199878. lajstromszámú szabadalom • Eljárás acilezett splenopentinek és a vegyületeket hatóanyagként tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
1 HU 199878 B 2 1,05 g védett Nu-acetil-splenopentint kapunk. Kitermelés: az elméleti 96,2%-a. 3.2 A védőcsoport lehasftása A védett acetil-peptidet 90%-os ecetsavban szuszpendáljuk és palládium/szén katalizátor jelenlétében hidrogénezzük. Kitermelés: 760,8 g Na-acelil-SP5 x 2HOAc, az elméleti 95,6%-a. Molekulatömeg: 855,94. Összegképlet: Ö37H6iN<jOj4. Rf* 0,30 (N-butanol:jégecet:etilacetát:víz 1:1:1:1 arányú keverékével). 4. példa Diacetilezett splenopentinek előállítása 4.1. példa (N—-Acetil-arginilHN--acetil-liziD-glutamil-valil-tirozin (DAC-SP5) előállítása 4.1,1 DAC-SP5 szintézise SP5 és N-acetoxi-norborn-5-én-2.3-karboximid reakciójával 43,7 g (50 mmól) Arg-Lys-Glu-Val-Tyr-OH x 3HOAc-t (SP5)-t 150 ml vízben oldunk és hozzáadjuk 33,2 g (150 mmól) acetil-ONB 100 ml dimetil-formamiddal készített oldatát. Dimetil-forraamidot adunk a reakcióelegyhez mindaddig, amíg homogén oldat keletkezik. Az elegyet egy órán keresztül szobahőmérsékleten keverjük (DC-kontroll), majd az oldószert vákuumban eltávolítjuk és a maradékot éterrel vagy etil-acetáttal eldörzsöljük. A szilárd anyagot leszűrjük, éterrel mossuk és vákuumban kálium-hidroxid felett szárítjuk. Kitermelés: 38,4 g DAc-SP x HOAc, az elméleti 92%-a. Híg sósavból végzett liofilizálással a megfelelő DAc-SP5 x HCl x 2H2Ot kapjuk. Molekulatömeg: 850,39. Összegképlet: C^H^NgO^Cl számított: C: 49,43, H: 7,11, N: 14,83%, talált: C: 48,62, H: 7,26, N: 14,00%. 4.1.2. DAc-Sp5 szintézise SP5 és 1-acetoxi-benzotriazol (acetil-OBt) reakciójával Az SP5 és az acetil-OBt reakcióját és a reakcióelegy feldolgozását a 4.1. példában leírtakkal analóg módon végezzük. Kitermelés: az elméleti 90%-a. Rf * 0,52 (N-butanol:jégecet:etil-acetát:víz 1:1:1:1 arányú keverékével). A kapott vegyületet 1 n nátrium-hidroxiddal titráljuk, a sót eltávolítjuk és liofilizálást végzünk, így a szabad pepiidet, a DAc-SP5-t kapjuk. Molekulatömeg: 777,87. Összegképlet: CmHssNçOh. Rf= 0,52 (N-butanol:jégecet:etil-acetát-víz 1:1:1:1 arányú keverékével). 4.2. példa (N£-Acetil-arginil)(N--acetil-lizil) glutamil-valil-tirozin-amid (DAc-SP5-NH->) előállítása 4,06 g (5 mmól) Arg-Lys-Glu-Val-Tyr-NH2x2HOAc-t 15 ml vízben oldunk, és hozzáadjuk 3,32 g (15 mmól) acetil-ONB 10 ml dimetil-formamiddal készített oldatát. A reakcióelejjyet 1 órán keresztül szobahőmérsékleten keverjük (DC-kontroll), majd az oldószert vákuumban ledesztilláljuk, és a maradékot etil-acetáttal és dietil-éterrel mossuk, majd vákuumban, kálium-hidroxid felett szárítjuk. Kitermelés: 3,93 g (DAc-SP5-NH2HOAc, az elméleti 94%-a. Molekulatömeg: 836,9. összegképlet: C37H60N,0O12. Rf= 0,44 (N-butanol: :jégecet:etil-acetát:víz 1:1:1:1 arányú keverékével). A kapott vegyületet nátrium-hidroxiddal titráljuk, a sót eltávolítjuk és liofilizáljuk. Így a szabad pepiidet, a DAc-SP5-NH2-t kapjuk. Molekulatömeg: 776,8. Összegképlet: C35H56N1o010. Rf* 0,44 (N-butanol:jégecet: :etil-acetát:víz 1:1:1:1 arányú keverékével). 4.3. példa (N^-Acetil-arginilKNl-acetil-lizil) glutamil-valil-tirozin-etil-észter (DAc-SP5-OEt) előállítása 4,21 g (5 mmól) Arg-Lys-Glu-Val-Tyr-OEt x 2HOAc-t 15 ml vízben oldunk, és hozzáadjuk 3,32 g (15 mmól) acetil-ONB 10 ml dimetil- for mamiddal készített oldatát. A reakcióé legyet 1 órán keresztül szobahőmérsékleten keverjük (DC-kontroll). Az oldószert ezután vákuumban ledesztilláljuk, és a maradékot etil-acetáttal eldörzsöljük. A szilárd anyagot leszűrjük, etil-acetáttal és éterrel mossuk, majd vákuumban, kálium-hidroxid felett szárítjuk. 4,11 g DAc-SP5-OEt x HOAc-t kapunk. Kitermelés: az elméleti 95%-a. Molekulatömeg: 866,0. Összegképlet: C39H63N9Oi3. Rf* 0,60 (N-butanol:jégecet:etil-acetát:víz 1:1:1:1 arányú keverékével). A kapott vegyületet 1 n nátrium-hidroxiddal titráljuk, a sót eltávolítjuk és liofilizáljuk. így a szabad peptidet, a DAc-SP5-OEt-t kapjuk meg. Molekulatömeg: 805,9. Össszegképlt: C37H59N9Ou. Rf= 0,60 (n-butanol:jégecet:etil-acetát:víz 1:1:1:1 arányú keverékével). 5. példa (N^-Palmitoil-arginil)-lizil-glutamil-valil-tirozin (q-MPal-SP5) előállítása 5 1 Acilezés 1,16 g (1 mmól) H-Arg(N02)-Lys(Z)-Glu(OBzl)-Val-Tyr-OBzl x TFA-t 5 ml dimetil•formamidban oldunk, majd hozzáadunk 120 mikroliter N-metil-morfolint (vagy más tercier-amint), és 0,626 g (1,2 mmól) palmitinsav-(N-oxi-norborn-5-én-2,3-dikarboximid)-észterrel reagáltatjuk. A reakcióelegyet a 3.1. példával analóg módon dolgozzuk fel, majd etanol/éterből átkristályosítjuk. így 1,21 g védett Na-palmitoil-splenopentint kapunk. Kitermelés: 94,3%. 5.2 A védőcsoport lehasftása A védett palmitoil-peptidet 90%-os ecetsavban szuszpendáljuk és palládium/szén katalizátor jelenlétében hidrogénezzük. Kitermelés: 920 mg Na-Pal-SP5 x 2HOAcc, az elméleti 92,7%-a. Molekulatömeg: 1052,32. Összegképlet: C5iHg9014N9. Rf * 0,66 (N-butanol:jégecet:etil-acetát:víz 1:1:1:1 arányú keverékével). A kapott vegyületet 1 n nátrium-hidroxiddal titráljuk, a sót eltávolítjuk és liofilizálást vég5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 5
