199859. lajstromszámú szabadalom • Eljárás piridazodiazepinek és ezeket tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
HU 199859 B 2 bahőmérsékletnél alacsonyabb hőmérsékleten hajthatjuk végre. így pl. borán/tetrahidrofiirán komplex felhasználása esetén tetrahidrofuránban, kb. 0-20 ’C-os hőmérsékleten dolgozhatunk. Az alkanoilcsoportot a korábbiakban leírt módszerekkel hasíthatjuk le. Az X1 helyen oxigénatomot és R30 helyén aralkilcsoportot tartalmazó (IV) általános képletű vegyületeket oly módon állíthatjuk elő, hogy a megfelelő, X1 helyén oxigénatonot és R30 helyén alkilcsoportot tartalmazó (IV) általános képletű vegyületet szabad karbonsavvá alakítjuk és ezt a vegyületet észterezzük. Az X1 helyén oxigénatomot és R30 helyén alkilcsoportot tartalmazó (IV) általános képletű vegyületet pl. bázissal vagy - tercier butil-észter esetében - savas kezeléssel alakíthatjuk a szabad karbonsavvá (R30 jelentése hidrogénatom). Bázisként pl. alkálifém-hidroxidokat (pl. nátrium- hidroxidot, káliumhidroxidot) vagy ammónium-hidroxidot alkalmazhatunk és a bázikus kezelést szobahőmérséklet és a reakcióelegy forráspontja közötti hőmérsékletenhajthatjuk végre; előnyösen szobahőmérsékleten dolgozhatunk. Az R30 helyén tercier butilcsoportot tartalmazó észtereket előnyösen vízmentes trifluor-ecetsawal, szobahőmérsékleten végzett kezeléssel alakíthatjuk a megfelelő szabad karbonsavakká. A kapott karbonsavat önmagukban ismert módszerekkel észterezhetjük; így pl. a megfeleled alkohollal (pl. benzil- alkohollal stb.) ásványi sav (pl. sósav) jelenlétében kezelhetjük vagy a megfelelő diazoalkánnal (pl. fenil-diazometánnal) reagáltathatjuk. A b) eljárásnál kiindulási anyagként felhasznált, X1 helyén -NH- csoportot tartalmazó (IV) általános képletű vegyületek ismertek. A b) eljárásnál kiindulási anyagként felhasznált (V) általános képletű vegyületek ismertek vagy ismert vegyületekkel analóg módon állíthatók elő. A c) eljárásnál kiindulási anyagként felhasznált (VI) általános képletű vegyületek ismertek vagy ismert vegyületekkel analóg módon állíthatók elő. Az R3 helyén alkilcsoportot tartalmazó vegyületek a (Via) általános képletnek felelnek meg. Az R3 helyén hidrogénatomot tartalmazó (VI) általános képletű vegyületeket a (Via) általános képletű vegyületekből önmagában ismert módon, bázissal történő kezeléssel vagy - R31 helyén tercier butilcsoportot tartalmazó (Via) általános képletű vegyületek esetében - vízmentes trifluorecetsavval állíthatjuk elő. Az R3 helyén aralkilcsoportot tartalmazó (VI) általános képletű vegyületeket a megfelelő, R3 helyén hidrogénatomot tartalmazó (VI) általános képletű vegyületekből önmagában ismert módon végzett észterezéssel állíthatjuk elő. Az észterezést a megfelelő alkohollal (pl. benzil-alkohollal stb.) ásványi sav (pl. sósav stb) jelenlétében vagy a megfelelő diazo-alkánnal (pl. fenil- diazometánnal) hajthatjuk végre. A c) eljárásnál felhasznált (VII) általános képletű kiindulási anyagok ismert vegyületek vagy ismert vegyületekkel analóg módon állíthatók elő. Az (I) általános képletű vegyületek értékes antihipertenzív hatással rendelkeznek. Ezek a vegyületek gátolják az angiotenzin I-t angiotenzin Il-vé átalakító angiotenzin-átalakító enzim (ACE) működését és ezért angiotenzinnel összefüggő hipertenzió csökkentésére vagy enyhítésére alkalmazhatók. Az (I) általán«» képletű vegyületek angiotenzinátalakító enzim gátló hatását az alábbi in vitro teszttel igazoljuk: Az alkalmazott teszt-módszer Cushman és Cheung módszerén alapul (Biochem. Pharmacol. 