199775. lajstromszámú szabadalom • Eljárás aminosavak telítetlen zsírsavakkal képzett sóinak valamint ilyen vegyületeket tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
1 HU 199775 B 2 A találmány tárgya eljárás vírusellenes hatású és immunrendszert stimuláló új sók és ezeket tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására. A co-3 politelítetlen zsírsavak (5,8,11,14,17-eikozapentaénsav (a továbbiakban: EPA) és a 4,7,10,13,16,19-dokozahexaénsav (a továbbiakban: DHA)) kedvező vírusellenes hatására már többen felfigyeltek. In vitro kísérleteiben Szads [Antimicrobial Agents and Chemoterapy 12, 523 (1977)] kimutatta, hogy a politelítetlen zsírsavak, így az EPA és a DHA is képesek meggátolni a vírusreplikáció. Ugyanezt a tényt erősítették meg Reinhardt és munkatársai [J. of Virology 25, 479 (1977)], akik a replikációgátlást PR 4 bakteriofágon vizsgálták. A 4 513 008 sz. amerikai egyesült államokbeli szabadalmi leírás részletesen ismerteti a politelítetlen zsírsavak, ezeken belül is az EPA és a DHA vírusellenes hatását. Állatkísérletekben egéren és tengerimalacon az EPA és a DHA hatását a jelen időszak leggyakrabban alkalmazott vírusellenes szerével, az „Acyclovir”- ral [9-(2-hidroxi-etoximetil)-guanin] vetették össze. Megállapították, hogy különösen a DHA- tartalmú készítmények herpesz vírus ellen előnyösebbek, mint az Acyclovir. A szakirodalomban még számos cikk foglalkozik a DHA és az EPA vírusellenes hatásával, így például Whitaker és munkatársai (Proc. Natl. Acad. Sei. USA 76, No. 11, 5919 (1979)], valamint Goodnight és munkatársai [Arteriosclerosis, 2, 87 (1982)], továbbá Yoshiaki (Biochimia et Biophysica Acta, 793, 80 (1984) ]. Prickett és munkatársai [Immunology 46, 819 (1982)] kimutatták, hogy az eikozapentaénsav mint arachidonsav-analóg serkenti a humorális immunválaszt. A tojásalbuminra adott specifikus IgG- és IGE- termelés beltenyésztett Spargue-Dawley patkányban EPA-ban gazdag diéta hatására a kontrolihoz képest 4—8 szorosára emelkedik. A közlemény szerint az EPA-gazdag diéta megemelkedett ellenanyagválaszt indukál. A vizsgálatok kimutatták továbbá, hogy az EPA a szupresszív hatású prosztaglandin-rendszer gátlásán át fejti ki hatását, azaz képes az életkorral járó immundeficiencia és egyéb kóros folyamatok (autoimmun folyamatok, tumorogenézis) gátlására, illetve korrigálására. E megállapításokat közleményeikben Kelley és munkatársai [J. of Immunoi. 134, 1914 (1985) ] és Homey és munkatársai [Clin. Exp. Immunol. 65, 473 (1986)] is alátámasztják. Régóta ismeretes Pearson és munkatársai [Proc. Soc. Exp. Bioi. Med. 79. 409 (1952)] in vivo vizsgálatai alapján, hogy az 1- lizinnek encephalomyelitis vírust gátló hatása van. A későbbiek folyamán Tankersley R. W. [J. Bacht. 