199461. lajstromszámú szabadalom • Eljárás oktahidro-indolizin és -pirido(1,2-a)pirimidin-propánsav-származékok előállítására

HU iyy4bl b

hajtjuk végre: a tengerimalac csipőbél (2— 3 cm hosszú) szeleteit hosszirányban Krebs-oldatot tartalmazó 10 ml szervfűrdőbe függesztjük fel. A Krebs-oldat összetétele a következő:

Alkotórészek Koncentráció (mM)

NaCl 118,2

KC1 4,6

’2,5

1.2

CaCl2.2H20

kh2po4

MgS04

Dextróz

NaHC03

1,2

10,0

24,8

Minden kísérletben a szöveteket 37°C-on tartjuk és 95% 02 és 5% C02 eleggyel levegőztetjük. A csipőbélszeleteket rozsdamentes acélpálcából (alsó) és körkörös platinadrótból (felső) álló két elektród között helyezzük el. Szupramaximális feszültségű (40 v) és

0,7 msec tartamú négyszöghullámimpulzusokat (0,1 Hz) hozunk létre Grass S44 stiniulátor segítségével. A szöveteket mintegy 1 óráig kiegyensúlyozzuk 1 g erőt alkalmazva. 5 Az izometrikus reagálásokat „Beckman Dynograph" útján regisztráljuk.

Az angiotenzin I három vagy négy koncentrációjával kapott koncentráció/hatás görbéket megszerkesztjük. Ezután a szöveteket ki 10 egyensúlyozzuk a vizsgálandó oldattal (10-6 - 10-5 M) és újra felvesszük az angiötenzin I-re kapott koncentráció/hatás görbéket.

Ezenfelül a találmány szerinti vegyüietek ACE-gátló hatását az A.V. Persson és 15 munkatársai által leírt, módosított kromogén próbával is kimutatjuk (Anal. Biochem. 91, 674 (1978)). Ezen eljárással az enzim 50%-os gátlásához szükséges vegyületmennyiség (I50) határozható meg. E próbák eredményei az 20 I. táblázatban láthatók.

6

I. táblázat

A58365-származékok ACE-bénxtó aktivitása

Vegyület

I /x10~9M/

5 0

Kß /x10~9M/-log *3

Tetrahidrodezoxi-A

7,5

200

6,69

Dezoxi-A

4

21

7,67

Dekarboxi-A

300-Dekarboxidezoxi-A

70-Tetrahidro-A

5

200

6,69

Tetrahidrodezoxi-B-150

6,82

Tetrahidro-B-77

7,11

Captopril

16

4,7

8,33

Az ACE-bénító aktivitást a találmány szerinti vegyületek vérnyomáscsökkentő hatása is mutatja nátriumhiányos patkányokon.

A találmány szerinti ACE-gátló vegyületek magas vérnyomásos emlősöknél a vérnyomás csökkentésére használhatók. A vegyületek — beleértve az észtereket —, vagy gyógyszerészetileg elfogadható sóik ezért a magas vérnyomásos betegeknek körülbelül 200 mg — 2000 mg közötti vérnyomáscsökkentő dózisban adagolhatok. Parenterális adagoláshoz a vegyületet vagy sóját vagy biológiailag hasítható észterét injekcióhoz használatos, fiziológiásán elfogadható folyadékban oldjuk vagy szuszpendáljuk intramuszkuláris vagy intravénás injekció számára. Alkalmas folyadékok vagy hígítók, mint „Water for Injection", 0,9% konyhasóoldat, 5% glükózoldat vagy más szokványos hígító használható. Orális alkalmazáshoz a vegyületet vagy sóját vagy észterét zselatinkapszulákká, tablettákká vagy folyékony szuszpenziókká formáljuk. Napi egyszeri dózist vagy osztott dózisokat alkalmazhatunk.

4

Előnyben részesített ACE-bénítók azok az (1) általános képletű vegyületek melyekben . R és R, hidrogénatomot jelent, n=l vagy 2 és

Y jelentése =CH-CH= csoport.

Az A58365 A- és B-faktor azon származékait, melyek a dezoxi-A-faktor és a dezoxi- 50 -B-faktor ((le), illetve (lf) képlet) előállítására szolgáló hasznos közbenső termékek, a (4) általános képlettel adhatók meg, ahol n =1 vagy 2, és

R4 jelentése 2—5 szénatomos alkanoil- 55 -oxi-csoport.

A (4) általános képletű vegyületeket általában az A- és B-faktor acilezése útján állítjuk'elő. Például az alkanoil-oxi-származékokat úgy állítjuk elő, hogy az A- vagy a B-fak__ tor hidroxilcsoportját a kívánt 1—5 szénatomos alkánkarbonsav anhidridjével acilezzük tercier amin, mint trietil-amin vagy — előnyösen piridin jelenlétében. Például az A-fak-’ tort ecetsavanhidriddel piridin jelenlétében reagáltatva O-acetil-A-faktort kapunk. Az 65 acilezés úgy is végrehajtható, hogy a kívánt