Xa szín min faktor Lys + + ( + ) _ ( + ) + + + ++++++ -(Aprotinin) Gly + + n.m. n.m. _ + + + + -1- + n.m. n.m. Alá + n.m. + + + + + + + n.m. n.m. Met + + + + + n.m. + +-f + n.m. n.m. Val + n.m. + + + + + + + n.m. n.m. Leu + + + + + n.m. + + + + + + + + n.m. n.m. Arg + + ( + ) n.m. ( + ) — + + + + + + + + + + - = nincs gátlás; + = gyenge gátlás; + + * erős gátlás; + + + = nagyon erős gátlás; n.m. « nincs meghatározva; ( + ) = van affinitás az enzimhez. Kísérletek a gyuUadásgátló hatás bizonyításé- 25 ra patkányon a) Kaolin kiváltott gyulladási reakció A gyulladási reakciót 0,2 ml 10%-os kaolinszuszpenziónak 130-160 g súlyú wistar patkányok egyik hátsó talpába történő intraplantáris 30 injektálásával váltottuk ki. A gyulladási reakció kezelésére alkalmazott jelen találmány szerinti aprotinin homológokat 0,9%-os nátrium-klorid oldatban 10 — 20 mg/ml koncentrációban oldottuk. A kísérleti állatok kezelése 0,5 —1,0 ml inhi- 3$ bitoroldattal és összehasonlításképpen aprotininnel történt, amelyet intraperitoneális, intramuszkuláris, szubkután vagy intravénás injekcióként adtunk, vagy prophylactikusan, azaz a gyulladási kór kiváltása előtt, vagy terápiásán, azaz a 40 gyulladási kór kiváltása után. A begyulladt talp domborodását, amely a gyulladási reakció súlyosságának mértéke Kemper szerint antiphlogméterrel [F. Kemper és G. Ameln, Z. ges. exp. Med. 131,407-411 (1959)] követtük időben. 45 A dózis-hatás összefüggésének kiértékelésére a gyulladási kór kiváltása után 4 órával mért értékeket használtuk fel. b) Aeroszillel kiváltott gyulladási reakció A gyulladási reakciót 0,1 ml 2%-os aeroszil- 50 szuszpenziónak, 130 — 160 g súlyú wistar-patkányok egyik hátsó talpába történő intraplantáris injektálásával váltottuk ki. A gyulladási reakció kezelésére alkalmazott, a jelen találmány szerint előállított aprotinin homológokat, illetve az ap- 55 rotinint 10-20 mg/ml koncentrációban, 0,9%-os nátrium-klorid oldatban oldottuk. A kísérleti állatok kezelése 0,5-1,0 ml inhibitor, illetve összehasonlításképpen aprotinin oldat intraperitoneális, szubkután, vagy intravénás injektálásá- 60 val történt, a gyulladási kór kiváltása után 15 órával. A begyulladt talp domborodását, amely a gyulladási reakció súlyosságának a mértéke, Kcmper-féle antiphlogméterrel időben követtük. A dózis-hatás összefüggések kiértékeléséhez 65 a gyulladás kiváltása után 21 órával mért értéket ( = 6 órával a jelen találmány szerinti aprotinin homológok, illetve az aprotinin beadása után mért érték) használtuk. Az új inhibitorokkal végzett, a példákban bemutatott terápiás kísérletek eredményei az alkalmazott aprotinin-homológok hatékonyságát mutatják ezen a kísérleti modellen, amelyen azonos dózisban az aprotinin nem gátolja a gyulladási reakciót. Az új inhibitorok biológiai hatékonyságuk alapján különösen a következő betegségek, illetve betegségtünetek esetén használhatók: 1. a sokk különböző formáiban, különösen tüdősokk és endotoxinsokk, posttraumás és postoperatív komplikációk, 2. véralvadás zavarai, 3. akut és krónikus gyulladási reakciók, különösen szervsérülések, mint például a pankreatitis és a sugárzás okozta enteritis, terápiája és megelőzésére, immunkomplexfüggő gyulladási reakciók, mint az immunvasculitis, glomerulonephritis és ízületi gyulladások, collagen betegségek, különösen rheumatoid arthritis, 4. anyagcserétől függő lerakódások okozta ízületi gyulladások (például köszvény), 5. a szerves kötőszöveti állománya elasztikus részeinek degenerációja, például atherosklerosis, vagy tüdőemphysema esetén, 6. sugárzás okozta enteritis. Az új hatóanyagok ismert módon (az aprotininhez hasonlóan) a szokásos gyógyszerformákká alakíthatók. A következő gyógyszerformákat nevezzük meg előnyösként; 1. Oldatok parenterális alkalmazásra, intravénás, intramusculáris, szubkután injekcióhoz, illetve intraartikuláris és intratumorális injekcióhoz. 2. Oldatok intravénás tartós infúzió céljára. 3. Oldatok aeroszolként inhalációs célra tör-8
