199870. lajstromszámú szabadalom • Eljárás vírusellenes hatású purin-arabinozid származékok és az ezeket tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására

1 HU 199870 B 2 A hatóanyagot a glikofuroloan oldjuk, ekkor hozzáadjuk a benzil-alkoholt és oldjuk, valamint a vizet 3 ml térfogatra. A keveréket ekkor steril mikropórusos szűrőn szűrjük és steril 3 ml-es sárga üvegfiolába töltjük (1. típus). 51. példa Szirup szuszpenzió Hatóanyag 0,2500 g Szorbitol oldat 1,5000 g Gliccrol 2,000 g Diszpergálható cellulóz Illatanyag: barack 0,0750 g 17.42.3169 0,0125 ml Tisztított víz 5 ml-ig A nátrium-benzoátot a tisztított víz egy részé­ben oldjuk és hozzáadjuk a szorbitol oldatot, majd a hatóanyagot és diszpergáljuk. A glicerol­­ban diszpergáljuk a sűrítőanyagot (a diszpergál­­ható cellulózt). A két diszperziót összekeverjük és a kívánt térfogatra tisztított vízzel kiegészít­jük. A szuszpenzió további nyírása révén további sűrítést lehet elérni. 52. példa Kúpok mg/kúp Hatóanyag (63 mikrométer)* 250 Kemény zsír, BP (Witepsol H15 — Dynamit Nobel terméke) 1700 1950 * - A hatóanyagot porként használjuk, a ré­szecskék legalább 90%-a 63 mikrométer átmérő­jű vagy annál kisebb. A Witepsol H15 egyötöd részét gőzköpennyel ellátott edényben legfeljebb 45 °C-on megol­vasztjuk. A hatóanyagot egy 200 mikrométeres szitán keresztül szitáljuk és az olvasztott bázis­hoz adjuk keverés közben vágófejjel ellátott ké­véről alkalmazva. így finom diszperziót készí­tünk. A keveréket 45 °C-on tartva hozzáadjuk a szuszpenzióhoz a maradék Witepsol H15-öt és homogén elegy eléréséig keverjük. A teljes szuszpenziót átnyomjuk egy 250 mikrométeres rozsdamentes acélszűrőn és folyamatos keverés közben 40 °C-ra hűtjük. 38 és 40 °C közötti hő­mérsékleten a keverékből 2,02 g-ot alkalmas mű­anyagformákba töltünk. A kúpokat szobahőmér­sékletre hűljük. 53 53, példa Pesszáriumok_________________mg/pesszárium Hatóanyag, 63 mikrométeres 250 Dextróz-anhidrát 380 Burgonyakeményítő 363 Magnézium-sztearát 7 1000 A fenti alkotórészeket közvetlenül összeke­verjük és a kapott elegy közvetlen kompresszió­jával készítjük a pesszáriumokat. Farmakológia! vizsgálatok Antivirális toxicités és asszimilálhatóság meg­határozása Anti-Varicella zoster vírus aktivitás meghatá­rozása A vegyületeknek a VZV (Okas törzs) repliká­­ciójára gyakorolt inhibitor hatását a következő­képpen módosított ELISA eljárással állapítjuk meg (F.E. Berkowitz és M J. Levin: Antimicrob. Agents and Chemother. 28, 207 - 210 /k875/): Az infekciót a hatóanyag jelenlétében végez­zük, nem a hatóanyag adagolása előtt. A ható­anyagot és a vírist a nem fertőzött sejtekkel (hu­mán diploid fibroblaszt, MRC —5 törzs) három napig inkubáljuk, majd a 96-vizsgálati (plaque) lapot 5 percig 200 x g-vel centrifugáljuk, hogy ülepítsük az elkülönített sejteket a glutár-aldehi­­des rögzítést megelőzően. Ez az ELISA második antitestként alkáli-foszfatázhoz kapcsolódó anti­­humán IgG-t alkalmaz. A p-nitro-fenil-foszfát kötött alkáli-foszfatáz általi hasítási sebességét más helyen ismertetett módszerrel állapítjuk meg (S.M. Tadepalli, R.P. Quinn és D. R. Averett: Antimicrob. Agents and Chemother, 29, 93-98 /1986/). A nem fertőzött sejteket használjuk az összehasonlító reakciósebességek meghatározására, amelyeket kivonunk a vírus je­lenlétében kapott sebességekből. Ezzel a kísér­lettel leszármaztatott vírus detektálása olyan kultúrákban lehetséges, amelyek eredetileg egyenként 15 — 3600 infakciós részecskével vol­tak fertőzve. Nem fertőzött emlős sejt növekedési inhibf­­ciójának meghatározása A vizsgált vegyületek D 98 sejtek (humán) és L sejtek (patkány) növekedésének gátlására gya­korolt képességét úgy határozzuk, hogy egy adott számú sejtet különböző hígítású vegyüle­­tekkel három napig együtt tartunk, majd megha­tározzuk a sejtek számát (J. L. Rideout, T.A. Krenitsky, G. W. Koszalka, N. K. Cohn, E. Y. Chao, G. B. Elion, V. S. Latter és R. B. Williams: J. Med. Chem., 25, 1040-1044 /1982/). Ezt a sejtszámot összehasonlítjuk a ve­gyületek nélkül kapott sejtszámmal. A sejtszám­lálást végezhetjük a monolayer tripszines kezelé­sét követő közvetlen részecskeszámlálással, vagy a sejtek által felszívott vitális gramm mennyisé­gének spektrofotometriás meghatározásával. A két módszerrel összehasonlítható eredményeket kapunk. Adatelemzés A kontroll értékek 50%-ban kapott vegyület­­koncentrációt (IC50) vagy direkt interpolálással számítjuk a kontroll értékek százalékában felvett vegyületkoncentráció logaritmusa grafikonjából vagy computer program segítségével, amely ugyanezen algoritmus szerint elemzi az adato­kat. Ezekhez a számításokhoz a kontroll 20%-a és 80%-a közötti adatokat használjuk fel. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 19

Next

/
Thumbnails
Contents