199508. lajstromszámú szabadalom • Eljárás GRF peptidek és ezeket hatóanyagként tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
HU 199508 B 2 A találmány tárgya eljárás új, az ember és állat, különösen emlősök hipofízisének működésére ható új peptidek és az ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására. A találmány szerinti eljárással előállított pepiid elősegíti a növekedési hormon felszabadulását. A fiziológusok már régen felfedezték, hogy a hipotalamusz ellenőrzi az adenohipofízis váladékképző működését azáltal, hogy olyan speciális polipeptideket termel, amelyek megindítják a hippofízis hormonjainak kiválasztódását. Találtak egy olyan faktort, amely a növekedési hormon (továbbiakban GH) kiválasztását gátolja, s ezt somatostatinnak nevezték. Egy megfelelő, hipotalamikus felszabadító faktort nemrégiben izoláltak emberi hasnyálmirigy tumor extraktumból, tisztítás, jellemzés, szintetizálás és vizsgálat után megállapították e pepiid szekvenciáját, amely a következő: H-Tyr-Ala-Asp-Ala-lle-Phe-Thr-Asn-Ser-Tyr--Arg-Lys-Val-Leu-Gly-Gln-Leu-Ser-Ala-Arg-Lys-Leu-Leu-Gln-Asp-Ile-Met-Ser-Arg-Gln-Gln-Gly-Glu-Ser-Asn-Gln-Glu-Arg-Gly-Ala-Arg-Ala-Arg-Leu-OH Ennek a pepiidnek létezik egy amidált formája is, melyet a továbbiakban hGRF-nek (emberi hasnyálmirigy tumor GH felszabadító faktor) nevezünk. (J. of Biol. Chem., 258, 3,/1983/, 1806—1812). Egy olyan polipeptidet, amely tenyésztett hipofízis sejtekből GH-t szabadít fel, patkány hipotalamusz extraktumból izoláltunk, tisztítottunk, jellemeztünk, szintetizáltunk. Ennek a 43 aminosav-részből álló, természetben is előforduló pepiidnek a szekvenciája a következő: H-His-Ala-Asp-Ala-Ile-Phe-Thr-Ser-Ser-Tyr--Arg-Arg-Ile-Leu-Gly-Gln-Leu-Tyr-Ala-Arg-Lys-Leu-Leu-His-Gly-lle-Met-Asn-Arg-Gln-Gln-Gly-Glu-Arg-Asn-Gln-Glu-Arg-Ser-Arg--Phe-Asn-OH A fenti pepiidet a továbbiakban rGRF-nek (patkány hipotalamusz GH felszabadító faktor) nevezzük. (1. Nature, 303, /1983/, 532— 535). A találmány szerint a hGRF bizonyos analógjait, melyek jelentősen hatékonyabbak, mint a hGRF maga, s melyek közül sok kevesebb aminosav-részből épül fel, állítottuk elő és vizsgáltuk. Az analógok közül néhányban az rGRF-fel azonos szubsztituensek találhatók, míg másokban egyéb szubsztituensek. A találmány szerinti gyógyászati készítmények a hGRF-nek ezen analógjait vagy ezek nem toxikus sóját tartalmazzák gyógyászatilag alkalmas folyadék vagy szilárd hordozóanyagban diszpergálva. A gyógyászati készítményeket a klinikai gyógyászatban emberek és állatok terápiás kezelésére és diagnosztikai célokra alkalmazhatjuk. Felhasználhatjuk melegvérű állatok, többek között szárnyasok és hidegvérű állatok, például halak, angolnák növekedésének elősegítésére is. 1 2 A leírás során a peptidek meghatározására a Schroder és Lubke „The peptides" (Academic Press, 1965) című könyvében definiált nómenklatúrát alkalmaztuk, mely szerint a szokványos ábrázolásnál az N-terminális aminocsoport bal oldalon, míg a C-terminális karboxilcsoport a jobb oldalon helyezkedik el. Természetes aminosav alatt a proteinekben található, közönséges, természetben előforduló aminosavakat értjük: Gly, Ala, Val, Leu, Ile, Ser, Thr, Lys, Arg, Asp, Asn, Glu, Gin, Cys, Met, Phe, Tyr, Pro, Trp, His. A fenti jelölés az aminosav L-formáját jelenti, amennyiben kifejezetten utalás nem történik arra, hogy a D-formát kell ezalatt érteni. A leírás során az rGFR-t a hGRF analógjának tekintjük. A találmány a következő (I) általános képletű hGRF peptidek előállítására vonatkozik: H-Ri-Ala-Asp-Ala-Ile-Phe-Thr-Rg-Ser-R10- -Arg-R|2-R13-Leu-R,s-Gln-Leu-R18-Ala-Arg-Lys-Leu-Leu-R24-R25-He-R27-R28 (I) előállítására, amely képletben R, jelentéseTyr, D-Tyr, His, D-His, Phe, R8 jelentése Asn, R,0 jelentése Tyr, D-Tyr, Phe, Rl2 jelentése Lys, R,3 jelentése Val, R,5 jelentése Gly, D-Ala, R18 jelentése Ser, R24 jelentése Gin, R25 jelentése Asp, R27 jelentése Met, D-Met, Nie, Ile, Val, R28 jelentése NH2 Ser-Arg-NH2, Ser-Arg-Gln-Gln-Gly-NH2, Ser-Arg-Gln-Gln-Gly-OH, Ser-Arg-Gln-Gln-Gly-Glu-Ser-Asn-Gln-Glu-Arg-Gly-Ala-NH2, Ser-Arg-Gln-Gln-Gly-Glu-Ser-Asn-Gln-Glu-Arg-Gly-Ala-Arg-Ala-Arg-Leu-NH2, vagy R, jelentése His, Met, Tyr, Leu, Rg jelentése Ser, R,0 jelentése Tyr, D-Tyr, R,2 jelentése Arg, Ru jelentése Ile, Rj5 jelentése Gly, Rlg jelentése Tyr, R24 jelentése His, R25 jelentése Glu, R27 jelentése Met, Nie, R28 jelentése Asn-Arg-NH2, Asn-Arg-Gln-Gln-Gly-NH2, Asn-Arg-Gln-Gln-Gly-Glu-Arg-Asn-Gln-Glu-Gln-Arg-Ser-NH2, Asn-Arg-Gln-Gln-Gly-Glu-Arg-Asn-Gln-Glu-Gln-Arg-Ser-Arg-Phe-Asn-NH2, vagy Asn-Arg-Gln-Gln-Gly-Glu-Arg-Asn-Gln-Glu-Gln-Arg-Ser-Arg--Phe-Asn-OH. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65