20, 1637— 1648) és tartalmazza a Hayakari és tsai (Anal. Biochem. 84, 361-369) által bevezetett módosításokat. A szubsztrátumot (hippuril-hisztidil-leucin, 2 millimól) angiotenzin-átalakító enzimmel inkubáljuk különböző koncentrációkban jelenlévő teszt-vegyület jelenlétében vagy anélkül. A teszt-vegyületet 300 millimól nátrium-kloridot tartalmazó kálium-foszfát-pufferben (pH 8,3; 100 millimól) alkalmazzuk. Az inkubálást 37 °C-on 24 percen át végezzük (összérték 500 pl). (Amennyiben teszt-vegyületként egy talámány szerinti észtert alkalmazunk, ezt a teszt elvégzése előtt célszerűen lahasítjuk, sertésmáj-észteráz segítségével.) A reakciót 3 ml kálium-foszfát-puffer (pH 8,3; 200 millimól) 0 °C- on való hozzáadásával leállítjuk. Az elegyhez 2,4,6-triklór-sz-triazin (3 %) 1,5 ml dioxánnál képezett oldatát adjuk és a sárga kromofor teljes kialakulásáig keverjük. A mintákat a képződő csapadék eltávolítása céljából centrifugáljuk. A 2,4,6-triklórsz-triazin és a szabad hippursav reakciójakor képződő sárga kromofort spektrofotometriásán 382 nm mellett mérjük. IC50 értéknek a teszt-vegyület azon koncentrációját tekintjük, amely a hippuril-hisztidil-leucinnak az angiotenzin-átalakító enzim által a fenti körülmények között bekövetkező hasítását 50 %-kal csökkenti. A kapott eredményeket az I. táblázatban foglaljuk össze. /. táblázat A tesztben alkalmazott vegyület IC50 (nM) A-vegyület 5,0 B-vegyület 2,4 A-vegyület=9(S)-{[hidroxi-(fenetil)-foszfínil]-amino ) -oktahidro-10-oxo-6H-piridazo[ 1,2- -a] [ 1,2]diazepin-1 (S)-karbonsav-dinátriumsó; B-vegyület=9(S)-[hidroxi-(4-fenil-butil)-foszfinil]-oktahidro-10-oxo-6H-piridazo [ 1,2-a] [ 1,2]diazepin-1 (S)-karbonsav-dikáliumsó. Az (I) általános képletű vegyületeket a gyógyászatban a hatóanyagot és inert kompatibilis gyógyászati hordozóanyagokat tartalmazó gyógyászati készítmények alakjában alkalmazzuk. Szerves vagy szervetlen, enterális (pl. orális)vagy parenterális adagolásra alkalmas hordozóanyagokat alkalmazhatunk, így pl. vizet, zselatint, gumiarábikumot, laktózt, keményítőt, magnézium- sztearátot, talkumot, növényi olajokat, poli(alkilén-glikolokat), vazelint stb. A gyógyászati készítmények szilárdak (pl. tabletta, drazsé, kúp vagy kapszula) vagy folyékonyak (pl. oldat, szuszpenzió vagy emulzió) lehetnek. A gyógyászati készítmények szokásos gyógyszeripari műveleteknek (pl. sterilezés) vethetők alá és/vagy adjuvánsokat (pl. tartósító-, stabilizáló-, nedvesítő- vagy emulgálószereket, az ozmózisnyomás változását előidéző sókat és puffereket), továbbá adott esetben gyógyászatiig értékes további anyagokat tartalmazhatnak. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 6
