199786. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a magas vérnyomás kezelésére használható peptid-származékok előállítására
1 HU 199786 B 2 4. lépés 3-Merkapto-2-D-metil-propionsav A benzoilcsoportot a 11. példa 2. lépésében leírt módon lehasítva, a cím szerinti vegyülethez jutunk. 5. lépés 3-(Na-Benzoil-L-fenil-alanil-merkapto)-2-D-metil-propionsav A 11. példa 3. lépésében leírt módon eljárva, és a jelen eljárásváltozat 4. lépésének termékéből kiindulva állítjuk elő a cím szerinti vegyületet. 6. tépés Na-[3-(Na-Benzoil-L-fenil-alanil-merkapto)-2- -D-metil- propanoil]-L-prolin A cím szerinti vegyületet a 11. példa 5. lépésében leírt módon állítjuk elő. 26. példa ac) módszer 1. lépés 3-Benzoil-merkapto-2-D-metil-propionsav-tercier-butil-észter 25 mmól 3-benzoil-merkapto-2-D-metil-propionsav diklór-metánnal készült, 0,5 ml tömény kénsavat tartalmazó oldatába keverés közben, 1 órán át izobutilént vezetünk, majd a reakcióedényt lezárjuk, és az elegyet 16 órán át keverjük. Ezután dietil- éterrel kirázzuk, és a szerves részről az oldószert forgó rendszerű desztilláló készüléken ledesztilláljuk, majd a maradékot nagymértékben csökkentett nyomáson megszárítjuk. 2. lépés 3-Merkapto-2-D-metil-propionsav-tercier-butil-észter Az 1. lépés termékét nitrogén-atmoszférában feloldjuk metanolos ammónia-oldatban. 1 óra múlva az oldószert ledesztilláljuk, a maradékot dietil-éterben feloldjuk, és az oldatot jeges fürdőben hűtve 0,1 n sósavval, majd telített nátrium-klorid-oldattal mossuk. Ezután a szerves részt vízmentes magnézium-szulfáton megszárítjuk, a szárítószert kiszűijük, és az oldószert forgó rendszerű desztilláló készüléken ledesztilláljuk. A maradékot csökkentett nyomáson desztillálva, a cím szerinti vegyülethez jutunk. 3. lépés 3-(Na-Benzoil-L-fenil-alanil-merkapto)-2-D-metil- propionsav-tercier-butil-észter a) 1) Aktív észter előállítása 25 mmól Na-benzoil-L-Phe kétszer desztillált etilacetáttal készült oldatát jég-szárazjég-metanol fürdőben, -20 °C hőmérsékletre hűtjük. [Az Na-benzoil- L-Phe-t a 128.953. számú amerikai szabadalmi bejelentésben leírt módon, például Carter és munkatársai módszerével: J. Biol. Chem. J38, 627 (1941), állítjuk elő]. A fenti oldathoz hozzáadunk 25 mmól N- etil-morfolint, majd 25 mmól klórhangyasav-izobutil-észtert, majd az elegyet néhány percig -15 °C hőmérsékleten keverve, hozzáadunk 50 mmól N-hidroxi-szukcinimidet. A reakcióelegyet másfél órán át -15 "C hőmérsékleten keverjük. 2) Aktív észteres kapcsolási módszer A fenti reakcióelegyet hagyjuk lassan szobahőmérsékletre melegedni, és hozzáadunk 25 mmól, a 2. lépésben leírt módon előállított 3-merkapto-2-D- metil-propionsav-tercier-butil- észtert. Ezután az elegyet addig keverjük, míg a reakció a vékonyrétegkromatográfiás vizsgálat szerint teljesen le nem játszódik. Utána etil-acetátot adunk az elegyhez, és jeges fürdőben hűtve, 1 n sósavval pH = 3-ra savanyítjuk. Az etil- acetátos részt hideg vízzel, majd hideg, telített nátrium-klorid- oldattal többször mossuk, vízmentes magnézium-szulfáton megszárítjuk, és a szárítószert kiszűrjük. Az oldószert forgó rendszerű desztilláló készüléken ledesztilláljuk, s a maradékot benzol és petroléter elegyéből kristályosítva, a cím szerinti vegyülethez jutunk. b) 25,1 mmól N-etoxi-karbonil-2-etoxi-l,2-dihidrokinolinhoz hozzáadjuk 25 mmól Na-benzoil-L-Phe tetrahidro-furánnal készült oldatát, majd 25 mmól 3-mericapto-2-D-metil-propionsav- tercier-butil-észtert. A reakcióelegyet addig keverjük, míg a reakció a vékonyréteg-kromatográfiás vizsgálat szerint teljesen le nem játszódik. Utána az oldószert forgó rendszerű desztilláló készüléken ledesztilláljuk, és a terméket benzol és petroléter elegyéből kristályosítjuk. 4. lépés 3-(Na-Benzoil-L-fenil-alanil-merkapto)-2-D-metil--propionsav A 3. lépés termékét 4 ml anizolban szuszpendáljuk, hozzáadunk 8 ml trifluor-ecetsavat, és az elegyet másfél órán át szobahőmérsékleten keveijük. A trifluor-ecetsavat és anizolt forgó rendszerű desztilláló készüléken ledesztilláljuk, majd a maradékot nátrium-hidroxid és foszfor-pentoxid mellett nagymértékben csökkentett nyomáson megszárítva, a cím szerinti vegyülethez jutunk. 5. lépés Na-[3-(Na-Benzoil-L-fenil-alanil-merkapto)-2- -D-metil- propánod]-L-prolin a) 25 mmól, a 4. lépésben leírt módon kapott termék, és 25 mmól N-hidroxi-szukcinimid dimetilformamiddal készült oldatához 0 °C hőmérsékleten hozzácsepegtetjük 25 mmól diciklohexil-karbodiimid dimetil-formamiddal készült, lehűtött oldatát. Ezután a reakcióelegyet fél órán át 0 °C hőmérsékleten, majd éjszakán át 4 °C hőmérsékleten keverjük. A kivált diciklohexil-karbamidot kiszűrjük és etil-acetáttal mossuk. A szűrletről az oldószert csökkentett nyomáson ledesztilláljuk, és a maradékot benzol és hexán elegyéből kristályosítjuk. A kristályos terméket feloldjuk hideg tetrahidro-furánban, és az oldathoz hozzáadjuk 25 mmól L- prolin és 25 mmól nátrium-hidrogén-karbonát tetrahidro-furán és víz elegyével készült oldatát. A reakcióelegyet éjszakán át szobahőmérsékleten keverjük, majd a tetrahidro-furánt forgó rendszerű desztilláló készüléken, 35 °C hőmérsékleten ledesztilláljuk. A maradékhoz vizet adunk, és az elegy pH-ját szilárd nátrium-hidrogén-karbonát adagolásával 9-re állítjuk. Ezután a vizes elegyet etil-acetáttal kirázzuk, majd a vizes fázist jeges fürdőben hűtve 1 n sósavval, etil-acetát jelenlétében pH = 2-re savanyítjuk. Az utóbbi etil-acetátos részt hideg vízzel, majd telített nátrium-klorid-oldattal kétszer mossuk, vízmentes magnézium-szulfáton megszárítjuk, és a szárítószert kiszűrjük. Az oldószert forgó 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 26