87, 609 (1964)] világított rá arra, hogy a lizin in vitro körülmények között humán sejtekben megakadályozza a herpes simplex vírus (HSV) replikációját. Kagan humán vizsgálatai alapján 1974-ben közölte [The Lancet, 1, 137 (1974)], hogy 1 -lízines kezeléssel mind az orális, mind a genitális herpes simplex vírus okozta léziók igen gyorsan eltűnnek. Griffith és munkatársai [Dermatologica, 156, 257 (1978)] 45 beteg bevonásával vizsgálták a 1 -lizin terápiás hatását különböző adagokban, eltérő kezelési időtartamok alatt, HSV I-gyel és HSV Il-vel fertőzött egyedeken. A betegek (elsősorban nők) kora 8 és 60 év között változott. A szerzők megállapították, hogy az 1-lizinnek a HSV-re csak szuprimáló, de nem gyógyító hatása van. A találmány célja olyan új gyógyhatású só(k) és ezek felhasználásával gyógyászati kompozíció(k) előállítása, melyek egyesítik az w-3 telítetlen zsírsavak és az aminosavak, így különösen a lizin, omitin és hisztidin kedvező gyógyászati hatásait, és minden eddigi vírusellenes szernél erősebb hatást mutatnak. A találmány alapja az a felismerés, hogy ha az ©-3 telítetlen zsírsavakat, különösen az EPA-t és a DHA-t aminosavakkal, illetve ezek származékaival, különösen lizinnel sóvá alakítjuk, a belőlük képzett só erős vírusellenes és immunstimuláns hatású. A fentiek alapján a találmány eljárás vírusellenes és immunstimuláns hatású (I) általános képletű új sók előállítására, R-COO-AH+ (I)- amely képletben R jelentése legalább két telítetlen kettőskötést tartalmazó Ci8-24 szénatomos alkilcsoport, A jelentése valamely, az élő szervezetekben előforduló aminosav és/vagy ilyen aminosav 1-4 szénatomos alkilésztere vagy amino csoporttal vagy alkáli kationnal képzett sója vagy amidja. A találmány értelmében úgy járunk el, hogy valamely (I) általános képlet szerinti A aminosavat mint bázist - ahol a szubsztituensek jelentése a fenti - valamely (II) általános képletű savval R-COOH (II)- ahol R jelentése a fenti - poláros oldószerben reagál tatunk. A találmány értelmében hatóanyagként előnyösen Ci8-24 lánchosszúságú, legalább 2 telítetlen kettős kötést tartalmazó ©-3 telítetlen zsírsavak bázikus jellegű aminosavakkal, illetve azok származékaival alkotott sóit alkalmazhatjuk. Abból a célból, hogy a találmány szerinti (I) általános képletű sót állítjuk elő, célszerűen az alábbi módokon járhatunk el: a) ©-3 politelítetlen zsírsav elegyet, melynek EPA tartalma 27,6 %-os és DHA tartalma 44,6 %, szobahőmérsékleten ,A”-val jelzett aminosavnak mint például 1-lizin-monohidrátnak vizes oldatához csepegtetjük és az elegyet nitrogén atmoszférában 40 °C-on 3 óra hosszat kevertetjük. Az oldószer vákuumban eltávolítjuk, mikoris kristályos sót nyerünk (op. 188-195 °C bomlik). b) metanol-víz 1:1 arányú elegyében NaOH-t oldunk és a kapott elegybe a lúggal megegyező mól 1-tirozint oldunk. A kapott 1-tirozin-alkáli só oldathoz szobahőmérsékleten az a) pont szerinti w-3 politelítetlen zsírsav elegyet csepegtetjük. A továbbiakban mindenben az a) pont szerint járunk el. A kapott sárga kristály op-ja: 150 °C (részben bomlik) c) mindenben a b) pont szerint járunk el azzal a különbséggel, hogy „A” általános képletű aminosav származékként glutamint alkalmazunk. Barnás porszerű kristályos sót kapunk, op. 181-190 °C. d) az a) pont szerinti ©-3 politelítetlen zsírsav elegyet 1- lizinetilészter 1:1 arányú vizes-etilalkoholos oldatához csepegtetjük szobahőmérsékleten. A továbbiakban mindenben az a) pont szerint járunk el. Sárgásbarna, szilárd sót kapunk, (op. 160-164 °C, bomlik) 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 2
